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柞蠶膽綠素還原酶基因ApBVRB的克隆及表達(dá)分析
關(guān)鍵詞：柞蠶 膽綠素還原酶 組織表達(dá)譜 酶活性
摘要：柞蠶(Antheraea pernyi)幼蟲體壁顏色表現(xiàn)出高度多樣性。膽綠素還原酶(biliverdin reductase B,BVRB)可催化血紅素降解過程中產(chǎn)生的膽綠素還原成膽紅素,參與昆蟲體色形成。為明確BVRB在柞蠶幼蟲體色形成中的作用,克隆柞蠶膽綠素還原酶基因ApBVRB,檢測其mRNA表達(dá)水平,同時(shí)調(diào)查膽綠素還原酶的活性。ApBVRB編碼205個(gè)氨基酸,預(yù)測蛋白質(zhì)分子質(zhì)量為50.67 kD,等電點(diǎn)為5.15。氨基酸序列比對表明,ApBVRB與家蠶的黃素還原酶(flavin reductase,FR)具有75%的序列相似度。qRT-PCR檢測結(jié)果表明,ApBVRB在柞蠶幼蟲的所有受試組織器官中均表達(dá),除絲腺外,青、黃體色幼蟲之間的相對表達(dá)量并沒有顯著差異。酶活性檢測發(fā)現(xiàn),膽綠素還原酶活性在青、黃蠶的血淋巴和絲腺中有極顯著差異,推測可能由于血淋巴中該酶活性的差異而導(dǎo)致柞蠶幼蟲表現(xiàn)為青、黃2種體色。
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