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番茄2個(gè)ERF-B1亞族轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及其對(duì)生物和非生物脅迫響應(yīng)
關(guān)鍵詞：番茄 轉(zhuǎn)錄因子 乙烯反應(yīng)元件結(jié)合蛋白 生物和非生物脅迫 酵母單雜交
摘要：為進(jìn)一步研究番茄ERF轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控植物抗逆的分子機(jī)理,本研究以番茄浙雜-301為試驗(yàn)材料,分別克隆獲得2個(gè)乙烯反應(yīng)元件結(jié)合蛋白基因SlERF83和SlERF109,并對(duì)其進(jìn)行序列及表達(dá)分析。結(jié)果表明,番茄SlERF83和SlERF109基因分別含有678 bp和669 bp的開(kāi)放閱讀框,編碼225和222個(gè)氨基酸,各含有1個(gè)保守的AP2結(jié)構(gòu)域,屬于親水性蛋白。進(jìn)化分析表明,這2個(gè)ERF轉(zhuǎn)錄因子均屬于AP2/ERF家族中ERF亞族的B1組。SlERF83和SlERF109三級(jí)結(jié)構(gòu)都含有1個(gè)α-螺旋和3個(gè)β-折疊。酵母單雜交及β-半乳糖苷酶活性測(cè)定結(jié)果證明SlERF83轉(zhuǎn)錄因子可以與GCC-box結(jié)合。番茄2個(gè)ERF蛋白啟動(dòng)子含有多種逆境相關(guān)的順式作用元件。采用熒光定量PCR檢測(cè)SlERF83和SlERF109在非生物和生物脅迫下的表達(dá),結(jié)果表明,高鹽和干旱脅迫下,SlERF83和SlERF109基因的表達(dá)均被抑制;水楊酸處理能夠誘導(dǎo)SlERF83和SlERF109基因的表達(dá);茉莉酸甲酯處理下SlERF83表達(dá)水平提高,SlERF109表達(dá)量降低;番茄黃化曲葉病毒侵染下,SlERF83和SlERF109基因的表達(dá)均被抑制。SlERF83和SlERF109轉(zhuǎn)錄因子可能參與了番茄對(duì)生物及非生物脅迫的響應(yīng)過(guò)程。本研究結(jié)果為進(jìn)一步深入開(kāi)展ERF轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控番茄抗逆分子機(jī)制研究提供了一定的理論依據(jù)。
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