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MiR-26b靶向hENT1通過RhoA/ROCK-1通路調(diào)控肺癌細(xì)胞的侵襲和遷移
關(guān)鍵詞：肺癌 人平衡核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1 transwell侵襲試驗
摘要：目的：探討miR-26b在肺癌組織中的表達(dá)及miR-26b在肺癌細(xì)胞侵襲和遷移過程中的作用及其機(jī)制。方法：q PCR檢測肺癌和正常肺組織中miR-26b的表達(dá)情況;熒光素酶報告基因檢測miR-26b與人平衡核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（human equilibrative nucleoside transporter 1,hENT1）的相互作用;Transwell侵襲試驗檢測miR-26b的表達(dá)對肺癌細(xì)胞侵襲能力的影響;劃痕試驗檢測miR-26b的表達(dá)對肺癌細(xì)胞遷移能力的影響;Western印跡檢測h ENT1,ROCK-1,Rho A蛋白的表達(dá)情況;鬼筆環(huán)肽染色觀察miR-26b-mimic處理后細(xì)胞骨架的變化情況;裸鼠皮下成瘤試驗檢測miR-26b-mimic對肺癌成瘤大小及體積的影響。結(jié)果：與正常肺組織相比,肺癌組織中miR-26b表達(dá)明顯降低;且晚期、低分化和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌組織miR-26b表達(dá)明顯較早期、高分化和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肺癌組織低;miR-26b能與h ENT1的3＇-UTR特異性結(jié)合;miR-26b可以調(diào)控肺癌A549細(xì)胞的侵襲遷移能力;過表達(dá)miR-26b可以抑制h ENT1,ROCK-1,Rho A的表達(dá);miR-26b-mimic處理后,F-actin染色明顯減少,細(xì)胞膜皺褶形成明顯減少,偽足形成明顯減少;裸鼠皮下成瘤試驗顯示：miR-26b-mimic處理后腫瘤體積和質(zhì)量明顯減小。結(jié)論：MiR-26b在肺癌中表達(dá)明顯降低,且跟肺癌分期、分級及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否密切相關(guān),同時靶向h ENT1通過Rho A/ROCK-1信號通路調(diào)控肺癌細(xì)胞的侵襲和遷移。
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