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高表達(dá)OAZI-1的小鼠乳腺癌4T1細(xì)胞誘導(dǎo)抗腫瘤免疫應(yīng)答的實(shí)驗(yàn)研究
關(guān)鍵詞：乳腺癌細(xì)胞 抗腫瘤免疫
摘要：目的在細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物水平上分析高表達(dá)OAZI-1對(duì)小鼠乳腺癌4T1細(xì)胞誘導(dǎo)抗腫瘤免疫應(yīng)答的影響。方法RT-PCR和Western blot用于鑒定高表達(dá)OAZI-1的4T1細(xì)胞(4T1/OAZI-1);流式細(xì)胞儀檢測(cè)Mφ下同和DC對(duì)4T1細(xì)胞的吞噬率以及成熟DC標(biāo)志性表面分子的表達(dá)水平;ELISA檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清和小鼠血清中IFN-γ和TNF-α含量。用4T1/OAZI-1和4T1/3.1對(duì)照細(xì)胞分別接種Balb/c小鼠后,觀察接種瘤的生長(zhǎng)狀況及荷瘤小鼠的生存期。結(jié)果1)成功構(gòu)建OAZI-1高表達(dá)的4T1/OAZI-1細(xì)胞株;2)M?和DC對(duì)4T1/OAZI-1細(xì)胞的吞噬率(10.8%,58.4%)顯著高于對(duì)照細(xì)胞(6.3%,19.6%);3)將DC與4T1/OAZI-1共孵育后,CD40、CD80和CD86(成熟DC細(xì)胞表面標(biāo)志分子)表達(dá)陽(yáng)性的DC比率(62.8%、77.9%和75.1%)顯著高于和對(duì)照細(xì)胞共孵育的DC(43.9%、57.5%和49.6%);4)將4T1/OAZI-1活化的DC與Balb/c小鼠脾淋巴細(xì)胞共孵育后,細(xì)胞培養(yǎng)上清中IFN-γ含量(28.7 pg/ml)顯著高于對(duì)照細(xì)胞(19.4 pg/ml);5)將4T1/OAZI-1和4T1/3.1細(xì)胞分別接種Balb/c小鼠右前肢腋窩皮下,小鼠體內(nèi)4T1/OAZI-1接種瘤的生長(zhǎng)速度顯著低于對(duì)照細(xì)胞接種瘤,其生存期和血清TNF-α和IFN-γ水平也明顯高于接種對(duì)照細(xì)胞的小鼠。結(jié)論高表達(dá)OAZI-1的小鼠乳腺癌4T1細(xì)胞能更有效地被抗原提呈細(xì)胞識(shí)別、吞噬并誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞活化與成熟,誘導(dǎo)機(jī)體的抗腫瘤免疫應(yīng)答,抑制接種瘤在動(dòng)物體內(nèi)的生長(zhǎng)。
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