關(guān)鍵詞:基質(zhì)金屬蛋白酶3 性別決定相關(guān)高遷移率簇蛋白盒基因9 椎間盤退行性變
摘要:目的探討基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)基因與性別決定相關(guān)高遷移率簇蛋白盒基因9(Sox9)調(diào)控在人椎間盤退變髓核細胞中的作用。方法構(gòu)建MMP3與Sox9慢病毒表達載體,感染人退變髓核細胞,按照處理方式不同分為4組,分別為空白對照組(A組)、MMP3沉默轉(zhuǎn)染組(B組)、Sox9過表達組(C組)以及MMP3沉默+Sox9過表達共轉(zhuǎn)組(D組),各組髓核細胞置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),定期換液。72h后,通過熒光定量PCR方法檢測轉(zhuǎn)染人退變髓核細胞Ⅱ型膠原、蛋白多糖mRNA的表達,通過Western Blot方法檢測轉(zhuǎn)染人退變髓核細胞Ⅱ型膠原、蛋白多糖蛋白的表達。結(jié)果 B、C、D組蛋白多糖、Ⅱ型膠原蛋白及mRNA表達水平與A組比較明顯增高,差異具有顯著性(F=84.50~413.09,q=4.57~49.13,P〈0.01);D組蛋白多糖、Ⅱ型膠原蛋白及mRNA表達水平與B、C組比較,差異具有顯著性(q=13.72~30.24,P〈0.01)。結(jié)論 MMP3基因沉默、Sox9基因過表達可以促進人退變髓核細胞蛋白多糖、Ⅱ型膠原的分泌,延緩椎間盤退變,且二者之間具有協(xié)同作用。
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