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敲降胰高血糖素基因?qū)σ葝u素瘤形成的影響
關(guān)鍵詞：胰島素瘤 胰島素 葡萄糖 胰高血糖素
摘要：目的通過體外培養(yǎng)的胰島素瘤細(xì)胞和胰島素瘤動(dòng)物模型,探討敲降胰高血糖素基因?qū)σ葝u素瘤形成的影響。方法通過免疫熒光染色,激光共聚焦顯微鏡觀察INS-1細(xì)胞胰島素和胰高血糖素蛋白的表達(dá),應(yīng)用慢病毒pLVTHM-glucagon敲降INS-1細(xì)胞的胰高血糖素基因,建立胰高血糖素低表達(dá)的INS-1細(xì)胞系,將細(xì)胞分成空白對(duì)照組(不進(jìn)行感染)、單純轉(zhuǎn)染慢病毒組(感染pLVTHM)和敲降胰高血糖素組(感染pLVTHM-shglucagon)。 MTT法比較敲降胰高血糖素后INS-1細(xì)胞增殖能力、ELISA法和放射免疫分析法觀察胰島素和胰高血糖素的釋放能力。將3組細(xì)胞分別移植到胰島素瘤模型裸鼠左腎包膜下,觀察細(xì)胞成瘤能力,并通過免疫組織化學(xué)染色法觀察腫瘤組織中胰島素和胰高血糖素的表達(dá)。結(jié)果與空白對(duì)照組和單純轉(zhuǎn)染慢病毒組相比,敲降胰高血糖素組的INS-1細(xì)胞增殖能力減弱,葡萄糖刺激的胰島素分泌功能無明顯變化,但胰高血糖素分泌明顯減少;與單純轉(zhuǎn)染慢病毒組相比,敲降胰高血糖素組細(xì)胞移植到裸鼠腎包膜下時(shí),細(xì)胞成瘤速度明顯降低;免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示此胰島素瘤組織胰高血糖素表達(dá)明顯下調(diào)。結(jié)論敲降胰高血糖素基因可抑制胰島素瘤細(xì)胞的增殖和胰高血糖素的釋放,從而抑制胰島素瘤的形成,提示胰高血糖素基因表達(dá)可能是胰島素瘤發(fā)生的一個(gè)重要機(jī)制。
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