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普通小麥TaZIP29-7B基因的克隆及表達(dá)研究
關(guān)鍵詞：小麥 基因克隆 重金屬 表達(dá)分析
摘要：金屬離子在小麥生長(zhǎng)過程中起重要作用,但土壤中金屬離子含量過高,會(huì)對(duì)小麥生長(zhǎng)造成損害。鋅鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ZIP家族(ZRT,IRT-like protein,ZIP)廣泛存在于植物中,參與多種金屬離子的轉(zhuǎn)運(yùn),也能提高植物的耐鹽性。利用同源克隆技術(shù)獲得AtZTP29在小麥中的同源基因TaZIP29-7B,并獲得其啟動(dòng)子序列,利用生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)所獲得的基因以及啟動(dòng)子序列進(jìn)行初步分析,預(yù)測(cè)啟動(dòng)子順式作用元件,通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技術(shù)分析小麥TaZIP29-7B基因在根和葉中在不同金屬離子溶液處理下的表達(dá)情況,以研究該基因在小麥體內(nèi)中對(duì)重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)的作用。結(jié)果表明:序列分析顯示TaZIP29-7B基因(登錄號(hào)MK203894)編碼277個(gè)氨基酸,TaZIP29-7B蛋白為疏水性蛋白,定位在細(xì)胞膜上,存在信號(hào)肽,屬于分泌蛋白,第89~263位置間的結(jié)構(gòu)功能域ZIP,屬于典型的ZIP超級(jí)家族結(jié)構(gòu)域,具有8個(gè)跨膜區(qū);進(jìn)化分析顯示TaZIP29-7B與單子葉植物山羊草(Aegilops tauschii)ZIP29蛋白同源性最高;啟動(dòng)子中存在多種響應(yīng)脅迫的順式作用元件;qRT-PCR結(jié)果顯示,小麥TaZIP29-7B基因在外界重金屬鹽的變化下表達(dá)量有所變化。說明研究結(jié)果為進(jìn)一步改良小麥抗鹽性提供了參考。
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