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關(guān)鍵詞：山姜素 甲基cpg結(jié)合蛋白2 炎性因子 炎癥小體通路 

摘要：通過(guò)分析甲基CpG結(jié)合蛋白2(methyl CpG binding protein 2, MeCP2)對(duì)山姜素作用下鼠巨噬細(xì)胞(RAW246.7)合成IL-6和TNF-α的影響及作用機(jī)制,揭示山姜素與MeCP2聯(lián)合應(yīng)用對(duì)于炎癥性疾病的干預(yù)潛力。用重組質(zhì)粒pEGFP-C1-MeCP2以及空白質(zhì)粒pGL-basic分別轉(zhuǎn)染RAW246.7,后將細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組、山姜素組(終濃度1 mg/mL)以及山姜素+GW9662(0.1 mmol/L)組。孵育72 h后,ELISA檢測(cè)培養(yǎng)液中IL-6和TNF-α表達(dá)水平,Western blotting分別檢測(cè)細(xì)胞核內(nèi)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferators-activated receptor, PPAR)、MeCP2以及胞質(zhì)中NLRP3、pro-Caspase-1和各聚集狀態(tài)凋亡相關(guān)微粒蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD, ASC)含量,并采用免疫熒光染色法檢測(cè)ASC斑點(diǎn)形成情況。結(jié)果顯示,與空白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染比較,重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染RAW246.7在山姜素作用下合成IL-6和TNF-α的水平更低;而在對(duì)照組以及GW9662組,轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒對(duì)炎性因子合成無(wú)明顯影響。山姜素對(duì)MeCP2表達(dá)無(wú)促進(jìn)作用,且重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染對(duì)PPAR表達(dá)亦無(wú)影響。另外,山姜素可明顯抑制RAW246.7胞質(zhì)NLRP3合成,但對(duì)pro-Caspase-1含量以及ASC聚集狀態(tài)無(wú)顯著影響;而過(guò)表達(dá)MeCP2可遏制pro-Caspase-1合成并促進(jìn)ASC解聚。由此,MeCP2可通過(guò)抑制炎癥小體通路以促進(jìn)山姜素對(duì)鼠巨噬細(xì)胞炎性因子合成的抑制,提示山姜素與MeCP2聯(lián)合有望成為炎癥性疾病防治的新策略。

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