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攜帶小鼠β-珠蛋白基因的安全性慢病毒載體的優(yōu)化研究
關(guān)鍵詞：自刪除型慢病毒載體 基因治療 表達(dá)優(yōu)化
摘要：目的 對(duì)基因治療β-地中海貧血 ( β-thalassemia, 簡(jiǎn)稱β-地貧) 的安全性自刪除慢病毒載體進(jìn)行優(yōu)化.方法 通過(guò)對(duì)比3種啟動(dòng)子預(yù)測(cè)軟件的分析結(jié)果, 設(shè)計(jì)并構(gòu)建包含3種不同長(zhǎng)度的小鼠珠蛋白基因 (β-globin) 啟動(dòng)子的表達(dá)載體;在Cos7細(xì)胞水平上檢驗(yàn)其報(bào)告基因及小鼠β-珠蛋白基因的表達(dá)效率.隨后, 進(jìn)行安全性慢病毒載體的構(gòu)建及病毒包裝, 并在細(xì)胞水平檢驗(yàn)了其自刪除效率及表達(dá)β-珠蛋白基因的效果.結(jié)果 長(zhǎng)度為750 bp的小鼠β-globin啟動(dòng)子表達(dá)效果最佳, 且所構(gòu)建的慢病毒載體Lenti-Mhbb經(jīng)病毒包裝, 在細(xì)胞水平可有效的進(jìn)行功能性表達(dá)及自刪除.結(jié)論 優(yōu)化了基因治療β-地貧的安全性自刪除慢病毒載體.
醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志要求:
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