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人IgE Fc原核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)、純化及對(duì)肥大細(xì)胞脫顆粒的抑制作用

李雪飛; 陸海濤; 劉利君; 楊寧; 馬麗娜; 吳景良; 牛艷東; 段昕所 承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院; 河北承德067000

關(guān)鍵詞:ige fc 肥大細(xì)胞脫顆 原核載體構(gòu)建 表達(dá) 

摘要:目的探討人IgE Fc原核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)、純化及對(duì)肥大細(xì)胞脫顆粒抑制作用。方法以pEGFP-N1/IgE Fc真核表達(dá)載體為模版,用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法擴(kuò)增IgE Fc編碼序列,通過鎳柱親和層析進(jìn)一步純化獲得的蛋白質(zhì),采取酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)致敏肥大細(xì)胞中β-己糖胺酶和細(xì)胞因子。結(jié)果致敏肥大細(xì)胞中,抗原蛋白的表現(xiàn)形式主要是以涵體的模式存在且被成功純化;pET-32a(+)-IgE Fc作用于未被致敏的RBL-2H3細(xì)胞后,RBL-2H3細(xì)胞的細(xì)胞膜平滑,細(xì)胞緊密貼覆于細(xì)胞壁,形態(tài)為梭形。結(jié)論pET-32 a(+)-IgE Fc可抑制肥大細(xì)胞的脫顆粒,但不會(huì)對(duì)致敏肥大細(xì)胞活性造成影響,為人IgE Fc和哮喘等過敏性疾病研究提供了理論基礎(chǔ)。

中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志要求:

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{4}摘要應(yīng)包括目的、方法、結(jié)果和結(jié)論四個(gè)部分,其中中文摘要約300字,英文摘要約600-800字。關(guān)鍵詞2至5個(gè)(中英文)。

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