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三甲基氯化錫誘導的非洲綠猴腎細胞蛋白質表達譜改變
關鍵詞：三甲基氯化錫 vero細胞 微管蛋白
摘要：目的分析三甲基氯化錫（trimethyhinchloride，TMT—C1）誘導的非洲綠猴腎細胞（vero細胞）和正常vero細胞之間差異表達蛋白質，以尋找相關的標志物，探討TMT—C1所致腎損傷的分子機制。方法通過雙向凝膠電泳和液相色譜一電噴霧線性離子阱質譜技術比較TMT．C1染毒的vem細胞和正常veto細胞之間蛋白質表達譜的差異，蛋白免疫印跡技術分析其中的2個差異蛋白AnnexinA1和et6-Tubulin的表達以驗證雙向電泳的結果，反轉錄熒光定量聚合酶鏈式反應技術進一步分析AnnexinAl和僅6一Tubulin在mRNA水平的表達。結果比較TMT—C1染毒的vero細胞和正常vero細胞蛋白質表達譜，共獲得15個差異蛋白點，9個通過質譜分析得到鑒定，3個上調，6個下調。與對照組比較，各TMT．C1染毒組d6一Tubulin蛋白質和mRNA表達水平均下調，差異有統(tǒng)計學意義（P〈O．01）。與對照組比較，各染毒劑量組AnnexinAl蛋白表達水平均上調，25和50p．μmol／L組mRNA表達水平下調，100μmol／L組的mRNA表達水平上調，差異均有統(tǒng)計學意義（P〈0．01）。結論雙向凝膠電泳結合質譜分析篩選到的9個差異表達蛋白與TMT．C1所致腎細胞毒性密切相關，可作為早期診斷、治療及療效評價的候選生物標志物。
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