導(dǎo)言：作為寫(xiě)作愛(ài)好者，不可錯(cuò)過(guò)為您精心挑選的10篇營(yíng)業(yè)申請(qǐng)書(shū)，它們將為您的寫(xiě)作提供全新的視角，我們衷心期待您的閱讀，并希望這些內(nèi)容能為您提供靈感和參考。

篇1

本人XXX，身份證號(hào)：XXX，系XXX的經(jīng)營(yíng)者，因本人保管不善，造成營(yíng)業(yè)執(zhí)照正本遇水損壞，現(xiàn)需補(bǔ)辦營(yíng)業(yè)執(zhí)照正本，望予以方便辦理，由此造成的一切法律后果，均有本人承擔(dān)。

申請(qǐng)人：

年 月 日

補(bǔ)辦營(yíng)業(yè)執(zhí)照申請(qǐng)書(shū)

XXX市工商行政管理局：

XXXX公司不慎遺失營(yíng)業(yè)執(zhí)照正本，注冊(cè)號(hào)：XXXXXX .  特申請(qǐng)補(bǔ)辦營(yíng)業(yè)執(zhí)照正本，望批準(zhǔn)為盼！

篇2

但因?yàn)槟承﹤€(gè)人的理由，我終究忍痛選擇了向公司提出告退申請(qǐng)，并但愿能于下個(gè)月xx號(hào)正式離職。但愿領(lǐng)導(dǎo)能早日找到合適的人手接替我的工作，我會(huì)盡力配合公司做好交接工作，保證銷(xiāo)售業(yè)務(wù)的正常運(yùn)作， 對(duì)公司，對(duì)客戶(hù)盡好最后的責(zé)任。

篇3

在此我先對(duì)部門(mén)的領(lǐng)導(dǎo)和同事對(duì)我一直的指導(dǎo)和幫助表示感謝。

作為一個(gè)剛到公司的不久新員工，曾經(jīng)很擔(dān)心不知該怎么與人共處，該如何做好工作；但是公司寬松融洽的工作氛圍、團(tuán)結(jié)向上的企業(yè)文化，讓我很快完成了從新人到職員的轉(zhuǎn)變。

在這幾個(gè)月工作期間，營(yíng)業(yè)部的工作程序和方法是我以前從未接觸過(guò)的，和我的專(zhuān)業(yè)知識(shí)相差也較大；但是部門(mén)領(lǐng)導(dǎo)和同事的耐心指導(dǎo)，使我在較短的時(shí)間內(nèi)適應(yīng)了公司的工作環(huán)境，也熟悉了公司的整個(gè)操作流程，使我從一個(gè)新手到一個(gè)能熟練操作的員工。

這段時(shí)間的學(xué)習(xí)和實(shí)踐讓我從公司前輩們那學(xué)到了很多有用的經(jīng)驗(yàn)到同時(shí)我自己也在不斷的探索更有效更準(zhǔn)確的工作方法向更高的層次邁進(jìn)。

另外，公司規(guī)范的管理制度和完善的工作模式，也讓我學(xué)習(xí)到了很多，培養(yǎng)了自己一個(gè)很好的工作習(xí)慣和職業(yè)素養(yǎng)。在本部門(mén)的工作中，也一直都嚴(yán)格要求自己，認(rèn)真及時(shí)做好布置的每一項(xiàng)任務(wù)，同時(shí)主動(dòng)為領(lǐng)導(dǎo)分憂(yōu)；不懂的問(wèn)題虛心向同事學(xué)習(xí)請(qǐng)教，不斷提高充實(shí)自己，希望能盡早精通本崗位且熟悉部門(mén)其他崗位操作，為公司做出更大的貢獻(xiàn)。

當(dāng)然，初入職場(chǎng)，難免出現(xiàn)一些小差小錯(cuò)需領(lǐng)導(dǎo)指正；但前事之鑒，后事之師，這些經(jīng)歷也讓我不斷成熟，在處理各種問(wèn)題時(shí)考慮得更全面，杜絕類(lèi)似失誤的發(fā)生。在此，我要特地感謝部門(mén)的領(lǐng)導(dǎo)和同事對(duì)我的入職指引和幫助，感謝他們對(duì)我工作中出現(xiàn)的失誤的提醒和指正。

篇4

自XX年X月X日入司以后，在公司嚴(yán)格要求下，在部門(mén)領(lǐng)導(dǎo)和同事們幫助教育下，思想理論上日漸成熟。業(yè)務(wù)頭腦更加清醒。特別是通過(guò)部門(mén)及小組一系列的學(xué)習(xí)和鍛煉，使我進(jìn)一步增強(qiáng)了業(yè)務(wù)性，更加明確了作為一名業(yè)務(wù)員在實(shí)際工作中要實(shí)事求是、勇于進(jìn)取，作一名合格的業(yè)務(wù)員，不僅要勤勉，還要有方法；不僅要有IQ智商，也要具備EQ人情世故的對(duì)待處理能力，而且要具備靈性人格，才能真正造福自己的客戶(hù)，取得自己應(yīng)得的成果。

在部門(mén)培訓(xùn)兩周后就把全部精力投入到XX事業(yè)中。在組長(zhǎng)安排下，我去XX專(zhuān)賣(mài)店學(xué)習(xí)了五天，在回XX店培訓(xùn)了四天，在部門(mén)和小組的培訓(xùn)期間，我認(rèn)真學(xué)習(xí)了公司的管理制度、組織機(jī)構(gòu)、XX產(chǎn)品等各方面的基礎(chǔ)知識(shí)，在培訓(xùn)的過(guò)程中并試著去接觸顧客。更值得一提的是“感謝經(jīng)理給了我一個(gè)更好的學(xué)習(xí)和鍛煉機(jī)會(huì)”。在XX店和XX百貨獨(dú)立學(xué)習(xí)兼營(yíng)業(yè)員，是他鍛煉了我堅(jiān)強(qiáng)的意志和做業(yè)務(wù)堅(jiān)定的信念。學(xué)會(huì)了曾經(jīng)不會(huì)使用的產(chǎn)品，我在XX店和XX百貨的凈銷(xiāo)售總額近2萬(wàn)元。當(dāng)了幾天的營(yíng)業(yè)員真是獲益匪淺，碰到了各種各樣的顧客和問(wèn)題。基本知道了怎樣使客戶(hù)滿(mǎn)意，為客戶(hù)提供快樂(lè)及利益，滿(mǎn)足客戶(hù)想擁有更多，更好的心態(tài)及滿(mǎn)足其各層面心理需求，重視人性的需求，滿(mǎn)足其希望，重視被認(rèn)同、被肯定、被接受的心理。為達(dá)成使客戶(hù)滿(mǎn)意、滿(mǎn)足、安心、放心的購(gòu)買(mǎi)。歸納起來(lái)有以下幾點(diǎn)：

1、針對(duì)價(jià)格：應(yīng)該不要把自己陷于價(jià)格戰(zhàn)之中，應(yīng)以強(qiáng)調(diào)價(jià)值為重，提高附加價(jià)值的功效，在價(jià)格上差異性比較分析之后也會(huì)更實(shí)際、更便宜、更有效、更有用。

2、針對(duì)通路：方便、快速、服務(wù)到家……

3、針對(duì)商品：商品設(shè)計(jì)要依據(jù)市場(chǎng)需求來(lái)設(shè)計(jì)，以滿(mǎn)足市場(chǎng)的需求為依據(jù)舊。

4、針對(duì)促銷(xiāo)：掌握客戶(hù)的心理?xiàng)l件予以滿(mǎn)足。

5、針對(duì)實(shí)體：使客戶(hù)不但能看到、摸到、聽(tīng)到尚且能嗅到，以符合“心到、口到、手到、眼到”之要求。

6、針對(duì)程序：不僅有售前、售中之服務(wù)，尚有售后之服務(wù)，不斷的打電話(huà)、發(fā)信件、直接拜訪(fǎng)以了解起售后之使用情況。

與客戶(hù)做朋友，真心關(guān)心客戶(hù)的利益；使自己成為公司一個(gè)有專(zhuān)業(yè)能力之組合。滿(mǎn)足客戶(hù)要滿(mǎn)足他的腦：以理性來(lái)說(shuō)服；滿(mǎn)足客戶(hù)要滿(mǎn)足他的感覺(jué)：以氣氛、情緒來(lái)影響；滿(mǎn)足客戶(hù)要滿(mǎn)足他的心情：以贊美肯定來(lái)達(dá)成；滿(mǎn)足客戶(hù)要滿(mǎn)足他的視覺(jué)：以各種圖表來(lái)促成；滿(mǎn)足客戶(hù)要滿(mǎn)足他的聽(tīng)覺(jué)：以聲調(diào)、音樂(lè)聲來(lái)激起；滿(mǎn)足客戶(hù)要滿(mǎn)足他的觸覺(jué)：以質(zhì)感來(lái)影響其感受。

作為業(yè)務(wù)員要懂得運(yùn)用科學(xué)的方法，有效地處理工作上出現(xiàn)的每一項(xiàng)待解決的問(wèn)題，要有策略、手段、方法、技巧，才能使自己在工作的領(lǐng)域里脫胎換骨、大放異彩。

在部門(mén)、小組培訓(xùn)學(xué)習(xí)或在XX百貨和XX藥店當(dāng)營(yíng)業(yè)員期間，自己按著上述要求去用心觀察和留意過(guò)，當(dāng)營(yíng)業(yè)員時(shí)也做了一些工作，發(fā)揮了一個(gè)業(yè)務(wù)員的作用。但是，檢查起來(lái)，所存在的缺點(diǎn)毛病也是不少的，在何經(jīng)理的幫助教育下，有的克服了，有的還需今后努力改正，積極要求進(jìn)步。

篇5

我是，20xx年3月1日入職，入職時(shí)間雖然不長(zhǎng)，但是在同事們的幫助下，經(jīng)過(guò)了輪崗實(shí)習(xí)之后，我基本掌握了本部門(mén)各崗位的工作內(nèi)容，以及公司相關(guān)的管理制度，逐漸的適應(yīng)了這份工作。

作為一個(gè)應(yīng)屆畢業(yè)生，初來(lái)公司，曾經(jīng)很擔(dān)心自己不會(huì)與人共處，不知該如何做好工作;但是公司寬松融洽的工作氛圍、團(tuán)結(jié)向上的企業(yè)文化，讓我很快完成了從學(xué)生到職員的轉(zhuǎn)變。

在專(zhuān)服部的工作中，我一直嚴(yán)格要求自己，認(rèn)真及時(shí)做好領(lǐng)導(dǎo)布置的每一項(xiàng)任務(wù);專(zhuān)業(yè)和非專(zhuān)業(yè)上不懂的問(wèn)題虛心向同事學(xué)習(xí)請(qǐng)教，不斷提高充實(shí)自己，使自己盡早勝任工作，為公司做出更大的貢獻(xiàn)。當(dāng)然，初入職場(chǎng)，難免出現(xiàn)一些小差錯(cuò)需領(lǐng)導(dǎo)指正;但前事之鑒，后事之師，這些經(jīng)歷也讓我不斷成熟，在處理各種問(wèn)題時(shí)考慮得更全面，避免了類(lèi)似失誤的發(fā)生。因此，我要特地感謝部門(mén)的領(lǐng)導(dǎo)和同事對(duì)我的入職指引和幫助，感謝他們對(duì)我工作中出現(xiàn)的失誤的提醒和指正。

下面是我入職至今的工作總結(jié)：

略

這是我走出校門(mén)的第一份工作，所以我把所有的熱情都投入到這份工作當(dāng)中，努力的使自己能夠勝任它。這短短的一個(gè)月里，我看到了xx的專(zhuān)業(yè)實(shí)力和富有凝聚力的團(tuán)隊(duì)，能夠與這么多優(yōu)秀的人在一起，我感到深深地驕傲與自豪，也更加迫切的想成為xx的正式一員，希望能和優(yōu)秀的團(tuán)隊(duì)一起進(jìn)步，來(lái)實(shí)現(xiàn)企業(yè)和自身的價(jià)值。

因此，我提出轉(zhuǎn)正申請(qǐng)，希望領(lǐng)導(dǎo)能夠批準(zhǔn)。我會(huì)以謙虛的態(tài)度和飽滿(mǎn)的熱情努力工作，為xx創(chuàng)造價(jià)值。

此致

篇6

準(zhǔn)金屬能和氫氧化鈉溶液反應(yīng)，例如鋁、鋁、鎵、鋅、鍺、銦、錫、銻、鉈、鉛、鉍、釙都可以與氫氧化鈉反應(yīng)。

準(zhǔn)金屬，又稱(chēng)為半金屬，介于金屬和非金屬之間的物質(zhì)。準(zhǔn)金屬是一種元素，其外表呈現(xiàn)出金屬的特性，但在化學(xué)性質(zhì)上卻表現(xiàn)出金屬和非金屬兩種性質(zhì)。例如砷和銻，它們是堅(jiān)硬的結(jié)晶固體，外表顯然是金屬，但是當(dāng)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)時(shí)就表現(xiàn)出金屬和非金屬兩種不同的性質(zhì)。

它們的一些氧化物既溶于酸，也溶于堿，這就是所謂的兩性性質(zhì)，因?yàn)樗鼈兊男再|(zhì)既像堿又像酸。有許多元素也能生成兩性化合物。然而只有當(dāng)這種化學(xué)

（來(lái)源：文章屋網(wǎng) ）

篇7

作為一個(gè)應(yīng)屆畢業(yè)生，初來(lái)公司，曾經(jīng)很擔(dān)心不知該怎么與人共處，該如何做好工作；但是公司寬松融洽的工作氛圍、團(tuán)結(jié)向上的企業(yè)文化，讓我很快完成了從學(xué)生到職員的轉(zhuǎn)變。

在輪崗實(shí)習(xí)期間，我先后在工程部、成本部、企發(fā)部和辦公室等各個(gè)部門(mén)的學(xué)習(xí)工作了一段時(shí)間。這些部門(mén)的業(yè)務(wù)是我以前從未接觸過(guò)的，和我的專(zhuān)業(yè)知識(shí)相差也較大；但是各部門(mén)領(lǐng)導(dǎo)和同事的耐心指導(dǎo)，使我在較短的時(shí)間內(nèi)適應(yīng)了公司的工作環(huán)境，也熟悉了公司的整個(gè)操作流程。

在本部門(mén)的工作中，我一直嚴(yán)格要求自己，認(rèn)真及時(shí)做好領(lǐng)導(dǎo)布置的每一項(xiàng)任務(wù)，同時(shí)主動(dòng)為領(lǐng)導(dǎo)分憂(yōu)；專(zhuān)業(yè)和非專(zhuān)業(yè)上不懂的問(wèn)題虛心向同事學(xué)習(xí)請(qǐng)教，不斷提高充實(shí)自己，希望能盡早獨(dú)當(dāng)一面，為公司做出更大的貢獻(xiàn)。當(dāng)然，初入職場(chǎng)，難免出現(xiàn)一些小差小錯(cuò)需領(lǐng)導(dǎo)指正；但前事之鑒，后事之師，這些經(jīng)歷也讓我不斷成熟，在處理各種問(wèn)題時(shí)考慮得更全面，杜絕類(lèi)似失誤的發(fā)生。在此，我要特地感謝部門(mén)的領(lǐng)導(dǎo)和同事對(duì)我的入職指引和幫助，感謝他們對(duì)我工作中出現(xiàn)的失誤的提醒和指正。

經(jīng)過(guò)這六個(gè)月，我現(xiàn)在已經(jīng)能夠獨(dú)立處理公司的帳務(wù)，整理部門(mén)內(nèi)部各種資料，進(jìn)行各項(xiàng)稅務(wù)申報(bào)，協(xié)助進(jìn)行資金分析，從整體上把握公司的財(cái)務(wù)運(yùn)作流程。當(dāng)然我還有很多不足，處理問(wèn)題的經(jīng)驗(yàn)方面有待提高，團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力也需要進(jìn)一步增強(qiáng)，需要不斷繼續(xù)學(xué)習(xí)以提高自己業(yè)務(wù)能力。

這是我的第一份工作，這半年來(lái)我學(xué)到了很多，感悟了很多；看到公司的迅速發(fā)展，我深深地感到驕傲和自豪，也更加迫切的希望以一名正式員工的身份在這里工作，實(shí)現(xiàn)自己的奮斗目標(biāo)，體現(xiàn)自己的人生價(jià)值，和公司一起成長(zhǎng)。在此我提出轉(zhuǎn)正申請(qǐng)，懇請(qǐng)領(lǐng)導(dǎo)給我繼續(xù)鍛煉自己、實(shí)現(xiàn)理想的機(jī)會(huì)。我會(huì)用謙虛的態(tài)度和飽滿(mǎn)的熱情做好我的本職工作，為公司創(chuàng)造價(jià)值，同公司一起展望美好的未來(lái)！

此致

敬禮

篇8

這是我的第一份工作，這三個(gè)月來(lái)我學(xué)到了很多，感悟了很多。自入公司，至此已三個(gè)月有余。初，?；袒滩话?蓋因初入社會(huì)，壓力較大。但正惟此，一來(lái)有足夠空間激發(fā)自身潛力，二來(lái)上下和睦，了無(wú)成見(jiàn);經(jīng)領(lǐng)導(dǎo)傾力扶持，現(xiàn)已對(duì)工作有了一定程度的了解。今基于以下幾條原因，申請(qǐng)轉(zhuǎn)正，望領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)：

1、經(jīng)過(guò)三個(gè)多月的自身努力和各位同事領(lǐng)導(dǎo)的幫助，現(xiàn)對(duì)工作有較強(qiáng)的處理能力。希望能早日得到大家的認(rèn)同。

2、目前本人各方面能力尚需提升之處還很多，為發(fā)展自身能力，也為了更好提高工作能力，需制定個(gè)人發(fā)展的近期及長(zhǎng)遠(yuǎn)目標(biāo)，而在工作位置不安定的前提下，此事無(wú)從著手。

篇9

作為一名應(yīng)屆畢業(yè)生，初來(lái)公司，曾經(jīng)很擔(dān)心不知該怎么與人共處，該如何做好工作；但是公司寬松融洽的工作氛圍、團(tuán)結(jié)向上的企業(yè)文化，讓我很快完成了從學(xué)生到職員的轉(zhuǎn)變。

自從三月底進(jìn)入公司以來(lái)，我一直在打印技術(shù)二部實(shí)習(xí)，雖然本部門(mén)的業(yè)務(wù)是我以前從未接觸過(guò)的，也和我的專(zhuān)業(yè)知識(shí)相差較大；但是部門(mén)領(lǐng)導(dǎo)和同事的耐心指導(dǎo)，使我在較短的時(shí)間內(nèi)適應(yīng)了公司的工作環(huán)境，也熟悉了公司的整個(gè)操作流程。

在本部門(mén)的工作中，我一直嚴(yán)格要求自己，認(rèn)真及時(shí)做好領(lǐng)導(dǎo)布置的每一項(xiàng)任務(wù)，同時(shí)主動(dòng)為領(lǐng)導(dǎo)分憂(yōu)；專(zhuān)業(yè)和非專(zhuān)業(yè)上不懂的問(wèn)題虛心向同事學(xué)習(xí)請(qǐng)教，不斷提高充實(shí)自己，希望能盡早獨(dú)當(dāng)一面，為公司做出更大的貢獻(xiàn)。當(dāng)然，初入職場(chǎng)，難免出現(xiàn)一些小差小錯(cuò)需領(lǐng)導(dǎo)指正；但前事之鑒，后事之師，這些經(jīng)歷也讓我不斷成熟，在處理各種問(wèn)題時(shí)考慮得更全面，杜絕類(lèi)似失誤的發(fā)生。在此，我要特地感謝部門(mén)的領(lǐng)導(dǎo)和同事對(duì)我的入職指引和幫助，感謝他們對(duì)我工作中出現(xiàn)的失誤的提醒和指正。

經(jīng)過(guò)這幾個(gè)月的學(xué)習(xí)，我現(xiàn)在已經(jīng)能夠獨(dú)立處理公司的簡(jiǎn)單業(yè)務(wù)，整理部門(mén)內(nèi)部各種資料，進(jìn)行各種輔的研發(fā)工作。當(dāng)然我還有很多不足，處理問(wèn)題的經(jīng)驗(yàn)方面有待提高，團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力也需要進(jìn)一步增強(qiáng)，需要不斷繼續(xù)學(xué)習(xí)以提高自己業(yè)務(wù)能力。

篇10

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.09.011

中圖分類(lèi)號(hào)：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-5304（2013）09-0031-03

Effect of Compoud Qingqin Liquids on Renal Function of Uric Acid Nephropathy Rats SHANG Xue-zheng， MA Wei-guo， BAI Yu， FANG Tie-sheng， ZHANG Chun-yan， LIU Hui， LU Yan， GU Wen， XU Yu-mei， TANG Ling， MENG Feng-xian （Dongfang Hospital Affiliated to Beijing University of Chinese Medicine， Beijing 100078， China）

Abstract：Objective To observe the effect of Compoud Qingqin Liquids on renal function of rat model of uric acid nephropathy， and to discuss its protection of renal function. Methods The rat model was induced by gavaging adenine and feeding yeast. SD rats were randomly divided into control group， model group， positive group， and high-， medium-， low- dose groups of Chinese medicine. Blank control group and model group were daily gavaged with distilled water， positive control group was daily gavaged with allopurinol by 9.33 mg/kg， and high-， medium-， low-dose group of Chinese medicine was daily gavaged with Compound Qinggin Liguids by 3.77， 1.89， 0.09 g/（kg?d） respectively for 6 weeks. General condition of rats were observed， renal pathological changes were observed with light and electron microscope. Urine protein concentration， blood uric acid， blood urea nitrogen， creatinine and kidney weight index were respectively tested before and after treatment. Results There were no significant differences in eating， drinking and body weight between before and after modeling. Compoud Qingqin Liquids can obviously decrease the concentration of urine protein， blood uric acid， serum creatinine， blood urea nitrogen， and kidney weight index （P

Key words：Compoud Qingqin Liquids；uric acid nephropathy；renal function；rats

尿酸性腎病是由于尿酸鹽沉積在腎臟髓質(zhì)，其周?chē)邪准?xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，引起慢性間質(zhì)性腎炎，晚期可因腎小管變性、萎縮及腎小球硬化而導(dǎo)致腎衰竭[1]。因此，保護(hù)高尿酸血癥患者的腎功能，有效防治或延緩尿酸性腎病的病程進(jìn)展，成為國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)界關(guān)注及研究的熱點(diǎn)。近年來(lái)隨著人民生活水平不斷提高，罹患高尿酸血癥或痛風(fēng)的人群數(shù)量不斷增長(zhǎng)，導(dǎo)致尿酸性腎病的患者群體亦不斷擴(kuò)大。復(fù)方青秦液是由青蒿、秦艽、秦皮等組成的純中藥制劑，具有清熱解毒、化瘀止痛的功效。本實(shí)驗(yàn)觀察中藥復(fù)方青秦液對(duì)尿酸性腎病模型大鼠腎功能的影響，從而進(jìn)一步探討其改善腎功能的作用機(jī)制。

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金（30973918）

通訊作者：孟鳳仙，E-mail：.cn

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動(dòng)物

SPF/VAF健康雄性SD大鼠55只，體質(zhì)量（250±50）g；購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，合格證號(hào)SCXK（京） 2006-0009。

1.2 藥物

復(fù)方青秦液組方：青蒿15 g，秦艽15 g，秦皮10 g，土茯苓15 g，萆10 g，車(chē)前子15 g，蘇木8 g。由本院藥劑科提供免煎顆粒劑配成2.2 g原藥材/mL，4 ℃儲(chǔ)存?zhèn)溆?。?shí)驗(yàn)前用蒸餾水配制成3.77、1.89、0.94 g/kg 3種濃度溶液。別嘌醇片（0.1 mg×100片×1瓶，北京優(yōu)華藥業(yè)生產(chǎn)，批號(hào)109112）。腺嘌呤，美國(guó)Sigma，批號(hào)20100516。羧甲基纖維素鈉，北京科海榮京生物科技有限公司，批號(hào)20100807。酵母飼料，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，生產(chǎn)日期20101218。

1.3 主要試劑與儀器

Tris、APS、SDS、TEMED、Tween-20、丙烯酰胺、甘氨酸，Sigma公司；COX2、TLR2、TLR4抗體，abcam公司；血肌酐（SCr）、血尿酸（sUA）、尿素氮（BUN）、尿蛋白試劑盒，南京建成生物工程研究所生產(chǎn)；大鼠血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）酶聯(lián)反應(yīng)試劑盒，美國(guó)R&D公司；GAPDH、H1N1上下游引物，美國(guó)Invitrogen（上海）英駿生物技術(shù)有限公司。半自動(dòng)生化分析儀，深圳杜雷生命科學(xué)股份有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 分組與造模

將雄性SD大鼠隨機(jī)分為模型組、陽(yáng)性藥組及中藥大、中、小劑量組，每組10只，同時(shí)設(shè)正常組5只。除正常組予每日去離子水灌胃外，余各組將腺嘌呤溶于0.5%羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）溶液中，以每日100 mg/kg劑量灌胃，同時(shí)伴酵母飼料喂養(yǎng)，連續(xù)18 d。行眼眶內(nèi)眥取血，測(cè)定血尿酸水平明顯上升，高于82.50 ?mol/L，與正常組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

2.2 給藥

正常組及模型組每日灌胃蒸餾水10 mL/kg，陽(yáng)性藥組每日灌胃別嘌醇9.33 mg/kg，中藥大、中、小劑量組每日灌胃復(fù)方青秦液3.77、1.89、0.09 g/kg，連續(xù)6周。

2.3 指標(biāo)檢測(cè)

觀察各組大鼠皮毛、牙齒、體質(zhì)量、進(jìn)食水、糞便及活動(dòng)狀態(tài)，并記錄。造模成功后第0、2、4、6周各組大鼠稱(chēng)體質(zhì)量，代謝籠收集尿液，檢測(cè)尿蛋白濃度。取血并測(cè)定sUA、BUN、SCr等生化指標(biāo)，按相關(guān)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。Rayto Rt-9000半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。

灌胃治療4周后，隨機(jī)對(duì)各組大鼠10%水合氯醛麻醉，處死，摘取腎臟，稱(chēng)質(zhì)量。將右側(cè)腎臟迅速放入液氮罐保存?zhèn)溆?，左?cè)腎臟分別固定于10%中爾馬林溶液和2.5%戊二醛固定液中備用于光、電鏡觀測(cè)。灌胃治療第6周對(duì)各組余下大鼠進(jìn)行取材，具體操作同前。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS16.0軟件和AMOS17.0軟件進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)以―x±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。P

4 結(jié)果

4.1 一般情況

各組大鼠毛發(fā)光澤，活動(dòng)自如，活潑，飲食正常，造模前后未見(jiàn)特殊異常。每組每日平均進(jìn)食量、飲水量、體質(zhì)量無(wú)明顯差別。模型組和陽(yáng)性藥組各有1只大鼠死亡，考慮為造模損傷所致。死亡實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，處理數(shù)據(jù)時(shí)按缺失值處理

4.2 復(fù)方青秦液對(duì)尿酸性腎病大鼠尿蛋白、血尿酸、血肌酐、尿素氮、腎重指數(shù)的影響（見(jiàn)表1～表5）

表1 各組大鼠不同時(shí)點(diǎn)尿蛋白濃度比較（―x±s，mg/L）

組別 只數(shù) 0周 第2周 第4周 第6周

正常組 5 367.28± 21.82 208.33± 55.21 298.11±152.54 373.33± 44.09

模型組 9 472.54±143.74# 464.96±177.14# 508.46±128.88# 632.22±321.96#

陽(yáng)性藥組 9 470.10± 92.85# 271.47± 45.05* 343.21±106.48* 473.33± 90.62*

中藥大劑量組 10 470.10±133.37# 275.16± 68.77* 259.49±150.62* 248.33± 82.50*

中藥中劑量組 10 468.58±174.48# 307.32± 91.44* 366.44± 75.14* 368.33±140.51*

中藥小劑量組 10 461.02±114.99# 302.03±158.25* 359.37± 74.32* 335.83±145.56*

注：與正常組比較，#P

表2 各組大鼠不同時(shí)點(diǎn)sUA比較（―x±s，?mol/L）

組別 只數(shù) 0周 第2周 第4周 第6周

正常組 5 82.50±11.53 82.50±41.91 82.50±14.38 82.50± 2.82

模型組 9 124.93± 8.99# 162.82±64.85# 166.05±51.79# 130.62± 4.09#

陽(yáng)性藥組 9 128.63±12.23# 128.13±83.52* 89.08± 8.15* 101.35±11.07*

中藥大劑量組 10 128.03±24.50# 124.10±56.10* 99.34±28.05* 81.30±27.88*

中藥中劑量組 10 123.91± 3.94# 125.02±52.42* 103.41±18.66* 79.26± 7.07*

中藥小劑量組 10 121.87±15.87# 130.79±72.66* 119.58±23.20* 88.61±16.28*

表3 各組大鼠不同時(shí)點(diǎn)SCr比較（―x±s，?mol/L）

組別 只數(shù) 0周 第2周 第4周 第6周

正常組 5 32.15±2.56 32.15±3.23 32.15±11.86 32.15±2.70

模型組 9 39.14±8.34# 39.63±3.94# 58.92±17.79# 36.33±0.47#

陽(yáng)性藥組 9 33.99±0.72# 34.73±5.49* 39.13±24.80* 32.44±1.68*

中藥大劑量組 10 37.97±5.23# 23.86±6.06* 28.88± 5.64* 31.78±1.39*

中藥中劑量組 10 38.19±3.48# 31.44±4.74* 29.34±10.08* 31.67±4.13*

中藥小劑量組 10 39.78±9.21# 32.27±6.06 28.99±19.30* 30.44±2.34*

表4 各組大鼠不同時(shí)點(diǎn)BUN比較（―x±s，mmol/L）

組別 只數(shù) 0周 第2周 第4周 第6周

正常組 5 5.51±4.57 5.51±6.02 5.51±0.21 5.51±0.43

模型組 9 12.17±1.42# 10.67±2.01# 8.92±1.21# 7.01±0.27#

陽(yáng)性藥組 9 12.51±1.67# 6.54±3.15* 7.53±0.45* 6.04±0.54

中藥大劑量組 10 13.23±2.96# 5.57±2.50* 7.50±0.69* 5.92±0.73*

中藥中劑組 10 11.73±2.13# 6.62±3.86* 7.47±0.59* 5.92±0.39*

中藥小劑量組 10 11.62±0.77# 6.23±2.72* 7.54±0.63* 6.09±1.22

表5 各組大鼠不同時(shí)點(diǎn)腎質(zhì)量指數(shù)比較（―x±s，%）

組別 只數(shù) 第4周 第6周

正常組 5 0.36±0.13 0.34±0.03

模型組 9 0.42±0.04# 0.47±0.07#

陽(yáng)性藥組 9 0.43±0.01 0.48±0.08

中藥大劑量組 10 0.43±0.05 0.46±0.02

中藥中劑量組 10 0.46±0.07 0.44±0.05*

中藥小劑量組 10 0.41±0.04 0.40±0.02*

4.3 光鏡觀察結(jié)果

給藥4周后，模型組大部分腎小管中、重度萎縮變性，皮髓交界處腎小管內(nèi)見(jiàn)大量尿酸鹽結(jié)晶，腎間質(zhì)纖維組織明顯增生，伴有小灶狀炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。陽(yáng)性藥組、中藥大劑量組的腎臟病變較模型組明顯減輕，尤其對(duì)痛風(fēng)模型大鼠腎小管尿酸鹽結(jié)晶形成具有一定的改善作用，中藥大劑量組對(duì)痛風(fēng)模型大鼠腎小管上皮細(xì)胞萎縮變性具有明顯改善作用，中藥中、小劑量組腎臟病變未見(jiàn)明顯改善。給藥6周后，模型組動(dòng)物可見(jiàn)不同程度的腎小管萎縮變性、尿酸鹽結(jié)晶、間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維組織增生等病變，較給藥4周后的模型病變略輕。中藥大劑量組對(duì)痛風(fēng)模型腎組織病變具有改善作用，中藥中劑量組痛風(fēng)模型腎組織病變具有減輕趨勢(shì)。陽(yáng)性藥組、中藥小劑量組腎組織病變無(wú)明顯改變。

4.4 電鏡觀察結(jié)果

給藥4周后，模型組腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)纖維化，可見(jiàn)成纖維細(xì)胞，間質(zhì)間隙增大，腎小管空泡化嚴(yán)重，管壁破損，腎小球變化不明顯，基膜稍增厚，可見(jiàn)足突融合。陽(yáng)性藥組腎間質(zhì)纖維化與模型組比較程度較輕，空泡小于模型組，腎小球細(xì)胞核疏松，腎間質(zhì)管壁斷裂，腎小球損傷較輕，足突融合。中藥大劑量組腎間質(zhì)纖維化不明顯，腎小管輕度擴(kuò)張，基底膜基本正常，腎小球基本正常。中藥中劑量組腎間質(zhì)少量纖維化，腎小管管壁輕度損傷，偶見(jiàn)斷裂，間質(zhì)滲入考慮炎性期或修復(fù)期，腎小球基本正常，基膜稍增厚，偶見(jiàn)足突融合。中藥小劑量組腎間質(zhì)纖維化較重，間質(zhì)擴(kuò)張、水腫、面積增寬，腎小管破損，管壁不規(guī)則，腎小球基膜稍增厚。給藥6周后，模型組腎間質(zhì)纖維化嚴(yán)重，間質(zhì)增寬明顯，大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，可見(jiàn)大量成纖維細(xì)胞，腎小管管腔破損、脫落，管壁增厚，局部增生嚴(yán)重，血管可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞，腎小球變化較輕，基底膜稍增厚，足突輕度融合。陽(yáng)性藥組腎間質(zhì)纖維化明顯，間質(zhì)管壁破裂，嚴(yán)重厚度不一，基膜增厚，見(jiàn)纖維增生、浸潤(rùn)，腎小球損傷較輕。中藥大劑量組腎間質(zhì)未見(jiàn)明顯纖維化，管壁薄厚稍不均勻，較陽(yáng)性藥組程度輕，腎小球基本正常，基膜未見(jiàn)增厚，足突稍融合，偶見(jiàn)細(xì)胞核變化，考慮機(jī)體開(kāi)始清除病變細(xì)胞，提示進(jìn)入早期凋亡進(jìn)程。中藥中劑量組腎間質(zhì)輕度纖維化，管壁薄厚不均勻，偶見(jiàn)腎小管管壁破損，毛細(xì)血管增多，結(jié)構(gòu)不致密，少量空泡化，腎小球基膜稍增厚，輕度足突融合。中藥小劑量組腎間質(zhì)纖維化，成纖維細(xì)胞增多，腎小管管壁損傷廣泛分布，可見(jiàn)血管炎性細(xì)胞增多，毛細(xì)血管增生，細(xì)胞腫脹，腎小球基膜增厚明顯。

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