導(dǎo)言：作為寫作愛好者，不可錯(cuò)過為您精心挑選的10篇七五普法實(shí)施時(shí)間，它們將為您的寫作提供全新的視角，我們衷心期待您的閱讀，并希望這些內(nèi)容能為您提供靈感和參考。

篇1

中圖分類號(hào) P4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2016）21-0194-01

隨著社會(huì)的發(fā)展與進(jìn)步，氣象科技服務(wù)工作在氣象業(yè)務(wù)中占據(jù)著越來越重要的地位。近年來，濮陽(yáng)市氣象科技服務(wù)發(fā)展一直堅(jiān)持快速健康發(fā)展的目標(biāo)，日益形成了以公眾需求為導(dǎo)向，以專業(yè)氣象業(yè)務(wù)為依托的氣象科技服務(wù)體系，為濮陽(yáng)市氣象事業(yè)的不斷進(jìn)步提供了有力支撐，成為創(chuàng)新與開拓庀笠滴褚約胺務(wù)領(lǐng)域的中堅(jiān)力量。

1 濮陽(yáng)市氣象科技服務(wù)現(xiàn)狀

1.1 不斷建立完善農(nóng)業(yè)氣象科技服務(wù)基礎(chǔ)設(shè)施

近年來，濮陽(yáng)縣氣象局認(rèn)真做好“三農(nóng)”專項(xiàng)試點(diǎn)工作，根據(jù)濮陽(yáng)縣高標(biāo)準(zhǔn)糧田建設(shè)和新農(nóng)村建設(shè)規(guī)劃，調(diào)整村級(jí)氣象信息服務(wù)站、氣象預(yù)警機(jī)、電子屏、田間小氣候氣象觀測(cè)站、多要素站布局，并制作了沙盤模型，建成20個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)氣象信息服務(wù)站、26個(gè)村級(jí)氣象信息服務(wù)站、6個(gè)企業(yè)（專業(yè)合作社）氣象信息服務(wù)站、4個(gè)氣象科普教育基地，共安裝電子屏（含液晶顯示屏）38塊，預(yù)警接收機(jī)146部，可視化RYQ-4型田間農(nóng)林小氣候觀測(cè)站1套、棚內(nèi)RYQ-4型田間農(nóng)林小氣候觀測(cè)儀3套、四要素站設(shè)備1套、土壤水分自動(dòng)測(cè)試儀2部，氣象科普教育宣傳欄74處近800 m2，完善了濮陽(yáng)市鄉(xiāng)鎮(zhèn)氣象信息服務(wù)平臺(tái)、氣象預(yù)警信息平臺(tái)。對(duì)20個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)、26個(gè)重點(diǎn)村及47家種植養(yǎng)殖大戶、合作社開展開展“一對(duì)一”貼身式氣象防災(zāi)減災(zāi)服務(wù)，取得了良好效果[1-2]。

1.2 大力開展專題氣象科技服務(wù)

針對(duì)關(guān)鍵性事項(xiàng)開展專題氣象科技服務(wù)工作。一是及時(shí)制定氣象服務(wù)方案，細(xì)化服務(wù)內(nèi)容。密切監(jiān)視天氣變化，制作“三夏”期間滾動(dòng)天氣預(yù)報(bào)和噴藥（肥）、夏收、夏種、晾曬等農(nóng)用天氣預(yù)報(bào)，提出針對(duì)性農(nóng)事生產(chǎn)建議，服務(wù)“三夏”生產(chǎn)。二是充分利用電視、廣播、12121電話、手機(jī)短信、電子顯示屏、預(yù)警大喇叭、互聯(lián)網(wǎng)等及時(shí)為政府、有關(guān)部門和農(nóng)民群眾開展專題服務(wù)。三是加強(qiáng)大風(fēng)倒伏、干熱風(fēng)、冰雹、暴雨等災(zāi)害性天氣跟蹤監(jiān)測(cè)，及時(shí)制作并氣象災(zāi)害預(yù)警信息，指導(dǎo)農(nóng)民采取有效措施。四是利用衛(wèi)星遙感技術(shù)，做好秸稈焚燒火點(diǎn)監(jiān)測(cè)工作，確保禁燒工作圓滿完成。五是做好麥?zhǔn)涨捌诓∠x害防御工作，做好病蟲害防御[3-4]。

1.3 加強(qiáng)全市?；贩览装踩珯z查工作

定期檢查全市油庫(kù)、氣庫(kù)、彈藥庫(kù)、化學(xué)品倉(cāng)庫(kù)、煙花爆竹、石化等易燃易爆建設(shè)工程和場(chǎng)所的防雷年度檢測(cè)情況。檢查全市?；贩览啄甓葯z測(cè)、防雷安全大排查和防雷安全管理、防雷安全隱患整治落實(shí)等是否到位，以及各縣區(qū)防雷監(jiān)管部門是否依法履職盡責(zé)到位。

2 濮陽(yáng)市氣象科技服務(wù)存在的不足

雖然近年來濮陽(yáng)市氣象科技服務(wù)工作取得了一定的成績(jī)，但是還存在諸多不足之處：社會(huì)公眾缺乏氣象科技知識(shí)，氣象科技服務(wù)體制不健全，導(dǎo)致工作職責(zé)分工不明確；氣象科技服務(wù)產(chǎn)品科技含量不高，很少拓展新領(lǐng)域、開發(fā)新項(xiàng)目，缺乏氣象科技服務(wù)人才，尤其氣象信息產(chǎn)品開發(fā)、經(jīng)營(yíng)策劃與營(yíng)銷人才還不足，影響著氣象科技服務(wù)的快速發(fā)展。

3 濮陽(yáng)市氣象科技服務(wù)工作的發(fā)展建議

3.1 加強(qiáng)氣象科普知識(shí)的宣傳，提高公眾氣象知識(shí)水平

要定期開展氣象科普知識(shí)宣傳工作，建立氣象科普基地，加大公眾對(duì)氣象知識(shí)的了解，認(rèn)識(shí)天氣預(yù)報(bào)產(chǎn)品種類及災(zāi)害性天氣預(yù)警信號(hào)標(biāo)志，學(xué)會(huì)根據(jù)災(zāi)害嚴(yán)重程度等采取對(duì)策，減少或避免氣象災(zāi)害導(dǎo)致的生命財(cái)產(chǎn)損失。

3.2 做好氣象科技服務(wù)的調(diào)研工作

氣象部門要深入農(nóng)業(yè)、工業(yè)、林業(yè)、交通等行業(yè)開展氣象調(diào)研工作，了解當(dāng)?shù)貙?duì)氣象科技服務(wù)的具體需求；加大科技資金投入，加強(qiáng)人工影響天氣工作、氣象科技等研發(fā)工作，同時(shí)對(duì)各類氣象信息進(jìn)行深加工，開發(fā)滿足社會(huì)公眾要求的氣象科技服務(wù)產(chǎn)品，提高氣象科技服務(wù)產(chǎn)品科技含量。

3.3 加強(qiáng)氣象科技服務(wù)的管理

建立完善氣象科技服務(wù)管理機(jī)制，制定科學(xué)合理的氣象科技服務(wù)發(fā)展措施，逐步形成“界面清晰、責(zé)權(quán)明確、管理規(guī)范、監(jiān)督有效、成效顯著”的氣象科技服務(wù)管理體系，制定出科學(xué)有效的氣象科技服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)施方案，不斷提高氣象科服務(wù)工作的標(biāo)準(zhǔn)化以及規(guī)范化水平。

3.4 加強(qiáng)氣象預(yù)報(bào)預(yù)警系統(tǒng)的建設(shè)

加強(qiáng)氣象科技服務(wù)信息制作平臺(tái)的建設(shè)，主要包括天氣實(shí)況及監(jiān)測(cè)分析評(píng)估服務(wù)系統(tǒng)、決策氣象服務(wù)系統(tǒng)；完善氣象科技服務(wù)信息系統(tǒng)及氣象預(yù)報(bào)預(yù)警平臺(tái)建設(shè)。主要包括氣候預(yù)測(cè)業(yè)務(wù)系統(tǒng)以及災(zāi)害性天氣預(yù)報(bào)業(yè)務(wù)系統(tǒng)等，全面提高天氣預(yù)報(bào)預(yù)警水平。

3.5 加強(qiáng)氣象科技服務(wù)隊(duì)伍的建設(shè)

建立有效的人才隊(duì)伍建設(shè)機(jī)制，采取外引內(nèi)培方式，引進(jìn)氣象科技專業(yè)人才，補(bǔ)充到氣象科技服務(wù)隊(duì)伍中，并定期對(duì)氣象科技服務(wù)人員開展培訓(xùn)，為氣象科技服務(wù)的發(fā)展提供強(qiáng)有力的人才保障。

4 結(jié)語(yǔ)

濮陽(yáng)市氣象部門須高度重視氣象科技服務(wù)工作，建立完善相關(guān)制度，加強(qiáng)氣象科技服務(wù)隊(duì)伍的建設(shè)，不斷創(chuàng)新服務(wù)方式，開發(fā)研制出氣象科技服務(wù)新產(chǎn)品，以更好滿足社會(huì)公眾的需求，從而進(jìn)一步推動(dòng)氣象科技服務(wù)的可持續(xù)發(fā)展。

5 參考文獻(xiàn)

[1] 賴虹，周N，王麗平，等.贛州氣象科技服務(wù)現(xiàn)狀及發(fā)展建議[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2012（9）：38.

篇2

中圖分類號(hào)：O657.63 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

孔雀石綠（Malachite green，MG） 化學(xué)式為C23H25N2Cl，相對(duì)分子質(zhì)量為364.92，曾在水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用來預(yù)防和治療受精卵和成魚的水霉病、腮霉病和小瓜蟲病等，以及用于活魚運(yùn)輸、池塘?xí)吼B(yǎng)過程和環(huán)境的消毒[1～2]。自從20世紀(jì)80年現(xiàn)孔雀石綠具有潛在的致癌性，美國(guó)、日本以及英國(guó)等許多國(guó)家已禁止其用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。我國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY5071—2002《無公害食品漁用藥物使用準(zhǔn)則》中已將孔雀石綠列為禁用藥物。雖然MG 在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的違禁使用情況越來越少，但由于其曾經(jīng)被廣泛應(yīng)用，已對(duì)環(huán)境造成了嚴(yán)重污染，水產(chǎn)品中被查出含有MG 的事件也時(shí)有發(fā)生。水體中存在的痕量MG 有可能引起了水產(chǎn)品的二次污染[3～5]，因此建立水體中MG及其代謝物L(fēng)MG的檢測(cè)方法是很有必要的。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器設(shè)備和試劑

Acquity UPLC-XEVO TQ MS型超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（美國(guó)Waters公司）；A120S型萬分之一天平（德國(guó)Sartorius公司）。

孔雀石綠（MG）和隱性孔雀石綠（LMG）標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)自德國(guó)Dr. Ehrenstorfer公司；乙腈、甲醇、甲酸均為色譜純（美國(guó)Fisher公司）；乙酸銨為優(yōu)級(jí)純（天津科密歐）；Oasis MCX固相萃取小柱（ 美國(guó)Waters 公司，150 mg/6mL）；實(shí)驗(yàn)用水為美國(guó)Milli-Q去離子水發(fā)生器制備的高純水。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

準(zhǔn)確稱取孔雀石綠（MG） 和隱性孔雀石綠（LMG）標(biāo)準(zhǔn)品適量，用乙腈溶解，配制成質(zhì)量濃度為100μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，根據(jù)需要用流動(dòng)相將混合中間標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成濃度為0.25μg/L、0.50μg/L、1.00μg/L、2.00μg/L、5.00μg/L、10.00μg/L、25.00μg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.3 儀器分析條件

1.3.1 液相色譜條件

色譜柱：Waters BEH C18（1.7 ?m，50mm×2.1mm）；柱溫：30℃；流速：0.5mL/min；進(jìn)樣量：10?L；流動(dòng)相A：乙腈；流動(dòng)相B：含0. 1%甲酸的5mmol/L的乙酸銨水溶液。梯度洗脫程序：0～1.0min，10% A～60% A；1. 0～3. 0min，60%～100% A；3.0 ～4.0min，100%A，4 ～4.1min，100% A～10% A，4.1～5.0min 10% A。

1.3.2 質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧離子源（ESI+）；掃描方式：正離子掃描；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；毛細(xì)管電壓：3.2kV；離子源溫度：150℃；去溶劑氣溫度：500℃；去溶劑氣流量：1000L/h；定性、定量離子對(duì)及碰撞能量見表1。

1.4 樣品處理

1.4.1 水樣采集

分別從水面表層、水面下約0.5m 、水面下約1.5m處采集養(yǎng)殖區(qū)池塘水，水樣采集后，混合均勻，24h內(nèi)測(cè)定。

1.4.2 水樣凈化

準(zhǔn)確量取25mL待測(cè)水樣，過0.45?m水系濾膜除去固體懸浮物后轉(zhuǎn)入100mL錐形瓶中，加入0.5mL甲酸使水樣甲酸體積分?jǐn)?shù)為1%，搖勻。將酸化后的水樣全部通過已活化好的MCX固相萃取小柱（使用前用5mL甲醇、5mL水活化），待水樣全部過完后，依次用3mL 2%（V/V）甲酸、3mL水、3mL甲醇淋洗，棄去淋洗液。真空抽干后，用5mL乙酸乙酯-甲醇-氨水（體積比為50：45：5）洗脫進(jìn)行洗脫，收集洗脫液于40℃條件下用氮?dú)獯蹈桑贸跏剂鲃?dòng)相定容至1.0mL，過0.22?m有機(jī)系濾膜后，上機(jī)進(jìn)行分析檢測(cè)。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜和質(zhì)譜條件的優(yōu)化

MG和LMG屬于三苯基甲烷類化合物，具有弱堿性，因此選擇ESI正離子模式，加入0.1%的甲酸有助于目標(biāo)物離子化。色譜條件摸索中發(fā)現(xiàn)，只加入0.1%甲酸MG和LMG的保留時(shí)間非常接近（分別為1.34min、1.42min），加入5mmol/L的乙酸銨后，LMG保留時(shí)間延長(zhǎng)為2.17min，同時(shí)LMG離子響應(yīng)強(qiáng)度也有所增強(qiáng)，因此本實(shí)驗(yàn)選用含0. 1%甲酸的5mmol /L 乙酸銨水溶液和乙腈作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫。

2.2 方法的線性關(guān)系與檢出限

按照1.2節(jié)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法，配制系列不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，取其峰面積（Y）與濃度（X）作線性回歸，線性關(guān)系和相關(guān)系數(shù)見表2。在本法測(cè)定條件下，采用3倍信噪比（S/N=3）計(jì)算水體中MG和LMG的檢出限均為0.01μg/L。

表2 MG和LMG標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系和相關(guān)系數(shù)

名稱 線性范圍/（μg/L） 線性方程 相關(guān)系數(shù)r

MG

LMG 0.25～25

0.25～25 Y =3581.3X + 5.138

Y =2356.7X + 8.365 0.9990

0.9993

2.3 方法的回收率與精密度

采用在空白樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法，在采集的水樣中添加一定體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液，使水樣中MG和LMG含量分別達(dá)到0.02μg/L、0.1μg/L、0.5μg/L 3個(gè)濃度梯度，每個(gè)梯度進(jìn)行6次重復(fù)試驗(yàn)，按照本方法處理后進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，MG和LMG 3個(gè)濃度梯度的回收率為80.6%～92.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.29%～8.23%。因此，MG 和LMG在水體中的加標(biāo)回收率相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均能達(dá)到檢測(cè)要求，說明本方法具有較高的準(zhǔn)確度和精密度。

3 結(jié)語(yǔ)

本文建立了超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)水體中孔雀石綠（MG）和隱性孔雀石綠（LMG）殘留量的方法。該方法具有選擇性高、步驟簡(jiǎn)單、分析快速的特點(diǎn)，檢出限低、回收率高、精密度良好，可作為環(huán)境水體中痕量孔雀石綠（MG）和隱性孔雀石綠（LMG）殘留量檢測(cè)的參考方法。

參考文獻(xiàn)

[1] 楊金蘭，陳培基，黎智廣，等.高效液相色譜法測(cè)定水產(chǎn)品孔雀石綠殘留量的優(yōu)化研究[J].南方水產(chǎn)，2010，6（04）：43-48.

[2] Safark I，Safarikova M. Detection of low concentrations of malachitegreen and crystal violet in water[J]. Water research，2008（36）：196-200.

篇3

1引言

芥子氣（HD）是一種糜爛性化學(xué)毒劑，化學(xué)名為2，2′二氯二乙硫醚，可通過吸入、皮膚和眼睛暴露等方式中毒，造成皮膚、眼睛、呼吸道等出現(xiàn)不同程度的損傷[1，2＼]。兩次世界大戰(zhàn)以及80年代爆發(fā)的兩伊戰(zhàn)爭(zhēng)中都使用了大量HD，造成了大量軍民傷亡[3～5＼]。侵華日軍戰(zhàn)敗后在中國(guó)境內(nèi)遺棄了大量包括芥子氣在內(nèi)的化學(xué)毒劑，長(zhǎng)期以來對(duì)環(huán)境以及附民都造成了嚴(yán)重危害[6，7＼]。1997年OPCW并生效的《化學(xué)武器公約》（CWC）嚴(yán)格禁止了HD的生產(chǎn)、儲(chǔ)存和使用，但至今其銷毀工作還未完成；同時(shí)由于HD容易生產(chǎn)、性質(zhì)穩(wěn)定，一旦被不法分子利用，還會(huì)極大地威脅公共安全。因此，有必要發(fā)展并建立靈敏、可靠的分析方法對(duì)HD染毒樣品進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定，對(duì)違約使用的調(diào)查取證、染毒人員的診斷救治都具有重要意義[8＼]。

HD含有兩個(gè)親電中心，進(jìn)入生物體后迅速分布于各組織中，發(fā)生代謝反應(yīng)可能生成水解氧化產(chǎn)物、β裂解產(chǎn)物和大分子加合物等一系列化合物[9，10＼]。這些代謝物按照其來源及特點(diǎn)分為兩類：小分子游離代謝物和大分子加合代謝物[11～13＼]。小分子游離代謝物包括硫二甘醇（TDG）、硫二甘醇亞砜（TDGO）及芥子氣亞砜（SMO）等水解、氧化產(chǎn)物，以及與谷胱甘肽加合后經(jīng)β裂解酶作用產(chǎn)生的1，1′磺?；p＼[2（甲基亞磺?；┮彝椋躚（SBMSE），1甲基亞磺?；?＼[2（甲硫基）乙基磺?；躚乙烷（MSMTESE），1，1′磺酰基雙＼[2S（N乙酰半胱氨?；┮彝椋躚（SBSNAE）等β裂解產(chǎn)物（如圖1所示）。在小分子代謝物中，雖然文獻(xiàn)＼[5＼]報(bào)道了在生物體內(nèi)檢測(cè)出痕量的內(nèi)源性TDG和TDGO，但在HD染毒的生物醫(yī)學(xué)樣品中，TDG與TDGO的濃度顯著升高，而且這些化合物均具有HD的結(jié)構(gòu)特征，因此，這些小分子代謝物均可作為HD生物標(biāo)識(shí)物[11＼]。與大分子加合物相比，小分子標(biāo)識(shí)物在芥子氣暴露后很快出現(xiàn)在體液中，能夠在體內(nèi)存在數(shù)日至兩周，并且具有檢測(cè)快速的優(yōu)點(diǎn)，是染毒早期快速診斷的理想標(biāo)識(shí)物。

對(duì)于HD小分子標(biāo)識(shí)物的分析，大多采用GCMS/MS或LCMS/MS等技術(shù)分析其衍生產(chǎn)物或原體[14～17＼]，但由于不同標(biāo)識(shí)物的性質(zhì)差異，這些報(bào)道大都只針對(duì)單個(gè)或兩個(gè)標(biāo)識(shí)物進(jìn)行分析。但HD染毒劑量、方式以及染毒時(shí)間的不同所產(chǎn)生的生物標(biāo)識(shí)物也不盡相同[16＼]，因此，所建立的方法應(yīng)能更廣泛用于標(biāo)識(shí)物和樣品的分析。直到2013年，Li等[18＼]報(bào)道了將血漿蛋白沉淀后直接進(jìn)行LCMS/MS的分析方法，可同時(shí)檢測(cè)7種HD游離代謝物。方法制備簡(jiǎn)單、耗時(shí)短，取得了較好的結(jié)果。但該方法中血漿經(jīng)蛋白經(jīng)沉淀直接分析，基質(zhì)依然復(fù)雜，背景中存在大量干擾峰，分析大量樣品后會(huì)造成色譜柱壓升高、響應(yīng)降低、儀器穩(wěn)定性變差等問題。

針對(duì)以上情況，本研究引入SPE制備方法，并優(yōu)化了UHPLC的梯度洗脫程序，建立了血漿中6種HD標(biāo)識(shí)物（TDGO，SBMSE，SBSNAE，TDG，MSMTESE和SMO）的UHPLCMS/MS定量分析方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本方靈敏度高、選擇性好、樣品基質(zhì)純凈，大批量樣品分析響應(yīng)穩(wěn)定、重復(fù)性好。JP

2實(shí)驗(yàn)部分

2.1儀器、材料及試劑

1290超高效液相色譜系統(tǒng)（美國(guó)Agilent公司）；6460型三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)（美國(guó)Agilent公司）；Centrifuge5424型高速離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf公司）；NEVAP111型氮?dú)獯蹈蓛x（美國(guó)OrganomationAssociates公司）。

HD、TDG、TDGO、SMO、SBMSE、MSMTESE及SBSNAE（均由本單位合成，NMR分析純度>95%）；HLB固相萃取柱（500mg/6mL，美國(guó)Waters公司）；水、甲醇、乙腈（色譜純，美國(guó)Honeywell公司）；甲酸銨（美國(guó)RoeScientific公司）；健康人血漿部分由北京紅十字中心提供，部分來自于本實(shí)驗(yàn)室的自愿者。JP

2.2安全措施

所有涉及到芥子氣的操作，如取用、配制和染毒過程均需要佩戴相應(yīng)的防護(hù)器材，并在通風(fēng)良好的狀況下進(jìn)行；以NaOH乙醇（1KG-3∶KG-510～1KG-3∶KG-511，V/V）混合溶液作為洗消劑，各種直接接觸芥子氣的實(shí)驗(yàn)器材在使用后立即洗消。

2.3染毒及加標(biāo)血漿的制備

用乙腈配制1.0mg/mLHD標(biāo)準(zhǔn)工作液，吸取4.0μL標(biāo)準(zhǔn)工作液，加入4.0mL空白血漿，混勻、37℃振蕩反應(yīng)12h，得到1.0μg/mLHD染毒血漿儲(chǔ)備液。用純水配制6種HD標(biāo)識(shí)物的混合標(biāo)準(zhǔn)液，各標(biāo)識(shí)物濃度均為100μg/mL，用空白血漿稀釋為0.01～500ng/mL的加標(biāo)血漿。以上儲(chǔ)備液均于

20℃保存。

2.4樣品制備

參照文獻(xiàn)＼[18＼]方法對(duì)血漿樣品進(jìn)行蛋白沉淀。0.5mL血漿中加入2.0mL乙腈甲醇（4KG-3∶KG-51，V/V），渦旋混勻，6100r/min離心5min，移取上清液。向沉淀中繼續(xù)加入1.0mL乙腈甲醇（4KG-3∶KG-51，V/V），渦旋混勻、12200r/min離心5min，將兩次的上清液合并，氮?dú)獯蹈桑?.0mL純水復(fù)溶，離心收集上清液，加入60μL1.4%氨水準(zhǔn)備進(jìn)行SPE。

先后用5mL甲醇、12mL水和5mL1.4%氨水平衡HLB柱；上樣，分別用3mL1.4%氨水和2mL2%甲醇1.4%氨水淋洗；最后用4mL含2%甲酸甲醇進(jìn)行洗脫；濃縮洗脫液至近干，加入0.15mL純水復(fù)溶，離心后取上清液進(jìn)行LCMS分析。

2.5液相色譜質(zhì)譜分析條件

色譜條件：ZorbaxEclipsePlusC18色譜柱（100mm×2.1mm，1.8μm，美國(guó)Agilent公司）；流動(dòng)相A為5mmol/L甲酸銨溶液，B為含5mmol/L甲酸銨的甲醇溶液；洗脫梯度：0～2.5min，5%～10%B；2.5～5.0min，10%～100%B；5.0～8.0min，100%B；8.0～8.1min，100%～5%B，運(yùn)行3min；流速0.3mL/min；柱溫40℃；進(jìn)樣體積10μL。

質(zhì)譜條件：在ESI+模式下采用MRM方式掃描，應(yīng)用4個(gè)時(shí)間段掃描6個(gè)目標(biāo)物的定量及定性離子對(duì)，0～1.75min掃描SBSME和TDGO；1.75～3.60min掃描SBSNAE和TDG；3.60～4.65min內(nèi)掃描MSMTESE；4.65min后掃描SMO。毛細(xì)管電壓4.0kV，離子源溫度350℃；霧化氣壓力35psi；碰撞加速電壓3V，權(quán)重為1/x。其它參數(shù)見表1。

3結(jié)果與討論

3.1固相萃取條件的選擇

與文獻(xiàn)＼[18＼]相比，針對(duì)血漿基質(zhì)的復(fù)雜性，增加了固相萃取步驟，目標(biāo)是進(jìn)一步除去基質(zhì)中的背景干擾物，使制備后的樣品更加純凈，提高檢測(cè)靈敏度和定量穩(wěn)定性。6種化合物的極性順序?yàn)門DGO>SBMSE>SBSNAE>TDG>MSMTESE>SMO，其中TDGO與SBMSE，SBSNAE與TDG，MSMTESE與SMO的極性相近，因此，選擇3種化合物SBMSE、TDG和MSMTESE進(jìn)行血漿加標(biāo)（濃度均為10ng/mL），考察了BondElutePlexa（60mg，3mL），SampliQPSDVB（500mg，6mL），HLB（500mg，6mL），以及HLB（60mg，3mL）JP4種SPE柱的富集效果，結(jié)果見圖2。

BondElutePlexa柱的填料為疏水性的二乙烯及苯基聚合物，主要用于富集弱極性化合物，而SBMSE及TDG等目標(biāo)物的極性相對(duì)較強(qiáng)，因此回收率低。而PSDVB柱的填料為聚苯乙烯二乙烯基苯共聚物，適用于從水溶液中提取極性芳香化合物，如苯酚等，不適于本文目標(biāo)物的富集。HLB采用二乙烯苯和N乙烯基吡咯烷酮的親水親脂兩性填料，可富集的化合物極性范圍更寬。此外，還考察了60mg小柱床的HLB柱，以期在不損失回收率的情況下，減少背景干擾，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明60mg的SPE柱的容量有限，回收率偏低，不適于0.5mL血漿樣品的富集。因此，經(jīng)比較，本實(shí)驗(yàn)最終選擇回收率最高的HLB（500mg/6mL）柱對(duì)6種HD標(biāo)識(shí)物的加標(biāo)樣品進(jìn)行SPE純化。

目標(biāo)化合物都顯弱堿性，加入60μL1.4%氨水，目的是降低目標(biāo)化合物的極性，增強(qiáng)與HLB柱填料疏水基團(tuán)的結(jié)合。經(jīng)過比較考察，最終選擇先用3.0mL1.4%氨水淋洗殘留在柱上的雜質(zhì)，再用2.0mL含1.4%氨水的2%甲醇淋洗柱子上非特異性結(jié)合的極性干擾物。此外，向洗脫液中添加2%甲酸是為了降低目標(biāo)物在HLB柱上的結(jié)合力，使其更容易被洗脫。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，SPE在有效富集目標(biāo)物的同時(shí)，除去了血漿基質(zhì)中的大量背景干擾，色譜圖基線干凈（圖3），延長(zhǎng)了色譜柱的使用壽命。

3.2UHPLCMS/MS方法的優(yōu)化

根據(jù)6種化合物的理化性質(zhì)及三重四極桿質(zhì)譜的特點(diǎn)，在ESI+模式下應(yīng)用Masshunteroptimizer件對(duì)每一個(gè)目標(biāo)化合物的分析參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果見表1。為了在較短時(shí)間內(nèi)獲得良好的分離效果，對(duì)洗脫程序進(jìn)行優(yōu)化。由于TDGO和SBMSE這兩種化合物極性很強(qiáng)，所以在前2.5min內(nèi)沒有采用等度平衡程序，目的是將目標(biāo)物與基質(zhì)中的強(qiáng)極性背景化合物進(jìn)行分離，減少干擾；MSMTESE和SMO在色譜柱上保留較好，為了縮短分析時(shí)間，采用快速梯度洗脫程序?qū)δ繕?biāo)物進(jìn)行洗脫。在優(yōu)化的洗脫條件下，6種HD標(biāo)識(shí)物在6min內(nèi)均有較好的分離（圖3），TDG和SBSNAE的保留時(shí)間重合，可通過MRM離子對(duì)m/z的差異進(jìn)行區(qū)分。此外，本研究采用4個(gè)時(shí)間段同時(shí)分析6個(gè)HD代謝物的12個(gè)MRM離子對(duì)，使每個(gè)峰能獲得定量分析所需的足夠掃描點(diǎn)數(shù)，改善峰形和靈敏度。

3.3方法學(xué)考察

3.3.1專屬性在最佳色譜質(zhì)譜條件下，測(cè)試溶劑空白（純水）、空白血漿、加標(biāo)血漿（6種標(biāo)識(shí)物濃度均為50ng/mL）和HD染毒血漿（100ng/mL）樣品。溶劑空白中未檢出任何相關(guān)化合物（圖4A），表明儀器系統(tǒng)中沒有相關(guān)背景干擾?？瞻籽獫{中僅檢測(cè)到少量?jī)?nèi)源性TDGO和TDG（圖4B），濃度分別為2～8ng/mL和0～5ng/mL，與文獻(xiàn)[5]報(bào)道一致。50ng/mL加標(biāo)血漿樣品中6種化合物的響應(yīng)良好（圖5A）。在100ng/mLHD染毒血漿中發(fā)現(xiàn)了顯著高于空白血漿的TDGO和TDG，可以作為HD染毒依據(jù)（圖5B）。在體外染毒血漿樣品中沒有檢測(cè)到SMO的原因是在低濃度染毒時(shí)HD主要發(fā)生水解反應(yīng)，自身氧化反應(yīng)很少[8＼]。β裂解產(chǎn)物是由HD與谷胱甘肽的加合物在β裂解酶的作用下而生成，但谷胱甘肽主要存在于血細(xì)胞中，離心后的血漿中谷胱甘肽含量極少，所以未檢測(cè)到。但是，在真實(shí)染毒患者體內(nèi)，HD既可能發(fā)生水解、氧化反應(yīng)，還可能與血液中的谷胱甘肽充分反應(yīng)后釋放出β裂解產(chǎn)物，染毒人員血液經(jīng)離心得到的血漿中可能存在水解氧化及β裂解標(biāo)識(shí)物[18＼]。因此，本方法依然可應(yīng)用于真實(shí)HD染毒患者體內(nèi)代謝后的血漿樣品分析。4種樣品的MRM色譜圖比較結(jié)果顯示，空白血漿中除低水平的TDGO和TDG內(nèi)源性本底外，無其它干擾物，表明本方法專屬性較好。

3.3.2線性范圍、方法檢出限及定量限為了降低基質(zhì)效應(yīng)對(duì)檢測(cè)準(zhǔn)確度的影響，本研究采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法進(jìn)行定量分析。將濃度為0.01～500ng/mL的加標(biāo)血漿按照2.4和2.5節(jié)進(jìn)行處理分析。以目標(biāo)物的濃度和峰面積進(jìn)行線性回歸，權(quán)重為1/x，繪制定量標(biāo)準(zhǔn)曲線。以響應(yīng)顯著高于空白血漿且信噪比為3對(duì)應(yīng)的濃度作為方法的檢出限（LOD），信噪比為5且相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）低于20%所對(duì)應(yīng)的濃度作為方法的定量限（LOQ）[18＼]，結(jié)果見表2。6種目標(biāo)物均有較寬的線性范圍，SBMSE、SBSNAE和MSMTESE的檢出限與文獻(xiàn)＼[18＼]報(bào)道一致，而SMO、TDG與TDGO的靈敏度比文獻(xiàn)值提高了5～10倍（表3）。

3.3.3加標(biāo)回收率與精密度對(duì)5，150和450ng/mL的加標(biāo)血漿質(zhì)量控制樣品（LQC，MQC和HQC）進(jìn)行平行處理并分析，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定5次。計(jì)算各目標(biāo)化合物的精密度和回收率，結(jié)果見表4。6種化合物的回收率在86.5%以上，RSD

3.4HD染毒樣品分析

CM（42OPCW在2015年第5次生物醫(yī)學(xué)樣品分析演練中提供了6份懷疑HD中毒人員的血漿樣品CM）LM

（A～F），和1份空白血漿（M）。采用所建方法對(duì)所ZH（有

樣品進(jìn)行定性及定量分析，檢測(cè)結(jié)果見圖6。在C樣品中檢測(cè)到的TDG及TDGO與血漿基質(zhì)M一致，所以確定C樣品為空白血漿；在A，B，D，E和F樣品中都檢測(cè)到高于內(nèi)源水平的TDG與TDGO，根據(jù)檢測(cè)得到TDG與TDGO的含量大小，得出樣品染毒濃度順序?yàn)镕>A>E>D>B。OPCW的結(jié)果中C為空白血漿，A，B，D，E和F分別為100，10，40，50和150ng/mLHD染毒血漿，說明本方法的CM（21*3/4檢測(cè)結(jié)果與OPCW官方提供的染毒信息一致?？誄M）ZH）

白血漿中內(nèi)源TDG與TDGO的分析結(jié)果表明，HD對(duì)血漿的染毒濃度在10ng/mL以上時(shí)，可利用TDG和TDGO作為標(biāo)識(shí)物進(jìn)行HD的溯源性分析，而之前未有此方面報(bào)道。另外有意義的是，本方法檢測(cè)到的TDG與TDGO的濃度和與HD染毒濃度（10～150ng/mL，OPCW提供）呈良好的線性關(guān)系，這使得依據(jù)檢測(cè)染毒血漿樣品中標(biāo)識(shí)物的濃度檢測(cè)實(shí)際HD染毒濃度成為可能，但由于代謝物的濃度還與染毒時(shí)間密切相關(guān)，特別是在體內(nèi)染毒情況下，因此，代謝標(biāo)識(shí)物與染毒濃度之間的關(guān)系還需要進(jìn)行深入探討。

References

1（#GhabiliK，AgutterPS，GhaneiM，AnsarinK，PanahiY，ShojaMM.Crit.RevToxicol.，2011，（41）：384-403

2KeheK，SziniczL.Toxicology，2005，（214）：198-209

3KeheK，ThiermannH，BalszuweitF，EyerF，SteinritzD，ZilkerT.Toxicology，2009，263（1）：3-8

4LawrenceRJ，SmithJR，BoydBL，CapacioBR.J.Anal.Toxicol.，2008，（32）：31-36

5ZhangY，YueL，NieZ，ChenJ，GuoL，WuB，F(xiàn)engJ，LiuQ，XieJ.J.Chromatogr.B，2014，（961）：29-35

6HuaX，ZhiYN，ZhangYJ，LiCZ，YueLJ，YangWF，ChenJ，DongY，LiQ，LinY，WuBD，F(xiàn)engJL，LiH，GuoL，XieJW.Toxicol.Rep.，2014，（1）：533-543

7DavisKG，AsperaG.Ann.Emerg.Med.，2001，（37）：653-656

8RuffAL，DillmanJF.Eplasty，2007，（8）：e2

9AndachtTM，PantazidesBG，CrowBS，F(xiàn)idderA，NoortD，ThomasJD，BlakeTA，JohnsonRC.J.Anal.Toxicol，2014，（38）：8-15

10PantazidesBG，CrowBS，GartonJW，QuionesGonzlezJA，BlakeTA，ThomasJD，JohnsonRC.Chem.Res.Toxicol.，2015，28（2）：256-261

11NieZ，LiuQ，XieJ.Talanta，2011，85（2）：1154-1159

12LinY，DongY，ChenJ，LiCZ，NieZY，GuoL，LiuQ，XieJW.J.Chromatogr.B，2014，，15（945946）：233-239

13WeiY，YueL，LiuQ，ChenJ，XieJ.J.Chromatogr.B，2011，（879）：1707-1712

14RichesJ，ReadRW，BlackRM.J.Chromatogr.B，2007，（845）：114-120

15LIChunZheng，CHENJia，ZHONGYuHuan，ZHONGYuXu，XIEJianWei，LIHua.ChineseJ.Anal.Chem.，2012，40（10）：1567-1572

李春正，佳，鐘玉環(huán)，鐘玉緒，謝劍煒，李樺.HTK分析化學(xué)，2012，40（10）：1567-1572

16BoyerAE，AshD，BarrDB，YoungCL，DriskellWJ，WhiteheadRDJr，OspinaM，PrestonKE，WoolfittAR，MartinezRA，SilksLA，BarrJR.J.Anal.Toxicol.，2004，28（5）：327-332

17NIEZhiYong，ZHANGYaJiao，WUBiDong，YANLong，F(xiàn)ENGJianLin，LIUQin，XIEJianWei.ChineseJ.Anal.Chem.，2014，42（7）：980-984

志勇，張雅姣，吳弼東，閆瓏，馮建林，劉勤，謝劍煒.HTK分析化學(xué)，2014，42（7）：980-984

18LiC，ChenJ，LiuQ，XieJ，LiH.J.Chromatogr.B，2013，917918：100-107）

、

篇4

1 引 言

在發(fā)酵業(yè)中，葡萄糖作為發(fā)酵液的主要碳源，其用量直接影響產(chǎn)品質(zhì)量，所以對(duì)發(fā)酵液中葡萄糖濃度的檢測(cè)是十分必要的[1]。酶類生物傳感器的諸多優(yōu)點(diǎn)使其廣泛應(yīng)用于發(fā)酵過程中葡萄糖濃度的檢測(cè)。葡萄糖生物傳感器多為固定化酶電極[2～4]，由于發(fā)酵工藝的高溫蒸汽滅菌過程使固定化酶生物傳感器無法在線使用。本研究組在前期研究中提出了一種用“酶液”代替固定態(tài)“酶膜”的方法，并研制出采用酶注射結(jié)構(gòu)的葡萄糖生物傳感器，可基本滿足實(shí)際需求，但是還存在檢測(cè)時(shí)間過長(zhǎng)的問題[5，6]。2015年，本研究組對(duì)此類生物傳感器進(jìn)行機(jī)理建模，建立了酶注射式葡萄糖生物傳感器的機(jī)理模型，此模型表述了整個(gè)反應(yīng)的機(jī)理，同時(shí)也對(duì)檢測(cè)方法提供了機(jī)理模型[7]，為改進(jìn)檢測(cè)算法、降低檢測(cè)時(shí)間提供了理論基礎(chǔ)。

酶注射式生物傳感器主要針對(duì)發(fā)酵領(lǐng)域中葡萄糖濃度的檢測(cè)，其檢測(cè)步驟為：首先利用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行標(biāo)定，再對(duì)發(fā)酵液中的葡萄糖濃度進(jìn)行檢測(cè)。但是生物傳感器易受溫度影響[8～10]，在實(shí)際測(cè)量時(shí)，由于發(fā)酵液的溫度是變化的，且通常與室溫狀態(tài)下的標(biāo)定液溫度不同，導(dǎo)致標(biāo)定結(jié)果不準(zhǔn)確，從而使測(cè)量結(jié)果產(chǎn)生誤差。而且每次測(cè)量都需要標(biāo)定，不僅操作繁瑣，而且也不利于實(shí)現(xiàn)在線檢測(cè)。

本研究主要針對(duì)酶注射式葡萄糖生物傳感器在實(shí)際使用中因?yàn)闃?biāo)定液與被測(cè)液的溫度不同而引起的測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)確問題，利用熱力學(xué)與酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)提出一種新的檢測(cè)方法。首先利用動(dòng)力學(xué)建立酶注射式葡萄糖生物傳感器濃度檢測(cè)機(jī)理模型，再利用阿倫尼烏斯公式建立溫度與動(dòng)力學(xué)模型中未知參數(shù)之間的關(guān)系，并將此關(guān)系代入該模型中建立基于溫度的濃度檢測(cè)新模型，根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)通過數(shù)據(jù)擬合確定了基于溫度的濃度檢測(cè)模型中的參數(shù)值，得到檢測(cè)新模型。利用新模型提出了一種以反應(yīng)混合液的溫度和反應(yīng)初始電流斜率推導(dǎo)葡萄糖濃度的檢測(cè)方法。分別利用動(dòng)力學(xué)模型檢測(cè)方法與溫度模型檢測(cè)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)結(jié)果表明，基于溫度的檢測(cè)方法在溫度變化的情況下具有更好的穩(wěn)定性，檢測(cè)準(zhǔn)確性也優(yōu)于原檢測(cè)方法，同時(shí)改進(jìn)后的檢測(cè)方法避免每次測(cè)量前人工標(biāo)定所需的拆卸步驟，更加有利于在線使用。

2 濃度檢測(cè)動(dòng)力學(xué)模型建立

酶注射式生物傳感器[5]反應(yīng)池中發(fā)生酶促反應(yīng)，由米氏方程可知，葡萄糖發(fā)生酶促反應(yīng)時(shí)，首先生成中間絡(luò)合物，中間產(chǎn)物分解產(chǎn)生H2O2，H2O2在鉑電極處分解產(chǎn)生電子，其反應(yīng)機(jī)理：

E+Sk1k

該機(jī)理模型中，指數(shù)部分存在的原因是由于在反應(yīng)初始中間絡(luò)合物的逐漸形成而引起的； 但根據(jù)米氏方程，底物與酶發(fā)生反應(yīng)生成中間絡(luò)合物的可逆反應(yīng)會(huì)瞬間達(dá)到平衡，短時(shí)間內(nèi)絡(luò)合物濃度保持不變，使得H2O2的濃度增加速率是不變的，所以可省略指數(shù)部分。H2O2生成速率以線性形式增長(zhǎng)，而電子由H2O2分解得到，即電流可表示為I=neD PEFP，其中， ne為反應(yīng)過程中交換電子數(shù)， D PE為H2O2擴(kuò)散系數(shù)， F為法拉第常數(shù)[7]。故可知其電流變化初始斜率為：

本研究組前期工作中建立的酶注射式葡萄糖生物傳感器檢測(cè)方法基于公式（3）所得，稱為動(dòng)力學(xué)模型檢測(cè)方法：首先利用酶注射式葡萄糖生物傳感器得到已知葡萄糖濃度為[S1]、[S2]的兩種標(biāo)準(zhǔn)液的反應(yīng)電流初始斜率K1、K2，并利用公式（3）確定濃度檢測(cè)動(dòng)力學(xué)模型中的參數(shù)C和Km； 測(cè)量待測(cè)液，得到反應(yīng)過程中電流的初始斜率K； 最后將已標(biāo)定的參數(shù)C、Km以及初始斜率K代入公式（3），得到待測(cè)液的葡萄糖濃度[S]。簡(jiǎn)單概括為：首先利用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)定葡萄糖生物傳感器濃度檢測(cè)動(dòng)力學(xué)模型中的參數(shù)C和Km，之后利用已知模型進(jìn)行待測(cè)液的檢測(cè)。

在實(shí)際使用中，標(biāo)準(zhǔn)液處于室溫狀態(tài)，與發(fā)酵液溫度之間存在溫差。而參數(shù)C和Km中存在反應(yīng)速率k1，k

1，k2，所以C和Km會(huì)受溫度的影響。這樣就導(dǎo)致了在存在溫差的情況下，室溫狀態(tài)下標(biāo)定的參數(shù)C和Km并不能用于待測(cè)液的檢測(cè)。本研究利用溫度改進(jìn)檢測(cè)方法，消除了溫度對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響。

3 基于溫度的濃度檢測(cè)模型研究

3.1 基于溫度的濃度檢測(cè)模型

式中a、b、lna′， lnb′均為定值，未知量為溫度T以及反應(yīng)初始電流斜率K?；诖四Ｐ?，得到改進(jìn)后檢測(cè)方法，稱為溫度模型檢測(cè)方法：生物傳感器對(duì)待測(cè)液葡萄糖濃度進(jìn)行檢測(cè)，得到反應(yīng)的初始電流斜率K′； 與此同時(shí)，通過反應(yīng)池中的溫度傳感器得到混合液的溫度T′； 之后利用公式（6）將得到的初始斜率K′與T′同時(shí)代入，以得到被測(cè)葡萄糖濃度[S′]。

3.2 基于溫度的濃度檢測(cè)模型參數(shù)測(cè)定

3.2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 為確定公式（6）中的參數(shù)a、b、lna′、lnb′，設(shè)計(jì)如下實(shí)驗(yàn)：

實(shí)驗(yàn)原理：利用公式（4）、（5）可以分別得到C和Km與溫度T的另一種關(guān)系表達(dá)式： lnC=b′T+lna′、lnKm=bT+lna。由此可知， lnC與lnKm分別與1T成比例關(guān)系。首先在不同溫度下利用酶注射式葡萄糖生物傳感器得到不同葡萄糖糖濃度的反應(yīng)初始斜率； 再利用公式（3）得到不同溫度下的動(dòng)力學(xué)模型參數(shù)C和Km； 分別對(duì)lnC＼，lnKm與1T進(jìn)行數(shù)據(jù)擬合，最終得到a、b、lna′＼，lnb′的值。

3.2.2 儀器與試劑 酶注射式葡萄糖生物傳感器（自制）； 金屬浴加熱器（一恒 TU.100C）； 不同濃度葡萄糖溶液（分析滴定用標(biāo)準(zhǔn)溶液）； 葡萄糖氧化酶（Solarbio）； 緩沖液（山東省科學(xué)院生物研究所）。

3.2.3 實(shí)驗(yàn)方法 根據(jù)北京某發(fā)酵廠數(shù)據(jù)可知，一般發(fā)酵液溫度約為30℃，其中個(gè)別發(fā)酵過程因工藝要求會(huì)出現(xiàn)溫度略高于40℃的情況。為了盡可能包含實(shí)際生產(chǎn)中多種發(fā)酵工藝的不同溫度要求，本實(shí)驗(yàn)分別在25.0， 30.0， 35.0和40.0℃下利用酶注射式生物傳感器得到葡萄糖濃度為1.5， 2.5和3.0 mg/mL的反應(yīng)初始斜率： 首先利用金屬浴加熱器加熱葡萄糖溶液、葡萄糖氧化酶溶液以及緩沖液到設(shè)定的溫度，以此模擬實(shí)際反應(yīng)過程中反應(yīng)池中的溫度，利用酶注射式葡萄糖生物傳感器進(jìn)行反應(yīng)過程中初始斜率的測(cè)量。

3.2.4 模型參數(shù)的測(cè)定 表1為在不同的溫度條件下由酶注射式葡萄糖生物傳感器測(cè)得的不同濃度的葡萄糖溶液的反應(yīng)斜率。從表1可知，在溫度與葡萄糖溶液濃度不變的情況下，生物傳感器得到的斜率不同，這是由于酶促反應(yīng)產(chǎn)生的電流為nA級(jí)別，易受干擾，三電極電路及放大濾波電路設(shè)計(jì)不合理造成傳感器穩(wěn)定性差，此處通過多次測(cè)量的方式使其相對(duì)偏差在3%內(nèi)，以保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

根據(jù)公式（3）推導(dǎo)可得到1[S]=CKm×1K×1Km，利用此方程進(jìn)行數(shù)據(jù)擬合得到不同溫度下動(dòng)力學(xué)參數(shù)力學(xué)參數(shù)C（nA/S）與Km （mg/mL）的值，見表2。

4 實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證

4.1 系統(tǒng)檢測(cè)流程圖

別泵入到定量環(huán)中進(jìn)行定量，之后利用緩沖液將其壓入反應(yīng)池中進(jìn)行反應(yīng)，三電極檢測(cè)電路檢測(cè)其反應(yīng)初始電流斜率，同時(shí)溫度傳感器檢測(cè)反應(yīng)池中混合液的溫度，最后將得到的兩參數(shù)傳遞給上位機(jī)進(jìn)行濃度的計(jì)算與顯示。

4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

利用酶注射式葡萄糖生物傳感器測(cè)量濃度為1.5和2.5 mg/mL葡萄糖溶液，得到斜率，并分別用溫度模型檢測(cè)方法和動(dòng)力學(xué)模型檢測(cè)方法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析（表3），得到檢測(cè)結(jié)果的回收率，回收率表示測(cè)量值與真值的接近程度，其計(jì)算公式為：P=1-|yi-y|y×100%， 式中，P為回收率， yi為測(cè)量得到的葡萄糖濃度值， y為實(shí)際葡萄糖濃度值。

用動(dòng)力學(xué)模型檢測(cè)方法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，系統(tǒng)在室溫下進(jìn)行標(biāo)定，隨著反應(yīng)時(shí)混合液的溫度與標(biāo)定時(shí)的溫差增大，測(cè)量結(jié)果的回收率逐漸降低； 而用溫度模型檢測(cè)方法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，其回收率檢測(cè)結(jié)果會(huì)維持在一定范圍內(nèi)，不會(huì)隨著溫度的改變而變化，這是由于每次檢測(cè)都會(huì)根據(jù)溫度重新計(jì)算濃度檢測(cè)動(dòng)

力學(xué)模型中的C和Km，降低了溫度對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。說明溫度模型檢測(cè)方法減小了由溫度變化而引起的誤差，提高了實(shí)際測(cè)量中測(cè)量結(jié)果的回收率，同時(shí)減少溫度影響，也增強(qiáng)了其穩(wěn)定性。

驗(yàn)證結(jié)果表明，當(dāng)溫度改變時(shí)，溫度模型檢測(cè)方法能較好地維持其檢測(cè)結(jié)果的回收率，而動(dòng)力學(xué)模型檢測(cè)方法由于標(biāo)定液與待測(cè)液溫度不同使得檢測(cè)的精確度受到嚴(yán)重影響，說明溫度模型檢測(cè)方法能更好地消除溫度引進(jìn)的誤差，使得測(cè)量結(jié)果更加準(zhǔn)確、可靠。

5 結(jié) 論

針對(duì)應(yīng)用于發(fā)酵工業(yè)中的酶注射式葡萄糖生物傳感器在實(shí)際使用時(shí)，標(biāo)定液與待測(cè)液溫度不同而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確的問題，以及為簡(jiǎn)化反復(fù)標(biāo)定的繁瑣步驟，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。通過利用Arrhenius equation建立了溫度與原濃度檢測(cè)動(dòng)力學(xué)模型參數(shù)的關(guān)系，并利用此關(guān)系改進(jìn)了目前已有的檢測(cè)方法，避免了在發(fā)酵領(lǐng)域使用時(shí)溫度引起的誤差，同時(shí)省略標(biāo)定部分，更加有利于實(shí)現(xiàn)發(fā)酵工業(yè)中的自動(dòng)化控制。通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證可得到，基于溫度模型的檢測(cè)方法能減小溫度對(duì)檢測(cè)結(jié)果引起的誤差，同時(shí)也增強(qiáng)了此傳感器的穩(wěn)定性，能更好地提升傳感器的性能。將改進(jìn)后的傳感器直接與發(fā)酵工業(yè)中的發(fā)酵罐相連，獨(dú)特的酶注射式結(jié)構(gòu)使得可以忽略高溫滅菌引起的酶失活問題，同時(shí)，利用新的檢測(cè)方法，更有利于在線檢測(cè)、控制補(bǔ)料一體化的發(fā)酵操作系統(tǒng)的實(shí)現(xiàn)。

References

1 SHI Zhong.Ping， PAN Feng. Fermentation Process Analysis， Control and Detection Technology. Beijing： Chemical Industry Press， 2005： 101-105

史仲平， 潘 豐. 發(fā)酵過程解析、控制與檢測(cè)技術(shù). 北京： 化學(xué)工業(yè)出版社， 2005： 101-105

2 Alonso J M， Bielen A A M， Olthuis W， Kengen S W M， Han Z， Franssen M C R. Appl. Surf. Sci.， 2016， 383： 283-293

3 Kamanin S S， Arlyapov V A， Machulin A V， Alferov V A， Reshetilov A N. Rus. J. Appl. Chem.， 2015， 88（3）： 463-472

4 ZHANG Yan， NAN Cai.Feng， FENG Li， ZHANG Li.Qin， DONG Chuan， SHUANG Shao.Min. Chinese J. Anal. Chem.， 2009， 37（7）： 1049-1052

張 彥， 南彩鳳， 馮 麗， 張利琴， 董 川， 雙少敏. 分析化學(xué)， 2009， 37（7）： 1049-1052

5 LIU Guang.Sheng， Gao Xue.Jin， JIA Zhi.Yang， CHENG Li， GENG Ling.Xiao， XUE Ji.Xing. Transducer and Microsystem Technologies， 2012， 31（7）： 95-97

劉廣生， 高學(xué)金， 賈之陽(yáng)， 程 麗， 耿凌霄， 薛吉星. 傳感器與微系統(tǒng)， 2012，31（7）： 95-97

6 GAO Xue.Jin， LIU Guang.Sheng， CHENG Li， GENG Ling.Xiao， XUE Ji.Xing. Chinese J. Anal. Chem.， 2012， 40（12）： 1945-1949

高學(xué)金， 劉廣生， 程 麗， 耿凌霄， 薛吉星. 分析化學(xué)， 2012， 40（12）： 1945-1949

7 GAO Xue.Jin， ZHANG Peng， LI Jiao， WANG Pu. Chinese J. Anal. Chem.， 2015， 43（4）： 523-527

高學(xué)金， 張 鵬， 李 嬌， 王 普. 分析化學(xué)， 2015， 43（4）： 523-527

8 Chen L， Wu Z Q， Wang C， Ouyang J， Xia X H. Anal. Methods， 2012， 4（9）： 2831-2837

9 Snyder S L， Mcauley K B， Mclellan P J， Brouwer E B， Mccaw T. Sens. Actuators B， 2011， 156（2）： 621-630

篇5

工作開展情況

（一）領(lǐng)導(dǎo)高度重視，組織保障落實(shí)有力

一是完善組織機(jī)構(gòu)。

為抓好“七五”普法工作，XX鎮(zhèn)成立了“七五”普法工作領(lǐng)導(dǎo)小組，由鎮(zhèn)黨委書記擔(dān)任組長(zhǎng)，鎮(zhèn)黨委副書記、鎮(zhèn)長(zhǎng)任副組長(zhǎng)，其他班子成員為小組成員，負(fù)責(zé)“七五”普法工作的研究和決策。領(lǐng)導(dǎo)小組下設(shè)辦公室，配有專門聯(lián)絡(luò)員具體負(fù)責(zé)普法日常工作。

二是制定工作方案。

結(jié)合上級(jí)文件精神及鎮(zhèn)情實(shí)際，領(lǐng)導(dǎo)小組研究制定了《XX鎮(zhèn)“七五”普法規(guī)劃》，明確了主要目標(biāo)、主要任務(wù)、對(duì)象和要求等，為深入開展“七五”普法提供了路線圖。

三是建立考核機(jī)制。

堅(jiān)持和完善普法、依法治理工作考核評(píng)估機(jī)制，將普法、依法治理工作納入鎮(zhèn)黨委、政法重要議事日程,推行“誰執(zhí)法誰普法”、依法治鎮(zhèn)工作與綜治維穩(wěn)、平安建設(shè)工作統(tǒng)一部署,統(tǒng)一檢查考評(píng)，有力促進(jìn)我鎮(zhèn)普法、依法治理工作規(guī)范、有序開展。

（二）依托重點(diǎn)工程，法治文化建設(shè)有力

一是大力實(shí)施農(nóng)村“法律明白人”培養(yǎng)工程。

制定了《關(guān)于在全鎮(zhèn)農(nóng)村實(shí)施“法律明白人”培養(yǎng)工程工作方案》，利用3-5年的時(shí)間，分步驟、分階段實(shí)施農(nóng)村“法律明白人”培養(yǎng)工程，推動(dòng)農(nóng)村形成辦事依法、遇事找法、解決問題用法、化解矛盾靠法的濃厚氛圍。截止目前，通過集中培訓(xùn)、送法下鎮(zhèn)、法律明白人網(wǎng)校培訓(xùn)等方式，我鎮(zhèn)已培養(yǎng)農(nóng)村“法律明白人”2000余人，培養(yǎng)骨干“法律明白人”248人。

二是加強(qiáng)村級(jí)法治宣傳陣地建設(shè)。

積極營(yíng)造濃厚的法治氛圍，通過微信、宣傳欄、橫幅等載體做好法治宣傳工作。同時(shí)在各村書寫法治宣傳標(biāo)語(yǔ)、建設(shè)法治宣傳長(zhǎng)廊、法治宣傳欄，定期更新維護(hù)宣傳內(nèi)容，為廣大人民群眾搭建了學(xué)法、

用法的平臺(tái)。

（三）緊扣重點(diǎn)對(duì)象，普法宣傳深入有力

我鎮(zhèn)積極緊扣法治宣傳教育重點(diǎn)對(duì)象，發(fā)揮示范效應(yīng)，帶動(dòng)和促進(jìn)全民法治宣傳教育。

一是抓住領(lǐng)導(dǎo)干部這個(gè)“關(guān)鍵少數(shù)”，積極發(fā)揮領(lǐng)導(dǎo)干部帶頭學(xué)法、模范守法引領(lǐng)作用。

健全完善黨委中心組會(huì)議和鎮(zhèn)黨政聯(lián)席會(huì)議學(xué)法制度，實(shí)現(xiàn)黨政干部學(xué)法經(jīng)常化、制度化。重點(diǎn)在機(jī)關(guān)、站所干部中開展學(xué)法用法活動(dòng)，將鎮(zhèn)干部作為法治宣傳教育工作的重點(diǎn)對(duì)象，堅(jiān)持領(lǐng)導(dǎo)干部法治講座制度、行政執(zhí)法人員法律知識(shí)培訓(xùn)制度，不斷創(chuàng)新學(xué)法形式，增強(qiáng)學(xué)法用法的效果。健全完善重大決策合法性審查機(jī)制，積極推進(jìn)政府法律顧問制度，聘請(qǐng)了謝鳳香同志為鎮(zhèn)政府及各村常年法律顧問，為鎮(zhèn)黨委、政府、村委提供法律咨詢。

二是從青少年抓起,引導(dǎo)青少年從小養(yǎng)成學(xué)法、守法好習(xí)慣。

組織開展“法治進(jìn)校園”活動(dòng)，充分發(fā)揮學(xué)校法治教育的主渠道作用，完善青少年法治宣傳教育相關(guān)制度，加強(qiáng)法治課教師、法治副校長(zhǎng)、法治輔導(dǎo)員的配備管理，充分利用開學(xué)第一課、主題班會(huì)、國(guó)旗下講話開展青少年法治教育。開展校園欺凌現(xiàn)象專項(xiàng)治理，加大對(duì)校園暴力犯罪的懲處力度，堅(jiān)決維護(hù)學(xué)校穩(wěn)定，有效保障學(xué)生安全。

存在的問題

我鎮(zhèn)“七五”普法工作雖然取得了一定成效，但也還存在一些問題：一是個(gè)別單位對(duì)普法工作重視不夠，對(duì)法治建設(shè)的思想認(rèn)識(shí)不到位,開展普法工作的主動(dòng)性不足。二是普法宣傳創(chuàng)新性不足，宣傳形式以傳統(tǒng)手段為主，需要進(jìn)一步拓展思路，研究一些讓群眾更易接受、更喜聞樂見的宣傳手段。三是普法宣傳力度還不夠，宣傳隊(duì)伍力量薄弱。

三、下步工作打算

（一）深入推進(jìn)“法律明白人”培養(yǎng)工程，邀請(qǐng)專業(yè)法律人才進(jìn)行專業(yè)授課，提高集中培訓(xùn)效果；

篇6

二、深入學(xué)習(xí)宣傳貫徹黨的四中全會(huì)精神。按照黨的四中全會(huì)《決定》中關(guān)于加大全民普法工作力度的要求，走進(jìn)基層、深入群眾，結(jié)合普法工作，大力宣傳我國(guó)的根本制度、基本制度、重要制度，促進(jìn)廣大干部群眾把思想和行動(dòng)統(tǒng)一到全會(huì)精神上來。

三、深入開展憲法法律和黨內(nèi)法規(guī)宣傳教育活動(dòng)。各部門各單位常態(tài)化學(xué)習(xí)宣傳憲法，普法辦精心組織2020年度“12.4”國(guó)家憲法日和憲法宣傳周宣傳活動(dòng)。各單位根據(jù)工作職責(zé)開展送法進(jìn)企業(yè)、進(jìn)農(nóng)村、進(jìn)機(jī)關(guān)、進(jìn)社區(qū)、進(jìn)網(wǎng)絡(luò)、進(jìn)景區(qū)景點(diǎn)活動(dòng)。

四、深入開展肺炎疫情防控法治宣傳教育工作。進(jìn)一步貫徹落實(shí)關(guān)于堅(jiān)決打贏肺炎阻擊戰(zhàn)的一系列決策部署，針對(duì)疫情防控工作中熱點(diǎn)問題，采取多種形式組織開展傳染病防治法等法律法規(guī)宣傳和以案釋法活動(dòng)，為疫情防控提供法治保障，營(yíng)造良好輿論氛圍。

篇7

一、組織領(lǐng)導(dǎo)和保障能力得到加強(qiáng)。

為切實(shí)加強(qiáng)“七五”期間的法治宣傳教育工作，加強(qiáng)對(duì)普法依法治理工作的組織領(lǐng)導(dǎo)，我館將普法工作作為一項(xiàng)長(zhǎng)期性工作來抓，制定了《縣檔案局檔案七五普法規(guī)劃》，建立了以館長(zhǎng)為組長(zhǎng)，分管領(lǐng)導(dǎo)為副組長(zhǎng)，相關(guān)股室為成員的普法領(lǐng)導(dǎo)小組，指定專人具體負(fù)責(zé)日常工作，并根據(jù)人員崗位變動(dòng)，及時(shí)調(diào)整了小組成員，負(fù)責(zé)普法工作信息的及時(shí)溝通，保障了全館上下普法工作的順利、有序、有效銜接，為普法工作奠定了堅(jiān)實(shí)的組織基礎(chǔ)。普法領(lǐng)導(dǎo)小組負(fù)責(zé)對(duì)“七五”普法工作進(jìn)行統(tǒng)一安排部署，決定七五普法工作中的重大事項(xiàng)，并將普法依法治理工作納入重要議事日程，納入了黨支部和職工政治學(xué)習(xí)計(jì)劃、納入了年度工作目標(biāo)考核?？朔藛T、經(jīng)費(fèi)困難，盡最大努力保證了普法工作機(jī)構(gòu)、人員、工作經(jīng)費(fèi)三落實(shí)，確保了檔案系統(tǒng)“七五”普法工作的順利開展。制定了《縣檔案局“七五”法治宣傳教育規(guī)劃（2016—2020年）》和年度工作實(shí)施意見，按時(shí)對(duì)工作開展情況進(jìn)行自查總結(jié)，制定了檔案法制宣傳相關(guān)制度，宣傳方案，印發(fā)了《檔案法》、《檔案法實(shí)施辦法》等法制宣傳資料，組建了一支由業(yè)務(wù)骨干和執(zhí)法人員構(gòu)成的檔案法宣講隊(duì)伍，對(duì)全縣的檔案普法工作進(jìn)行宣傳指導(dǎo)監(jiān)督，對(duì)好的做法和經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行了推廣和宣傳，并按時(shí)做好普法檔案資料的收集、歸檔。

二、“七五”普法制度健全、管理規(guī)范。

積極推行法制宣傳教育工作領(lǐng)導(dǎo)責(zé)任制，建立了領(lǐng)導(dǎo)班子學(xué)法制度、干部職工學(xué)法制度、重大事項(xiàng)集體討論決策制度、重大事項(xiàng)決策前法律咨詢制度、行政執(zhí)法責(zé)任制考核評(píng)議制度、行政執(zhí)法過錯(cuò)責(zé)任追究制度、行政執(zhí)法公示制度、執(zhí)法人員管理規(guī)定等制度。從制度上約束和規(guī)范干部職工行政行為。要求全體干部職工嚴(yán)格依法辦事，不允許出現(xiàn)違反規(guī)定的做法。在工作中必須符合法律政策的要求，結(jié)合單位工作的實(shí)際情況，為各項(xiàng)法律法規(guī)的落實(shí)提供保證。

三、突出重點(diǎn)，多渠道開展普法教育

1、領(lǐng)導(dǎo)帶頭、認(rèn)真組織干部職工學(xué)法。為調(diào)動(dòng)大家參與學(xué)習(xí)的積極性，我館堅(jiān)持并完善各種學(xué)習(xí)制度，堅(jiān)持集中學(xué)習(xí)和自學(xué)相結(jié)合，盡力化解工學(xué)矛盾，努力提高領(lǐng)導(dǎo)干部、工作人員和執(zhí)法人員的法制意識(shí)，增強(qiáng)依法行政能力。組織征訂了“七五”普法讀本、《行政強(qiáng)制法》宣傳掛圖、《社會(huì)保險(xiǎn)法》等法律法規(guī)、廉政建設(shè)學(xué)習(xí)資料及檔案法律規(guī)范等資料，設(shè)置“法律圖書角”，不斷增加“七五”普法所學(xué)的法律、法規(guī)內(nèi)容，方便干部職工開展自學(xué)。充分利用每周二五的政治及業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)時(shí)間進(jìn)行相應(yīng)輔導(dǎo)學(xué)法，認(rèn)真學(xué)習(xí)十、報(bào)告、新時(shí)代社會(huì)主義思想理論，《憲法》、黨的方針政策及《檔案法》《機(jī)關(guān)檔案工作條例》《省〈中華人民共和國(guó)檔案法〉實(shí)施辦法》《省國(guó)家檔案館管理辦法》《會(huì)計(jì)檔案管理辦法》《城市社區(qū)檔案管理辦法》《村級(jí)檔案管理辦法》《省檔案“七五”普法讀本》等檔案法律法規(guī)和規(guī)章，完成了規(guī)定的學(xué)習(xí)時(shí)間。通過學(xué)習(xí)，從而達(dá)到提升人員素質(zhì)、不斷改進(jìn)服務(wù)技能的良性循環(huán)，實(shí)現(xiàn)機(jī)關(guān)內(nèi)部日常管理科學(xué)化，法治化。

2、加強(qiáng)全縣檔案工作人員教育培訓(xùn)。按照“誰執(zhí)法、誰普法”要求，結(jié)合檔案業(yè)務(wù)指導(dǎo)檢查工作，強(qiáng)化全縣檔案工作人員法制知識(shí)的宣傳培訓(xùn)，組織縣機(jī)關(guān)、企業(yè)參加省檔案局業(yè)務(wù)培訓(xùn)，每年舉辦1-2期縣級(jí)機(jī)關(guān)檔案業(yè)務(wù)培訓(xùn)，對(duì)機(jī)關(guān)檔案人員進(jìn)行了“零距離”指導(dǎo)，“面對(duì)面”解決實(shí)際問題，提升了基層檔案人員檔案法制意識(shí)和業(yè)務(wù)水平。

3、主題教育取得成效。按照縣普法宣傳教育總體部署，緊密結(jié)合檔案工作實(shí)際，積極開展普法主題教育活動(dòng)和“12.4”法制宣傳活動(dòng)。結(jié)合“扶貧幫扶”、檔案執(zhí)法檢查、檔案培訓(xùn)、“6.9”國(guó)際檔案日等活動(dòng)，組織人員深入基層進(jìn)行黨規(guī)法紀(jì)宣講，參與縣上大型普法活動(dòng)，在醒目的位置懸掛宣傳標(biāo)語(yǔ)，向全縣群眾散發(fā)《中華人民共和國(guó)檔案法》、省《中華人民共和國(guó)檔案法實(shí)施辦法》、《省行政村檔案工作暫行辦法》、《省重大建設(shè)項(xiàng)目檔案管理辦法》等普法資料共計(jì)5000余份。組織全縣機(jī)關(guān)單位工作人員參加了黨建、普法、檔案法律法規(guī)知識(shí)有獎(jiǎng)競(jìng)賽等活動(dòng)，在全縣廣泛普及了檔案法制觀念，進(jìn)一步提高了社會(huì)檔案意識(shí)和檔案法制觀念，產(chǎn)生了良好的社會(huì)效果。

4、充分利用新媒體開展法制宣傳教育。除了傳統(tǒng)的設(shè)立宣傳墻報(bào)、宣傳欄、指導(dǎo)、咨詢、發(fā)放宣傳資料等形式的宣傳手段，我館還注重利用網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行法制宣傳，在微信、QQ群中上傳檔案法規(guī)、涉民文件、普法活動(dòng)、檔案業(yè)務(wù)信息等相關(guān)內(nèi)容學(xué)習(xí)文件，豐富了普法工作的內(nèi)容和形式，增強(qiáng)了大家做好普法工作的積極性。

四、圍繞中心，開展普法宣傳

1、堅(jiān)持普法與做好本職工作相結(jié)合，促進(jìn)檔案事業(yè)全面發(fā)展。緊密結(jié)合扶貧幫扶、抗震救災(zāi)、災(zāi)后重建、機(jī)構(gòu)改革等重點(diǎn)工作任務(wù)，加強(qiáng)檔案業(yè)務(wù)檢查指導(dǎo)、培訓(xùn)、督查工作，大力開展民族政策、檔案法規(guī)的宣傳,進(jìn)一步加強(qiáng)鄉(xiāng)鎮(zhèn)對(duì)村、寺廟檔案工作的指導(dǎo)檢查責(zé)任。每年至少開展開展一次檔案執(zhí)法大檢查，對(duì)機(jī)關(guān)檔案室規(guī)范化管理和特定業(yè)務(wù)檔案工作開展情況進(jìn)行指導(dǎo)督查。

2、推進(jìn)社會(huì)主義法治文化建設(shè)。以宣傳法律知識(shí)、弘揚(yáng)法治精神、推動(dòng)法治實(shí)踐為主旨，積極推進(jìn)社會(huì)主義法治文化建設(shè)，充分發(fā)揮法治文化的引領(lǐng)、熏陶作用，使人民內(nèi)心擁護(hù)和真誠(chéng)信仰法律。結(jié)合機(jī)關(guān)文化建設(shè)，鼓勵(lì)工作人員結(jié)合實(shí)際，撰寫普法文章和檔案信息，向《檔案信息》網(wǎng)站和門戶網(wǎng)站上進(jìn)行投稿，在政府信息公開中對(duì)檔案法規(guī)、涉民文件、普法活動(dòng)、檔案業(yè)務(wù)信息等信息進(jìn)行及時(shí)公示。全面落實(shí)行政權(quán)力規(guī)范運(yùn)行和監(jiān)督工作，及時(shí)清理上報(bào)行權(quán)清單，按照要求對(duì)行權(quán)運(yùn)行情況納入平臺(tái)運(yùn)行，接受監(jiān)督。

五、加強(qiáng)整治，提高依法治理水平

1、加強(qiáng)檔案執(zhí)法隊(duì)伍建設(shè)。為提高執(zhí)法人員素質(zhì)，積極組織單位職工參加省、州檔案局及縣委、縣政府組織的各類政治、法制、業(yè)務(wù)和消防安全培訓(xùn)教育活動(dòng)和網(wǎng)絡(luò)執(zhí)法人員培訓(xùn)，參加普法知識(shí)考試，保證了檔案執(zhí)法人員的數(shù)量和質(zhì)量。逐步完善了檔案行政執(zhí)法責(zé)任制，提高了檔案執(zhí)法人員的法制觀念、法律意識(shí)和執(zhí)法水平，在檔案執(zhí)法過程中做到堅(jiān)持亮證執(zhí)法，依法行政，公平執(zhí)法，在執(zhí)法檢查中認(rèn)真進(jìn)行“兩法”宣傳講解答凝，樹立了檔案執(zhí)法良好形象。

2、做好監(jiān)督檢查，落實(shí)監(jiān)督責(zé)任。將普法的理念融入檔案管理的全過程，通過加強(qiáng)宣傳教育和監(jiān)督考核，促進(jìn)行為養(yǎng)成。加強(qiáng)政風(fēng)行風(fēng)建設(shè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和糾正干部職工不規(guī)范行為，“七五”期間，我縣無檔案違法案件發(fā)生。

篇8

為加強(qiáng)對(duì)七五普法教育工作的領(lǐng)導(dǎo)，確保普法活動(dòng)順利實(shí)施，根據(jù)文件要求，成立了以局長(zhǎng)為組長(zhǎng)，副局長(zhǎng)為副組長(zhǎng)，各股室負(fù)責(zé)人為成員的2020年七五普法工作領(lǐng)導(dǎo)小組，并下設(shè)辦公室在局綜合辦公室。在健全組織機(jī)構(gòu)的同時(shí)，我們細(xì)化任務(wù)、明確分工，切實(shí)推進(jìn)普法工作順利開展。普法工作離不開學(xué)習(xí)資料，辦公室在證訂普法資料時(shí)，均以保證本部門本單位普法學(xué)習(xí)的需要為前提，干部學(xué)法讀本的證訂數(shù)均按照上級(jí)要求如數(shù)征訂。同時(shí)，結(jié)合自身執(zhí)法的實(shí)際，對(duì)業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)用書做到人手一冊(cè)。

二、明確任務(wù)，制訂規(guī)劃

為適應(yīng)依法治理和普法工作的要求，進(jìn)一步廣泛深入地學(xué)習(xí)、宣傳法律法規(guī)知識(shí)，特別是安全生產(chǎn)、項(xiàng)目招投標(biāo)、工程建設(shè)安全等相關(guān)的法律法規(guī)知識(shí)，加強(qiáng)我縣法制建設(shè)，全面推進(jìn)各項(xiàng)事業(yè)的依法管理，同時(shí)，根據(jù)規(guī)劃，結(jié)合實(shí)際，制定了年度普法工作計(jì)劃，從而在時(shí)間上、制度上、措施上保證了七五普法工作的扎實(shí)開展，加強(qiáng)了普法工作的針對(duì)性和實(shí)效性。

三、精心組織，狠抓落實(shí)

自七五普法規(guī)劃制定后，按照《規(guī)劃》提出的總體要求具體部署，普法學(xué)習(xí)采取集中培訓(xùn)與自學(xué)相結(jié)合，面向全局干部職工以及群眾，有計(jì)劃、有步驟地開展了法律、法規(guī)、條例等的宣傳教育活動(dòng)，并取得了一定的實(shí)效。定期組織干部職工學(xué)法，并組織開展各類法制培訓(xùn)班，從各個(gè)層面保證了普法教育宣傳工作的有效開展。

半年來，干部職工堅(jiān)持自學(xué)法律，認(rèn)真學(xué)習(xí)相關(guān)法律、法規(guī)和規(guī)章，交流執(zhí)法程序中需要改正的地方和執(zhí)法業(yè)務(wù)知識(shí)，不斷提升執(zhí)法業(yè)務(wù)水平；自覺增強(qiáng)依法行政意識(shí)，努力提高依法行政的水平和能力；在抓好各類普法工作的同時(shí)，我們還十分注重對(duì)部門法規(guī)規(guī)章的社會(huì)宣傳和普及工作；以每年禁毒法制宣傳日、世界環(huán)保日等一系列活動(dòng)為載體，通過懸掛標(biāo)語(yǔ)、設(shè)置宣傳欄、接受群眾咨詢、發(fā)送宣傳資料等形式大力宣傳法律法規(guī)知識(shí)，發(fā)放宣傳手冊(cè)200余份，接待群眾咨詢200余人。

四、強(qiáng)化管理，依法行政

堅(jiān)持每月組織干部?jī)纱螌W(xué)習(xí)日，其中，一次用于法制培訓(xùn)會(huì)，內(nèi)容以常用法律法規(guī)為主，由各股室業(yè)務(wù)骨干任輔導(dǎo)員，把行政管理轉(zhuǎn)變?yōu)橐婪ü芾?，努力提高依法辦事、依法行政水平；堅(jiān)持每季度召開一次大會(huì)培訓(xùn)；對(duì)全體干部職工進(jìn)行法律法規(guī)知識(shí)培訓(xùn)，依托群眾工作開展堅(jiān)持到聯(lián)系點(diǎn)單位開展法制宣傳活動(dòng)，深入基層開展‘法制下鄉(xiāng)’活動(dòng)，提高廣大農(nóng)牧民群眾的法律素質(zhì)和社會(huì)化管理水平。

五、存在的問題

貫徹執(zhí)行七五普法規(guī)劃的這半年來，雖然取得了一定成績(jī)，但不可否認(rèn)的也存在著一些問題與不足，主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：一是法制培訓(xùn)的區(qū)域覆蓋范圍還有待加強(qiáng);二是宣傳方式有些單一、片面、內(nèi)容覆蓋面不廣。

篇9

2、建立健全普法責(zé)任制，強(qiáng)化普法工作組織領(lǐng)導(dǎo)。按要求建立了我局普法工作責(zé)任制，明晰了我局統(tǒng)計(jì)普法責(zé)任主體，明確了統(tǒng)計(jì)法律法規(guī)宣傳普及為主體，大力宣傳憲法、基本法律法規(guī)、執(zhí)法司法適用的法律法規(guī)并行兼重的統(tǒng)計(jì)普法重點(diǎn)任務(wù)，落實(shí)了權(quán)責(zé)統(tǒng)一、及時(shí)有效、普法并舉、條塊結(jié)合的普法工作原則。成立了以局長(zhǎng)為組長(zhǎng)，以分管人員和普查中心主任為副組長(zhǎng)，其科室專業(yè)人員為其成員的統(tǒng)計(jì)普法工作領(lǐng)導(dǎo)小組。建立了以分管領(lǐng)導(dǎo)督辦、普查辦具體抓落實(shí)、相關(guān)專業(yè)科室分工合作的組織運(yùn)作機(jī)制，并對(duì)關(guān)鍵點(diǎn)和重大時(shí)點(diǎn)的普法工作實(shí)施時(shí)間、人力、物力上的重點(diǎn)傾斜，為普法宣傳工作提供了強(qiáng)力支撐。

3、架構(gòu)聯(lián)合普法宣傳新模式。緊緊圍繞普查（經(jīng)濟(jì)普查、農(nóng)業(yè)普查、人口普查全國(guó)重大普查標(biāo)準(zhǔn)時(shí)點(diǎn)日和以“12.4”國(guó)家憲法日、“12.8”日統(tǒng)計(jì)法頒布紀(jì)念日）三個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)集中宣傳為主軸。懸掛橫幅100多幅次，印放《致調(diào)查對(duì)象的一封信》、《統(tǒng)計(jì)法》、《農(nóng)業(yè)調(diào)查要點(diǎn)》、《人口抽樣變動(dòng)調(diào)查制度》等知識(shí)宣傳手冊(cè)5000余份，營(yíng)造濃厚的普法輿論氛圍，提升重點(diǎn)對(duì)象的學(xué)法守法自覺性主動(dòng)性。

篇10

為提高學(xué)校依法決策、依法管理水平，維護(hù)校園穩(wěn)定，維護(hù)師生合法權(quán)益，保證教育方針的全面貫徹實(shí)施，學(xué)校特成立了以xx校長(zhǎng)為組長(zhǎng)的依法治校領(lǐng)導(dǎo)小組，制定了學(xué)校“七五”普法規(guī)劃和年度工作計(jì)劃，聘請(qǐng)了蒲亭鎮(zhèn)派出所xx同志和法院xx同志為法制副校長(zhǎng)，加強(qiáng)學(xué)生的法制教育，增強(qiáng)了師生的法制觀念。

二、規(guī)范辦學(xué)行為，依法管理學(xué)校

1、建立完善的領(lǐng)導(dǎo)體制，充分發(fā)揮集體的作用。凡學(xué)校有重大事項(xiàng)都經(jīng)學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)班子集體研究，再召集全體教師進(jìn)行討論，經(jīng)全體教師通過后方才執(zhí)行，堅(jiān)持做到校務(wù)、政務(wù)公開。

2、健全學(xué)校安全管理制度。著重做好校園基礎(chǔ)設(shè)施的安全檢查工作，對(duì)存在安全隱患的地方進(jìn)行徹底整改，切實(shí)消除安全隱患，確保師生的人身安全；加強(qiáng)校園的治安管理，學(xué)校實(shí)行領(lǐng)導(dǎo)帶班、教師值班巡邏制度，確保學(xué)校良好的治安環(huán)境；加強(qiáng)學(xué)校消防和用電管理，定期檢查消防設(shè)施和器材，及時(shí)更換老化電線，確保學(xué)校用電、用水安全；制定了安全方面的各項(xiàng)應(yīng)急預(yù)案，確保在緊急狀況下，師生能夠迅速疏散，同時(shí)利用國(guó)旗下講話、班會(huì)時(shí)間加強(qiáng)對(duì)學(xué)生進(jìn)行安全教育，增強(qiáng)學(xué)生的自防自救能力。

3、認(rèn)真執(zhí)行國(guó)家課程計(jì)劃，嚴(yán)格按照課程計(jì)劃開設(shè)課程，做到開足、開齊課，特別是學(xué)校里的思想品德課，要求每位老師認(rèn)真上好每節(jié)課。學(xué)校嚴(yán)格遵守上級(jí)主管部門規(guī)定的作息時(shí)間，不隨意變動(dòng)上課時(shí)間，不在假期里給學(xué)生補(bǔ)課。

4、加強(qiáng)學(xué)生思想道德教育、法制教育。以《小學(xué)生守則》、《小學(xué)生日常行為規(guī)范》為主線，開展形式多樣、豐富多彩的活動(dòng)，利用國(guó)旗下講話，主題班會(huì)活動(dòng)對(duì)學(xué)生進(jìn)行思想、法制教育。在法制教育上做到了“四落實(shí)”，即有教師、有教材、有課時(shí)、有活動(dòng)。

5、規(guī)范收費(fèi)行為，切實(shí)治理亂收費(fèi)現(xiàn)象。凡涉及向?qū)W生、家長(zhǎng)代收費(fèi)的，我校都嚴(yán)格按照財(cái)政、物價(jià)及上級(jí)教育行政主管部門核定的收費(fèi)范圍、收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行，在執(zhí)行過程中本著自愿原則，并在收費(fèi)期間向?qū)W生、家長(zhǎng)進(jìn)行公示，維護(hù)了學(xué)校、教師在人民群眾中的形象。

三、開展“法律進(jìn)校園”活動(dòng)，堅(jiān)持品德教育與法制教育并進(jìn)

1、采取課堂教育和集中宣傳教育相結(jié)合的方式，推動(dòng)學(xué)生學(xué)法的落實(shí)。一是制定好法制教育工作計(jì)劃，明確課時(shí)安排，通過日常課堂教學(xué)加強(qiáng)對(duì)學(xué)生法制教育，推進(jìn)學(xué)校法制教育計(jì)劃、教材、課時(shí)、師資的“四落實(shí)”；二是要利用全國(guó)法制宣傳日、全國(guó)安全教育日等特定時(shí)間，開展集中法制宣傳教育活動(dòng)，不斷提升學(xué)校學(xué)生學(xué)法的效果。

2、采取“小手牽大手活動(dòng)”，推動(dòng)學(xué)生和家長(zhǎng)互動(dòng)式的法律學(xué)習(xí)。每月要求各班開展一次法制宣傳教育班會(huì)活動(dòng)，要求每個(gè)同學(xué)在班會(huì)上講一個(gè)法制故事。課后每個(gè)同學(xué)回去給家長(zhǎng)講一個(gè)發(fā)生在你身邊或所知道的遵紀(jì)守法小故事或違法必受罰的案例，讓學(xué)生和家長(zhǎng)一起來學(xué)法、用法，提高全民的法律素養(yǎng)。

3、采取靈活多樣的教育方式，促進(jìn)學(xué)生的學(xué)法用法。把法制教育與思想品德教育密切結(jié)合起來，把反面典型教育與正面教育、全面教育與個(gè)別教育有機(jī)結(jié)合，把法制教育與日常行為規(guī)范達(dá)標(biāo)、依法治校結(jié)合起來。不斷探索法制教育方式方法，增強(qiáng)法制教育的實(shí)效性和吸引力。近年來，學(xué)校通過開展法制講座、法制知識(shí)競(jìng)賽、法制手抄報(bào)等生動(dòng)活潑的形式，指導(dǎo)學(xué)生積極參加各種法制活動(dòng)，在實(shí)踐中增長(zhǎng)法律知識(shí)。

4、以創(chuàng)建“平安校園示范學(xué)校”為契機(jī)，抓好學(xué)生普法教育。以創(chuàng)建工作為載體，加強(qiáng)對(duì)學(xué)生的安全防范教育，依法開展校園及周邊治安環(huán)境的專項(xiàng)治理工作，從而實(shí)現(xiàn)教育隊(duì)伍更加穩(wěn)定、校園秩序更加優(yōu)化、法治環(huán)境更加規(guī)范、安全管理更加完善的目標(biāo)。①進(jìn)一步明確學(xué)校安全目標(biāo)，深入開展安全法制教育，舉辦專題講座，提高全校師生的安全、防范意識(shí)；②加大綜合治理工作力度，落實(shí)校園安全責(zé)任制；③建立聯(lián)控聯(lián)防長(zhǎng)效機(jī)制，深入整治校園周邊環(huán)境，嚴(yán)禁學(xué)生在課間出入校園，努力營(yíng)造良好的外部環(huán)境④加大檢查力度，堅(jiān)持季度檢查與平時(shí)檢查相結(jié)合，重點(diǎn)對(duì)校園教學(xué)樓門窗、電路、體育設(shè)施等隱患進(jìn)行檢查，做到防患于未然。⑤加強(qiáng)與相關(guān)部門聯(lián)合行動(dòng)，加強(qiáng)對(duì)學(xué)生依法維護(hù)合法權(quán)益的指導(dǎo)。使青少年懂得用法律武器維護(hù)自身的合法權(quán)益，同不良行為作斗爭(zhēng)，增強(qiáng)青少年自我保護(hù)意識(shí)和能力。

5、多渠道宣傳，拓寬法律宣傳學(xué)習(xí)的寬度和廣度。在強(qiáng)化學(xué)法的前提下，加強(qiáng)了法律知識(shí)的宣傳。學(xué)校的宣傳櫥窗，每學(xué)期都有法律知識(shí)的宣傳和違法行為圖片展。各班黑板報(bào)定期有法律知識(shí)的內(nèi)容，并把此項(xiàng)內(nèi)容作為班級(jí)考核、文明班級(jí)的評(píng)比的主要條件。

通過扎實(shí)開展上述“七五”普法宣傳教育活動(dòng)，我校“七五”普法工作取得明顯成效：一是師生法律知識(shí)普及率達(dá)到100%，二是師生安全無事故、無輟學(xué)、無違法犯罪、無盜竊案件、無刑事案件等；三是師生的遵紀(jì)守法率達(dá)到100%，教育教學(xué)質(zhì)量穩(wěn)步提高。