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時(shí)間:2023-03-21 17:16:29
導(dǎo)言:作為寫作愛好者,不可錯(cuò)過為您精心挑選的10篇生物學(xué)論論文,它們將為您的寫作提供全新的視角,我們衷心期待您的閱讀,并希望這些內(nèi)容能為您提供靈感和參考。
2“知識(shí)與方法”考查的“重組移植”策略
生物學(xué)試題考查的知識(shí)內(nèi)容主要包括事實(shí)性知識(shí)和方法性知識(shí)??疾闀r(shí),整合事實(shí)性知識(shí)和方法性知識(shí)可以還原知識(shí)的產(chǎn)生過程、體現(xiàn)知識(shí)的應(yīng)用價(jià)值。從知識(shí)的形成過程提煉出的科學(xué)方法,還可以“移植”到其他知識(shí)的探究過程。生物學(xué)原創(chuàng)試題采用這種思路,重組“知識(shí)”和“方法”,可創(chuàng)設(shè)出新穎的問題情景。例如,差速離心法是分離各種細(xì)胞器的方法。設(shè)計(jì)“酵母菌細(xì)胞呼吸”有關(guān)試題時(shí),可將差速離心法“移植”到酵母菌細(xì)胞呼吸的研究中。即用差速離心法將線粒體和細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)分離,然后進(jìn)行細(xì)胞呼吸的實(shí)驗(yàn),以此作為試題情景,以考查細(xì)胞呼吸的過程。又如,將放射性同位素標(biāo)記法“移植”到考查細(xì)胞周期染色體行為的試題中,創(chuàng)設(shè)出來的試題既能夠考查有絲分裂細(xì)胞中染色體的行為,又能夠考查DNA半保留復(fù)制的特點(diǎn)。例3就是這樣的試題。例3:提取正常家兔的造血干細(xì)胞,放入液體培養(yǎng)基培養(yǎng),提供的脫氧核苷酸原料中的N元素全為15N。造血干細(xì)胞連續(xù)進(jìn)行有絲分裂,則第二次分裂后期的細(xì)胞中,含14N的染色體所占比例為A.0B.50%C.25%D.100%參考答案:B。
3從科學(xué)史資料提煉試題的“補(bǔ)充整合”策略
高中生物學(xué)教材含有豐富的科學(xué)史素材,是命題的重要素材庫(kù)。若能根據(jù)知識(shí)的生成過程,梳理史實(shí)的脈絡(luò),挖掘史料之間的內(nèi)在聯(lián)系,以思維能力和核心知識(shí)為測(cè)量目標(biāo)和考查內(nèi)容,做好“補(bǔ)充整合”,命題往往能夠打破框框、達(dá)到求變出新的效果。這一策略的要點(diǎn):第一,要對(duì)史料進(jìn)行針對(duì)性的“補(bǔ)充”,才能出新;第二,須“整合”,形成一個(gè)有內(nèi)在聯(lián)系的知識(shí)結(jié)構(gòu),思路才會(huì)連貫,主題才能聚焦。2014年高考理綜試題福建卷的第28題,就是采用這種策略命制的。從例4可以看出,該題對(duì)教材中的科學(xué)史素材有選擇、有提煉,以“人類對(duì)遺傳的認(rèn)知逐步深入”為線索,主題聚焦,第1小題和第3小題對(duì)教材中的史料有補(bǔ)充和整合,設(shè)問的角度也比較新穎。這道題的出現(xiàn),是福建高考遺傳方面命題的一個(gè)新突破,它避開了以往的舊模式,打開一片新的視野。盡管題干文字較長(zhǎng)、語言表達(dá)還存在一定的瑕疵。但是,其靈活的創(chuàng)作思路和求新求變的可貴精神值得贊賞。例4:人類對(duì)遺傳的認(rèn)知逐步深入。(1)在孟德爾豌豆雜交實(shí)驗(yàn)中,純合的黃色圓粒(YYRR)與綠色皺粒(yyrr)的豌豆雜交,若將F2中黃色皺粒豌豆自交,其子代中表現(xiàn)型為綠色皺粒的個(gè)體占。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)r基因的堿基序列比R基因多了800個(gè)堿基對(duì),但r基因編碼的蛋白質(zhì)(無酶活性)比R基因編碼的淀粉支酶少了末端61個(gè)氨基酸,推測(cè)r基因轉(zhuǎn)錄的mRNA提前出現(xiàn)。試從基因表達(dá)的角度,解釋在孟德爾“一對(duì)相對(duì)性狀的雜交實(shí)驗(yàn)”中,所觀察的7種性狀的F1中顯性性狀得以體現(xiàn),隱性性狀不體現(xiàn)的原因是。(2)摩爾根用灰身長(zhǎng)翅(BBVV)與黑身殘翅(bbvv)的果蠅雜交,將F1中雌果蠅與黑身殘翅雄果蠅進(jìn)行測(cè)交,子代出現(xiàn)四種表現(xiàn)型,比例不為1∶1∶1∶1,說明F1中雌果蠅產(chǎn)生了種配子。實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合自由組合定律,原因是這兩對(duì)等位基因不滿足該定律“”這一基本條件。(3)格里菲思用于轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的肺炎雙球菌中,S型菌有SⅠ、SⅡ、SⅢ等多種類型,R型菌是由SⅡ型突變產(chǎn)生。利用加熱殺死的SⅢ與R型菌混合培養(yǎng),出現(xiàn)了S型菌。有人認(rèn)為S型菌出現(xiàn)是由于R型菌突變產(chǎn)生,但該實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的S型菌全為,否定了這種說法。(4)沃森和克里克構(gòu)建了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型,該模型用解釋DNA分子的多樣性,此外,的高度精確性保證了DNA遺傳信息穩(wěn)定傳遞。參考答案:(1)1/6終止密碼(子)顯性基因表達(dá),隱性基因不轉(zhuǎn)錄,或隱性基因不翻譯,或隱性基因編碼的蛋白質(zhì)無活性或活性低(2)4非同源染色體上非等位基因(3)SⅢ(4)堿基對(duì)排列順序的多樣性堿基互補(bǔ)配對(duì)。
2過程學(xué)習(xí)策略
學(xué)習(xí)生物學(xué)過程時(shí),要在圖文結(jié)合閱讀的基礎(chǔ)上看圖說話,然后在腦海中想象過程、建構(gòu)表象。更高層次的學(xué)習(xí)還應(yīng)包括分析過程中各環(huán)節(jié)之間的因果聯(lián)系,針對(duì)各環(huán)節(jié)分析影響過程的諸多因素,完成從感性到理性的飛躍。例如,學(xué)習(xí)“減數(shù)分裂”時(shí),按上述策略分析就會(huì)發(fā)現(xiàn),同源染色體的聯(lián)會(huì)是同源染色體分排在赤道板兩側(cè)的保障,而同源染色體在減Ⅰ中期的排列以及紡錘體的存在又保證了同源染色體的分離,同源染色體的分離導(dǎo)致配子中染色體數(shù)量減半但又擁有一個(gè)完整的染色體組、攜帶有本物種生長(zhǎng)發(fā)育所需的整套的遺傳信息。因此,凡影響紡錘體形成的因素(如低溫、秋水仙素)均可導(dǎo)致同源染色體不能分離,凡影響同源染色體正常聯(lián)會(huì)的因素(如染色體的數(shù)量及結(jié)構(gòu)變異)均影響配子攜帶的遺傳信息,進(jìn)而可能影響配子的可育性。
3實(shí)驗(yàn)和技術(shù)學(xué)習(xí)策略
實(shí)驗(yàn)和技術(shù)學(xué)習(xí)時(shí),一方面要追問每一個(gè)操作步驟的目的和原理;另一方面要將有關(guān)實(shí)驗(yàn)和技術(shù)操作步驟的文字描述轉(zhuǎn)換成簡(jiǎn)潔的流程圖并想象自己操作的畫面。如果教材是以圖解形式說明操作步驟的,則應(yīng)認(rèn)真讀圖,既注意大的步驟,又注意圖中的細(xì)節(jié)。
4科學(xué)史學(xué)習(xí)策略
科學(xué)史學(xué)習(xí)時(shí),首先要還原到當(dāng)時(shí)的研究背景,弄清要解決的問題是什么、研究的思路是什么、研究的過程和方法(包括實(shí)驗(yàn)方法)是什么、研究結(jié)果和結(jié)論是什么,或者弄清科學(xué)家提出的觀點(diǎn)是什么、論據(jù)是什么、論證過程是什么、意義是什么;然后站在今天的知識(shí)層面和技術(shù)高度進(jìn)行評(píng)價(jià),從實(shí)驗(yàn)材料、研究對(duì)象、研究思路、研究方法(包括實(shí)驗(yàn)方法)、推理過程等角度分析研究的得與失、成功之處與局限之處,或者分析論據(jù)是否充足真實(shí)、是否可以由已有的論據(jù)充分地論證觀點(diǎn)、推理過程是必然的還是或然的。最后,在分析局限性和不足的基礎(chǔ)上提出改進(jìn)措施,提出新的觀點(diǎn)和設(shè)想。例如,學(xué)習(xí)拉馬克的進(jìn)化觀點(diǎn)時(shí),用現(xiàn)代遺傳學(xué)知識(shí)進(jìn)行分析和評(píng)價(jià)就會(huì)發(fā)現(xiàn),雖然存在著理論證據(jù)和許多事實(shí)證據(jù)證明生物個(gè)體“用進(jìn)廢退”的現(xiàn)象是客觀存在的,但用進(jìn)廢退獲得的性狀是定向變異,定向變異是不可遺傳的,因而在進(jìn)化上是沒有意義的。因此,不能用個(gè)體身上“用進(jìn)廢退”的事實(shí)證明“用進(jìn)廢退和獲得性遺傳是生物進(jìn)化的原因”。
Palmer等在人類上皮細(xì)胞應(yīng)用siRNA技術(shù)沉默Tctex-1發(fā)現(xiàn),出現(xiàn)了比對(duì)照組wt-Tctex-1更長(zhǎng)的纖毛,此現(xiàn)象與運(yùn)用同樣方法沉默動(dòng)力蛋白重鏈-2(DHC2)導(dǎo)致的初級(jí)纖毛延長(zhǎng)相似,同時(shí)發(fā)現(xiàn),抑制DHC2會(huì)引起Tctex-1的伴隨損失。相比單個(gè)亞基的沉默,DHC2和Tctex-1用siRNA技術(shù)雙沉默能導(dǎo)致更長(zhǎng)的纖毛。早期的研究表明,DHC2與中間輕鏈LIC3(D2LIC)特異性相互作用參與初級(jí)纖毛的形成和功能,因此,證明Tctex-1是纖毛長(zhǎng)度的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,且該過程可能是通過Tctex-1動(dòng)力蛋白依賴[25]性途徑實(shí)現(xiàn)的。T94磷酸化Tctex-1連接纖毛重吸收與細(xì)胞重新進(jìn)入S期過程,添加外源性Tctex-1(T94E)突變體能加速細(xì)胞纖毛吸收并促使其進(jìn)入S期;然而,在非纖毛細(xì)胞中Tctex-1不能促使細(xì)胞進(jìn)入S期。研究表[26]明肌動(dòng)蛋白參與了Tctex-1調(diào)控纖毛吸收過程。在Tctex-1連接纖毛重吸收和細(xì)胞重新進(jìn)入細(xì)胞周期的過程中,胰島素樣生長(zhǎng)-1(IGF-1)磷酸化細(xì)胞纖毛的IGF-1受體(IGF-1R),進(jìn)而活化AGS3調(diào)節(jié)Gβγ信號(hào)通路,隨后招募磷酸(T94)Tctex-1選擇性富集到纖毛過渡區(qū),促有絲分裂信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)使纖毛重吸收進(jìn)一步加速G1-S期進(jìn)程。在皮質(zhì)區(qū)干細(xì)胞中干擾這一途徑的任何環(huán)節(jié)都將影響神經(jīng)元細(xì)胞增殖時(shí)的成熟分化。在大腦皮質(zhì)(duringcorticogenesis)中,纖毛傳導(dǎo)的非經(jīng)典IGF-1R-Gβγ–phospho(T94)Tctex-1信號(hào)通路通過調(diào)節(jié)纖毛重吸收和細(xì)胞周期[13]G1期的長(zhǎng)短進(jìn)而促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的增殖和分化。此外,有報(bào)道證明食欲素(OX-A,OX-B)參與睡眠-覺醒周期的調(diào)節(jié),Tctex-1與食欲素受體1(OX1R)[27]相作用,進(jìn)而調(diào)節(jié)OX-A信號(hào)傳導(dǎo)。據(jù)報(bào)道Tctex-1參與人瘤病毒等感染引起的腫瘤發(fā)生過程,同時(shí),Tctex-1也參與抑癌基因REIC/Dkk-3的信號(hào)傳導(dǎo),Tctex-1表達(dá)下調(diào)削弱了其對(duì)GEF-H1的抑制作用從而引發(fā)白血病。
1.1.1病原菌的分離和致病性測(cè)定采集新近腐爛的百合鱗莖,采用組織分離法[11]在病健交界組織處切取4mm×4mm小塊,用75%酒精表面消毒30s,再用2%次氯酸鈉消毒7min,無菌水沖洗3次,然后置于PDA培養(yǎng)基上28℃黑暗培養(yǎng),待長(zhǎng)出菌絲后,挑取菌落邊緣進(jìn)行純化,純化后的菌落再進(jìn)行單孢分離培養(yǎng)。病原菌致病性測(cè)定根據(jù)柯赫氏法則,用滅菌的接種針在消毒后的鱗莖片上刺孔,將浸有菌液的濾紙片貼在孔上作為有傷接種,同時(shí)將浸有菌液的濾紙片貼在未刺孔的鱗莖片上作為無傷接種,將浸無菌水的濾紙片貼在孔上作為對(duì)照。接種處理完成后將鱗莖片置于培養(yǎng)皿中保濕培養(yǎng),5d后觀察并記錄發(fā)病情況,確定病原菌對(duì)百合鱗莖的致病性。對(duì)接種發(fā)病的鱗莖片再次進(jìn)行病原菌的分離。
1.1.2病原菌鑒定
1.1.2.1病原菌形態(tài)學(xué)觀察將病原菌接種到PDA平板,28℃黑暗培養(yǎng)2-5d,觀察菌落形態(tài),并在顯微鏡下觀察病原菌的菌絲及孢子的形態(tài)特征,測(cè)量孢子大小。
1.1.2.2ITS序列分析將供試菌株接種于PDA培養(yǎng)基中;28℃恒溫培養(yǎng)4d,收集菌絲體,采用CTAB法提取病原菌基因組DNA。ITS通用擴(kuò)增引物為TS1(5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’)和TS4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’)。擴(kuò)增體系:50µL,基因組模板DNA1µL、10µmol/L上下游引物各1µL、2mmol/LdNTPs5µL、KODDNA聚合酶1µL、10×KODbuffer5µL,加ddH2O補(bǔ)足體積。PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序?yàn)?4℃預(yù)變性3min;94℃變性30s;58℃復(fù)性30s;72℃延伸3min,35個(gè)循環(huán);72℃延伸10min。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后,由北京信諾金達(dá)生物技術(shù)有限公司測(cè)序。所得測(cè)序結(jié)果在NCBI網(wǎng)站上用BLAST軟件進(jìn)行同源性比較后,下載同源序列,用MEGA(molecularevolutionarygeneticsanalysis,Version6.0)軟件將病原菌ITS序列與同源序列進(jìn)行比對(duì),并采用鄰接法(Neighborjoining,NJ)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,自舉法(bootstrap)對(duì)系統(tǒng)發(fā)育樹進(jìn)行檢驗(yàn),500次重復(fù)。
1.1.3病原菌生物學(xué)特性將直徑5mm的病原菌菌塊分別接種于供試培養(yǎng)基平板(直徑9cm)中央,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),分析培養(yǎng)基種類、碳源、氮源、溫度、pH和光照時(shí)間對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響。采用PDA、PSA、PMA、LA和LDA培養(yǎng)基;培養(yǎng)溫度分別為5、15、25和35℃;pH分別為5、6、7、8和9;全光照、全黑暗和光照/黑暗各12h;等量葡萄糖、果糖、乳糖和淀粉置換查氏基本培養(yǎng)基中的蔗糖,等量硫酸銨、硝酸銨、硝酸鉀和蛋白胨,置換查氏基本培養(yǎng)基中的硝酸鈉,并設(shè)空白對(duì)照。病原菌菌株Z1和Z2分別在以上各條件下培養(yǎng)5d、2d后(因菌株Z2生長(zhǎng)速度較快,因此縮短培養(yǎng)時(shí)間統(tǒng)計(jì)菌落生長(zhǎng)狀況),采用十字交叉法測(cè)量菌落生長(zhǎng)直徑作為菌絲生長(zhǎng)狀況指標(biāo),7d后采用血球計(jì)數(shù)板法測(cè)量孢子產(chǎn)量。
1.2數(shù)據(jù)分析
采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析,Duncan氏新復(fù)極差法檢驗(yàn)處理間差異顯著性。顯著水平p=0.05,每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。
2結(jié)果與分析
2.1百合鱗莖腐爛病癥狀及致病性蘭州百合鱗莖腐爛病的發(fā)生一般從鱗莖表面破損處開始,初侵染時(shí)在破損處形成略顯褐色的侵染點(diǎn),逐漸擴(kuò)展形成近圓形或不規(guī)則形狀的褐色病斑,病斑中央呈腐爛狀,并逐漸向四周擴(kuò)大,病斑上可見灰綠色霉層,腐爛組織不斷增加,嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致整個(gè)鱗莖軟化腐爛。從蘭州百合鱗莖腐爛病斑上分離純化得到五株菌株,分別編號(hào)為Z1、Z2、Z3、Z4和Z5。致病性結(jié)果表明,僅菌株Z1、Z2單獨(dú)接種健康百合鱗莖片后,在接種部位出現(xiàn)腐爛病斑,并伴隨菌絲體大量繁殖,菌株Z2比Z1的侵染能力強(qiáng),無傷接種也可導(dǎo)致鱗莖片腐爛(圖1-b、c)。菌株Z1和Z2混合接種鱗莖片后,使鱗莖片腐爛更為嚴(yán)重(圖1-d),其病癥與百合鱗莖自然條件下的發(fā)病癥狀相同。從接種發(fā)病部位可分別重新分離到與接種菌相同的菌株,表明所分離到的菌株Z1、Z2均為蘭州百合鱗莖腐爛病病原菌。
2.2病原菌鑒定
2.2.1病原菌形態(tài)從蘭州百合腐爛鱗莖上分離到的病原菌菌株Z1,在PDA培養(yǎng)基上菌絲質(zhì)地致密絲絨狀,中央部分呈絮狀,菌株形成少量菌核,同時(shí)伴有滲出液(圖2-a);菌落反面為無色至淡褐色,后期產(chǎn)生菌核時(shí),會(huì)顯現(xiàn)黑褐色斑點(diǎn)(圖2-b);分生孢子頭初為球形,后呈輻射形;分生孢子梗多生自基質(zhì),孢子梗200~800μm×8~20μm,壁厚,無色,粗糙;產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)為雙層;分生孢子為近球形,直徑為2.4~6.4μm,壁略粗糙(圖2-c)。病原菌菌株Z2在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)迅速,菌絲疏松,最初呈白色,后變?yōu)榛液谏▓D2-d),菌落背面呈白色棉絮狀(圖2-e);假根發(fā)達(dá),分枝呈指狀或根狀,呈深褐色。孢子囊呈球形或近球形,初期呈白色,老后呈黑色,直徑25~200μm,孢囊孢子呈橢圓形或近球形,淡褐色(圖2-f)。
2.2.2ITS序列分析用ITS通用引物擴(kuò)增出病原菌的通用引物序列,長(zhǎng)度分別為594bp(GenBank登錄號(hào):KP172534)和627bp(GenBank登錄號(hào):KP172533)。經(jīng)BLAST分析,菌株Z1、菌株Z2的rDNA-ITS序列分別與黃曲霉和米根霉的同源性最高。在同源性最高的序列中各挑選10個(gè)菌株的ITS序列分別與供試菌株構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。如圖3所示,菌株Z1序列與Aspergillusflavus(JF754467.1)的序列親緣關(guān)系最近,且與A.flavus相聚于同一群。如圖4所示,菌株Z2的序列與Rhizopusoryzae(JQ683242.1)的序列親緣關(guān)系最近,且與R.oryzae相聚于同一群。菌株Z1、Z2的ITS序列在NCBI上BLAST結(jié)果與A.flavus和R.oryzae的相似性為分別為99%和99%~100%,進(jìn)而從系統(tǒng)分類學(xué)上進(jìn)一步驗(yàn)證了菌株Z1和菌株Z2;再結(jié)合病原菌的形態(tài)特征,可以確定菌株Z1為黃曲霉(A.flavus),菌株Z2為米根霉(R.oryzae)。
2.3病原菌的生物學(xué)特性
2.3.1培養(yǎng)基種類對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響A.flavus和R.oryzae兩種病原菌在供試的五種培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng),兩種病原菌在百合培養(yǎng)基和百合葡萄糖培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量最大,且在這兩種培養(yǎng)基上的差異不顯著。A.flavus在LA上培養(yǎng)5d后菌落直徑達(dá)19.0mm,R.oryzae在LA上培養(yǎng)2d后,菌落直徑達(dá)40.5mm,7d后產(chǎn)孢量分別為10.35×106個(gè)/ml和8.06×106個(gè)/ml(圖5)。
2.3.2碳源、氮源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響兩種病原菌對(duì)供試碳源均可利用。A.flavus在葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度最大,培養(yǎng)5d后菌落直徑達(dá)20.0mm,而在果糖、乳糖和淀粉為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度次之,且三者間差異不顯著。A.flavus在葡萄糖和果糖為碳源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量最高,而兩者間差異不顯著;在淀粉為碳源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量次之,在乳糖為碳源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量最低(表1)。R.oryzae在葡萄糖和果糖為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量最大,且兩者間差異不顯著;在乳糖和淀粉為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量次之,且兩者間差異也不顯著(表1)。A.flavus在蛋白胨和硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度最大,且兩者間差異不顯著,但在蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量高于硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基,在硫酸銨和硝酸鉀為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量都較低(表1)。R.oryzae在蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基上,菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量都最大,在硫酸銨和硝酸鉀為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)較好,在硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基菌絲生長(zhǎng)較差,與無氮培養(yǎng)基差異不顯著,但在硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量高于硫酸銨和硝酸鉀為氮源的培養(yǎng)基(表1)。
2.3.3培養(yǎng)條件對(duì)對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響由表2可知,兩種病原菌的菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的最適溫度是25℃。A.flavus和R.oryzae在pH為5-9范圍內(nèi)的PDA培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng),A.flavus在pH為5、8和9的PDA培養(yǎng)基的菌絲生長(zhǎng)速度均較快,5d后菌落直徑差異不顯著,而在pH為6時(shí)產(chǎn)孢量最大,7d后產(chǎn)孢量為9.85×106個(gè)。R.oryzae在pH為6時(shí)菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量最快,2d后菌落直徑達(dá)35.5mm,7d后產(chǎn)孢量為3.75×106個(gè)/ml:光照可促進(jìn)兩種病原菌的菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢,A.flavus在全光照條件下生長(zhǎng)5d后,其菌落直徑達(dá)23.0mm,而R.oryzae在全光照條件下生長(zhǎng)2d后,菌落直徑達(dá)24.0mm,7d后產(chǎn)孢量分別達(dá)13.03×106個(gè)/ml和6.33×106個(gè)/ml。
3討論
本研究通過致病性測(cè)定、形態(tài)學(xué)特性和ITS序列分析,確定引起蘭州百合鱗莖貯藏腐爛病的病原菌是A.flavus和R.oryza,表明此腐爛病害是根霉腐爛病和曲霉腐爛病混合發(fā)生,這兩種腐爛病害在百合鱗莖腐爛的相關(guān)研究中也有報(bào)道,但與本研究中分離到的病原菌不同,其病原菌是A.niger和R.stolonifer。此外,也有較多研究表明圓弧青霉菌、簇狀青霉菌也可導(dǎo)致百合鱗莖腐爛,我們?cè)谔m州百合鱗莖貯藏病害調(diào)查時(shí)也發(fā)現(xiàn)大多腐爛嚴(yán)重的百合鱗莖表面著生有青霉菌菌絲,而且在分離病原菌時(shí)也分離到兩種青霉菌,但致病性測(cè)定表明,這兩種青霉菌均不引起百合腐爛,僅可在刺破表皮的百合鱗莖表面繁殖,表明我們分離到兩種青霉菌僅是腐生菌,而不是病原菌。
生物學(xué)特性研究表明,A.flavus和R.oryzae兩種病原菌的最適生長(zhǎng)條件基本相同,這可能也是兩種菌可以共生而侵染百合導(dǎo)致其發(fā)生腐爛病的原因。此外,這兩種病原菌在LA和LDA培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量均高于PDA和PSA(在LA和LDA上的菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量差異不顯著),表明百合鱗莖本身的營(yíng)養(yǎng)有利于這兩種菌的繁殖而侵染百合鱗莖導(dǎo)致發(fā)生腐爛病害。目前,國(guó)內(nèi)外食用百合的種植面積遠(yuǎn)低于觀賞用百合,因此對(duì)百合鱗莖腐爛病的研究大多關(guān)注觀賞用百合鱗莖種球在生長(zhǎng)發(fā)育過程中的腐爛對(duì)出苗率和花卉品質(zhì)的影響,而尖鐮孢菌是引起觀賞用百合鱗莖種球腐爛的主要病原菌,這與導(dǎo)致蘭州百合鱗莖貯藏期間腐爛的病原菌不同,因此,防治花卉百合種球腐爛病的方法對(duì)食用百合也無借鑒作用。而作為食用的蘭州百合鱗莖在原產(chǎn)地的貯藏方式目前多采用低溫冷庫(kù)在零下4℃條件下貯藏,通常不采用其它防腐措施,導(dǎo)致貯藏期間腐爛病的發(fā)生較為嚴(yán)重,本研究通過對(duì)其病原菌的分離和生物學(xué)特性的研究,為下一步開展采用安全的方法消毒百合貯藏冷庫(kù)以及預(yù)處理百合鱗莖來防治腐爛病害的發(fā)生奠定了必要的基礎(chǔ)。
1.2菌體細(xì)胞、有機(jī)酸及過氧化氫的排除實(shí)驗(yàn)將唾液乳桿菌LH1F的發(fā)酵上清液用微孔濾膜(孔徑為0.22μm)的細(xì)菌濾器過濾去除菌體細(xì)胞;將無菌體發(fā)酵上清液用1mol/L的NaOH溶液中和至pH5.0;將無菌體發(fā)酵上清液經(jīng)過氧化氫酶處理(酶濃度為10mg/mL,pH7.0,37℃水浴1h),將上述處理的樣品及唾液乳桿菌LH1F原發(fā)酵上清液、pH5.0的乳酸分別做抑菌實(shí)驗(yàn)[8],比較不同處理抑菌活性的差異。
1.3蛋白酶的敏感性將經(jīng)胰蛋白酶(酶濃度為10mg/mL,pH7.0,37℃水浴2h)、胃蛋白酶(酶濃度為10mg/mL,pH3.0,37℃水浴2h)處理后的無菌體發(fā)酵上清液以及未經(jīng)蛋白酶處理的無菌體發(fā)酵上清液檢測(cè)其抑菌活性的差異。
1.4唾液乳桿菌LH1F生理曲線測(cè)定唾液乳桿菌LH1F新鮮菌液以2%的接種量接種于150mLMRS培養(yǎng)基中,每隔2h(0~36h)取1mL發(fā)酵液置于離心管中,以MRS培養(yǎng)基作為空白對(duì)照,測(cè)量OD600nm值和pH,用各個(gè)培養(yǎng)時(shí)間的發(fā)酵上清液做抑菌實(shí)驗(yàn),測(cè)量抑菌圈的直徑。
1.5唾液乳桿菌LH1F產(chǎn)細(xì)菌素的初步純化向無菌體發(fā)酵上清液分別經(jīng)30%,40%,50%,60%,70%,80%飽和度硫酸銨沉淀,4℃靜置過夜,4℃、7000r/min離心30min,收集沉淀,將沉淀重懸于原體積1/10的pH5.0,0.1mol/L的檸檬酸酸鹽緩沖液中,檢測(cè)鹽析上清液與沉淀復(fù)溶液的抑菌活性。將抑菌活性最高的沉淀復(fù)溶液經(jīng)截留分子質(zhì)量3ku的超濾離心管超濾[9](5000×g,4℃)得濃縮液(M>3ku)及超濾液(M<3ku),分別取原液、濃縮液及超濾液測(cè)定抑菌活性。
1.6唾液乳桿菌LH1F產(chǎn)細(xì)菌素的生物學(xué)特性
1.6.1熱穩(wěn)定性細(xì)菌素粗提液樣品分別于60℃、80℃、100℃、121℃條件下熱處理30min(121℃處理樣品置于烘箱,其余溫度置于電熱恒溫水槽),冰浴冷卻后,以未經(jīng)熱處理的樣品為對(duì)照,進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn),比較抑菌活性的變化情況,確定該細(xì)菌素的溫度穩(wěn)定性。
1.6.2pH穩(wěn)定性分別取0.5mL的細(xì)菌素粗提樣品于離心管中,用1mol/LHCl和1mol/LNaOH分別調(diào)pH至2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0和8.0,37℃水浴2h后,調(diào)pH至5.0,以MRS培養(yǎng)基用1mol/LHCl和1mol/LNaOH調(diào)至相應(yīng)pH作為對(duì)照,做抑菌試驗(yàn)檢測(cè)抑菌活性的變化。
1.6.3蛋白酶敏感性細(xì)菌素粗提樣品用1mol/LHCl和1mol/LNaOH分別調(diào)至各酶的最適pH(胃蛋白酶pH調(diào)至3.0,胰蛋白酶、蛋白酶KpH調(diào)至7.0),加入酶的終濃度為10mg/ml,以同比稀釋的細(xì)菌素粗提樣品作為對(duì)照,37℃水浴2h,然后將pH調(diào)回至初始的pH,以未加入酶的發(fā)酵上清液作對(duì)照,分析該細(xì)菌素粗提樣品以不同蛋白酶處理后抑菌活性的變化。
1.6.4抑菌譜選取金黃色葡萄球菌、蘇云金芽孢桿菌、雞大腸桿菌O-78、大腸桿菌CMCC44102、雞白痢沙門氏菌C-79、鼠傷寒沙門氏菌CMCC50115、黑曲霉、根霉、青霉、啤酒酵母、紅酵母11株菌為指示菌,采用單層瓊脂平板打孔法分別對(duì)供試的菌株做抑菌試驗(yàn),測(cè)試細(xì)菌素粗提樣品的抑菌活性。
2結(jié)果與分析
2.1指示菌的篩選通過單層瓊脂平板打孔法檢測(cè)到唾液乳桿菌LH1F的發(fā)酵上清液對(duì)三種常見病原指示菌均有一定的抑菌性,結(jié)果見表1,金黃色葡萄球菌作為指示菌培養(yǎng)12h的抑菌效果最為明顯,但與大腸桿菌CMCC44102及鼠傷寒沙門氏菌CMCC50115的抑菌效果差異不明顯,因此以下抑菌實(shí)驗(yàn)革蘭氏陽性菌采用金黃色葡萄球菌,革蘭氏陰性菌采用大腸桿菌CMCC44102作為指示菌,培養(yǎng)觀察時(shí)間為12h。
2.2抑菌物質(zhì)性質(zhì)的確定不同處理對(duì)唾液乳桿菌LH1F發(fā)酵上清液抑菌活性的影響結(jié)果如圖1所示:去除菌體細(xì)胞后,該發(fā)酵上清液的抑菌作用與原發(fā)酵上清液差別不大,說明發(fā)酵上清液中的抑菌性不是菌體細(xì)胞作用的結(jié)果;排酸作用后,該發(fā)酵上清液抑菌活性降低,但仍有一定的抑菌作用,而相同pH值的乳酸無抑菌活性,說明發(fā)酵上清液中還有其他抑菌物質(zhì)存在;發(fā)酵上清液經(jīng)過氧化氫酶37℃水浴1h處理后,抑菌活性比處理前的原發(fā)酵上清液小,但仍保留了較強(qiáng)的抑菌作用,說明發(fā)酵上清液中過氧化氫不是主要的抑菌物質(zhì),還有其他的抑菌物質(zhì)存在。發(fā)酵上清液經(jīng)過胃蛋白酶處理后,抑菌活性下降22.22%,發(fā)酵上清液經(jīng)過胰蛋白酶處理后,抑菌活性下降了19.44%,抑菌物質(zhì)對(duì)蛋白酶較敏感,說明抑菌物質(zhì)為蛋白質(zhì)類物質(zhì),初步確定為肽類細(xì)菌素。
2.3唾液乳桿菌LH1F生理曲線的測(cè)定將唾液乳桿菌LH1F的新鮮種子液按2%的體積比接種于MRS培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)后每隔2h取樣,測(cè)定OD600nm值,pH和上清液的抑菌活性,該菌株的生理曲線(0~36h)的測(cè)定結(jié)果如圖2,菌株置于37℃培養(yǎng),2~6h即進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,12h左右進(jìn)入穩(wěn)定期。發(fā)酵上清液的pH在發(fā)酵2h后開始發(fā)生變化,2~8hpH迅速下降,從4.8降至3.5,8~20hpH緩慢下降,從3.5降至3.0,12h后恒定在pH3.0。在對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)前期(4h)開始產(chǎn)生細(xì)菌素,進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期(4~12h)后細(xì)菌素產(chǎn)量持續(xù)增加,培養(yǎng)16h的細(xì)菌素產(chǎn)量達(dá)到最大值,此時(shí)抑菌活性達(dá)到最高,隨后保持穩(wěn)定,整個(gè)過程受pH的影響較小,結(jié)果表明唾液乳桿菌LH1F在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)前期就產(chǎn)生細(xì)菌素。
2.4唾液乳桿菌LH1F細(xì)菌素的初步純化硫酸銨沉淀后,分別用鹽析上清液和沉淀復(fù)溶液作抑菌試驗(yàn),結(jié)果如圖3所示,硫酸銨飽和度為30%及40%時(shí)鹽析所得的上清液均有抑菌效果,30%飽和度的抑菌效果比40%的好,而且30%飽和度鹽析所得的上清液抑菌效果比沉淀復(fù)溶液要好,說明30%飽和度硫酸銨不能較好地沉淀唾液乳桿菌LH1F所產(chǎn)的細(xì)菌素。隨著硫酸銨鹽飽和度的增大,沉淀復(fù)溶液抑菌效果增強(qiáng)并在60%時(shí)達(dá)到最佳,70%,80%飽和度時(shí)沉淀復(fù)溶液抑菌效果有所下降。因此,可以進(jìn)一步確定抑菌物質(zhì)主要為蛋白質(zhì)類物質(zhì),鹽析的硫酸銨飽和度為60%時(shí)效果最佳。將所得的沉淀復(fù)溶液經(jīng)截留分子量為3ku的超濾離心管超濾后,取原液、濃縮液及超濾液分別測(cè)定其抑菌活性。結(jié)果顯示,濃縮液的抑菌活性比原液(粗提液)強(qiáng),而超濾液僅具有微弱的抑菌圈,表明絕大部分細(xì)菌素能被3ku截留分子量的超濾管截留。
2.5唾液乳桿菌LH1F產(chǎn)細(xì)菌素的特性研究
2.5.1熱穩(wěn)定性唾液乳桿菌LH1F所產(chǎn)細(xì)菌素在不同的溫度下進(jìn)行處理,檢測(cè)抑菌活性,熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明(圖4),隨著溫度的升高,細(xì)菌素的殘余活性有所降低,但抑菌活性變化不是很大,樣品經(jīng)60~80℃處理30min,抑菌活性保留95.9~91.8%之間;經(jīng)100℃處理30min后,抑菌活性保留87.8%,而經(jīng)121℃處理30min后,其抑菌活性仍保留在75.5%,該細(xì)菌素表現(xiàn)出良好的熱穩(wěn)定性,與文獻(xiàn)報(bào)道[7]的唾液乳桿素均屬于第Ⅱ類細(xì)菌素(分子量小于10ku的小分子熱穩(wěn)定肽)相符。食品加工中常用的巴氏殺菌條件為65~80℃15min,而此細(xì)菌素在巴氏殺菌的條件下仍保持90%以上的高活性,顯示出其在食品加工中的廣泛應(yīng)用前景。
2.5.2pH穩(wěn)定性pH穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明(表2),唾液乳桿菌LH1F所產(chǎn)細(xì)菌素在偏酸的環(huán)境中有較強(qiáng)的抑菌性,活性pH范圍為2.0~5.0,pH越低,活性越強(qiáng),pH為2.0時(shí)抑菌活性最強(qiáng),當(dāng)pH>6.0時(shí),細(xì)菌素基本沒有抑菌性,說明所產(chǎn)細(xì)菌素在酸性條件下有較好的穩(wěn)定性,,而在中性或堿性條件下即會(huì)失活。
2.5.3對(duì)蛋白酶的敏感性唾液乳桿菌LH1F所產(chǎn)細(xì)菌素樣品分別經(jīng)不同的酶在37℃條件下處理2h,檢測(cè)抑菌活性,以確定該細(xì)菌素的蛋白酶敏感性。結(jié)果表明(圖5),樣品產(chǎn)生的細(xì)菌素對(duì)蛋白酶敏感,經(jīng)胃蛋白酶處理后抑菌活性下降約35%,經(jīng)胰蛋白酶處理后抑菌活性下降約30%,經(jīng)蛋白酶K處理后抑菌活性下降約21%,說明該抑菌物質(zhì)是蛋白類物質(zhì),可被蛋白酶降解而不會(huì)在體內(nèi)殘留,作為食品防腐劑使用安全性相對(duì)較高。
2.5.4抑菌譜的測(cè)定用粗提樣品分別對(duì)供試的G+菌株、G-及部分真菌做抑菌實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明(表3),唾液乳桿菌LH1F所產(chǎn)細(xì)菌索不僅對(duì)供試的1株金黃色葡萄球菌、1株蘇云金芽孢桿菌等革蘭氏陽性菌有較強(qiáng)的抑制作用,對(duì)2株大腸桿菌、2株沙門氏菌等革蘭氏陰性菌也有較強(qiáng)的抑制作用,但是對(duì)酵母菌及曲霉、青霉、根霉等霉菌未見有抑制作用。該細(xì)菌索有較寬的抑菌譜,不僅對(duì)芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌等革蘭氏陽性菌有明顯抑制作用,同時(shí)對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌等革蘭氏陰性菌也表現(xiàn)抑菌活性,可廣泛用于食品的防腐殺菌處理。
2、結(jié)果
2.1耐藥細(xì)胞的建立
SKOV3經(jīng)300μg/ml大劑量的紫杉醇作用2h后,大部分細(xì)胞死亡漂浮,剩余細(xì)胞腫脹,伸出樹枝狀突起呈蜘蛛狀,胞質(zhì)見空泡形成、顆粒增多。少量存活的細(xì)胞克隆生長(zhǎng),恢復(fù)生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期消化傳代,再進(jìn)行下一次沖擊;SKOV3經(jīng)10~30nmol/L小劑量的紫杉醇作用24h,約50%的細(xì)胞死亡,細(xì)胞體積增大,形態(tài)不規(guī)則,胞質(zhì)內(nèi)顆粒增多,貼壁性變?nèi)?,給藥24~72h內(nèi)最明顯,96~120h后逐漸恢復(fù)原狀。經(jīng)兩種誘導(dǎo)方法獲得的耐藥細(xì)胞系,分別命名為SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30。
2.2耐藥細(xì)胞的生物特性
2.2.1耐藥指數(shù)MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,耐藥細(xì)胞及其敏感細(xì)胞的IC50值及耐藥指數(shù),可見小劑量濃度遞增誘導(dǎo)的耐藥細(xì)胞SKOV3/TAX30耐藥性較強(qiáng),見表2。2.2.2平板克隆形成實(shí)驗(yàn)在無藥物作用時(shí),SKOV3敏感細(xì)胞較兩種耐藥細(xì)胞系的克隆形成能力強(qiáng),見圖1A的d組,SKOV3敏感細(xì)胞的克隆形成數(shù)為(934±16.37),SKOV3/TAX300的克隆形成數(shù)為(440±13.75),SKOV3/TAX30的克隆形成數(shù)為(579±9.50)。與敏感細(xì)胞SKOV3相比,兩種耐藥細(xì)胞克隆形成數(shù)少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均=0.000),見圖1B。而在相同濃度紫杉醇作用下,耐藥細(xì)胞形成的克隆明顯多于敏感細(xì)胞。在紫杉醇濃度為5nM時(shí),SKOV3/TAX30可形成(1206±9.50)個(gè)克隆,SKOV3/TAX300可形成(870±32.30)個(gè)克隆,而SKOV3形成的克隆數(shù)僅(202±6.08),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均=0.000);當(dāng)紫杉醇濃度進(jìn)一步升高為50nM和500nM時(shí),SKOV3/TAX30和SKOV3/TAX300形成的克隆數(shù)仍明顯高于敏感細(xì)胞SKOV3。紫杉醇濃度為50nM時(shí),SKOV3細(xì)胞與SKOV3/TAX300細(xì)胞形成的克隆數(shù)相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.013),SKOV3細(xì)胞與SKOV3/TAX30細(xì)胞形成的克隆數(shù)相比,差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000);紫杉醇濃度為500nmol/L時(shí),SKOV3細(xì)胞與SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30細(xì)胞形成的克隆數(shù)相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.009、0.0001),見圖1B。2.2.3生長(zhǎng)曲線倍增時(shí)間的差異SKOV3敏感細(xì)胞和兩種耐藥細(xì)胞系在相同條件下培養(yǎng)7天,細(xì)胞增殖產(chǎn)生一定的差異。耐藥細(xì)胞的生長(zhǎng)較敏感細(xì)胞減慢,生長(zhǎng)曲線的斜率減小,見圖2。同時(shí),根據(jù)生長(zhǎng)曲線計(jì)算出SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30細(xì)胞的倍增時(shí)間分別為28.90h、24.0h,與敏感細(xì)胞的倍增時(shí)間20.84h相比也有所延長(zhǎng)。
2.3耐藥相關(guān)基因
MDR1、BCL2L1、LRP、PRKCA在各細(xì)胞中的表達(dá)MDR1、BCL2L1、LRP、PRKCAmRNA在SKOV3、SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30細(xì)胞中的相對(duì)表達(dá)豐度見圖3A、3B。兩種耐藥細(xì)胞中,MDR1的表達(dá)明顯增高,提示SKOV3/TAX300、SKOV3/TAX30對(duì)紫杉醇的耐藥與MDR1高表達(dá)有關(guān)。SKOV3/TAX300細(xì)胞中PRKCA、LRP的表達(dá)均高于SKOV3細(xì)胞,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.016,P=0.005),BCL2L1的表達(dá)與敏感細(xì)胞比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.815)。而SKOV3/TAX30細(xì)胞的PRKCA、LRP的表達(dá)與敏感細(xì)胞比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.154,P=0.206)。BCL2L1的表達(dá)低于敏感細(xì)胞(P=0.001),見圖3B。以上數(shù)據(jù)表明不同誘導(dǎo)方式導(dǎo)致耐藥細(xì)胞發(fā)生不同生物學(xué)變化,可能存在不同的耐藥機(jī)制。
2.4耐藥細(xì)胞的保存
耐藥細(xì)胞SKOV3/TAX30分別凍存在含有0、10、30nM紫杉醇的凍存液中,于凍存后1、3、6月復(fù)蘇,檢測(cè)IC50,見表3。1、3月后檢測(cè)結(jié)果提示,在3種藥物濃度條件下的細(xì)胞IC50沒有明顯區(qū)別,但凍存6月后,無藥凍存組的耐藥細(xì)胞與兩種加藥凍存組的細(xì)胞比較,其IC50明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。同一個(gè)藥物濃度條件下,無藥凍存組的耐藥細(xì)胞在凍存6月時(shí),出現(xiàn)耐藥性下降,而兩種加藥凍存組細(xì)胞在6月的凍存過程中,細(xì)胞IC50雖然出現(xiàn)輕度下降,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3、討論
3.1耐藥細(xì)胞的建立
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:增加給藥劑量、適當(dāng)延長(zhǎng)無藥間歇期,可能延緩細(xì)胞的耐藥性。由于大劑量沖擊誘導(dǎo)與臨床治療模式相似,臨床上體內(nèi)耐藥指數(shù)≥2倍即足以導(dǎo)致化療失敗[5],因此大劑量沖擊誘導(dǎo)產(chǎn)生的耐藥細(xì)胞雖然耐藥指數(shù)較低,也是模擬臨床耐藥的良好模型。
3.2耐藥細(xì)胞的特性
本研究的結(jié)果表明:在無藥物作用時(shí),SKOV3細(xì)胞的集落形成能力強(qiáng)于兩種耐藥細(xì)胞SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30,但在不同濃度紫杉醇藥物條件下,耐藥性最強(qiáng)的SKOV3/TAX30集落形成能力也最強(qiáng),而敏感細(xì)胞SKOV3的集落形成能力最弱,此結(jié)果與MTT法檢測(cè)的耐藥性一致。紫杉醇的作用機(jī)制是促進(jìn)微管蛋白二聚體裝配成微管,抑制紡錘體形成,將細(xì)胞阻斷于G2/M期,細(xì)胞的有絲分裂異常或停止,使多核細(xì)胞的形成增多[6]。誘導(dǎo)的過程中耐藥細(xì)胞膨脹、形態(tài)不規(guī)則、細(xì)胞體積的增大可能與細(xì)胞群體中多核細(xì)胞的增多有關(guān)。本研究的生長(zhǎng)曲線實(shí)驗(yàn)中,SKOV3/TAX300和SKOV3/TAX30的倍增時(shí)間分別為28.9、24.0h,與敏感細(xì)胞SKOV3的倍增時(shí)間20.84h相比有明顯延長(zhǎng),顯示耐紫杉醇的卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng)速度減慢。細(xì)胞周期的阻滯,除導(dǎo)致一些細(xì)胞周期特異性藥物失效外,腫瘤細(xì)胞處于相對(duì)靜止?fàn)顟B(tài),易對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐受。
3.3耐藥相關(guān)基因的檢測(cè)
卵巢癌紫杉醇耐藥機(jī)制的研究中,多藥耐藥(multidrugresistance,MDR)一直是熱點(diǎn)。多藥耐藥是指對(duì)一種藥物具有耐藥性的同時(shí),也對(duì)其他結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制完全不同的化療藥物產(chǎn)生交叉耐受的一種現(xiàn)象。多藥耐藥的產(chǎn)生是一個(gè)多因素的過程,主要包括:(1)細(xì)胞內(nèi)有效藥物濃度的降低;(2)細(xì)胞內(nèi)藥物活性的改變;(3)凋亡的抑制;(4)腫瘤細(xì)胞微環(huán)境改變化療敏感度。P-gp是多藥耐藥基因MDR1編碼的相對(duì)分子質(zhì)量為17kD的一種跨膜糖蛋白,其功能是使細(xì)胞內(nèi)藥物濃度降低,藥物的作用減弱或喪失,細(xì)胞由此獲得耐藥性。與大多數(shù)其他化療藥物的多藥耐藥機(jī)制相似,紫杉醇作為P-gp的作用底物之一,其耐藥機(jī)制與MDR1基因擴(kuò)增導(dǎo)致的P-gP高表達(dá)密切相關(guān)[7-8]。肺耐藥相關(guān)蛋白LRP是在多藥耐藥的肺癌細(xì)胞株中發(fā)現(xiàn)的與MDR相關(guān)的非糖蛋白,相對(duì)分子質(zhì)量為110kD,能阻止藥物通過核孔進(jìn)入細(xì)胞核,避免其作用于核內(nèi)靶點(diǎn),藥物運(yùn)送到胞質(zhì)的囊泡中,再通過胞吐作用將藥物排出體外,從而發(fā)生紫杉類藥物耐藥[9-10]。凋亡抑制基因也參于紫杉醇耐藥。BCL2L1基因,全稱為BCL-2樣1基因(BCL-2-like1),編碼蛋白屬于BCL-2蛋白家族,BCL-2蛋白家族通過抑制腫瘤細(xì)胞凋亡,導(dǎo)致耐藥性[11-12]。PRKCA基因?yàn)榈鞍准っ窩α(proteinkinaseCalpha),也被稱為PKCA、PRKACA、KPCA、AAG6。細(xì)胞過度增殖和抗細(xì)胞凋亡機(jī)制障礙都可導(dǎo)致腫瘤進(jìn)展和耐藥現(xiàn)象發(fā)生[13]。另外PKC的作用是使底物蛋白磷酸化而活化,p-gp是PKC的作用底物,當(dāng)其表達(dá)增加或活性增強(qiáng)時(shí),可使大量的P-gp磷酸化而活化,從而產(chǎn)生耐藥性。本研究結(jié)果提示。SKOV3/TAX300細(xì)胞PRKCA、LRP的表達(dá)均略高于敏感細(xì)胞。但SKOV3/TAX30細(xì)胞的PRKCA、LRP的表達(dá)與敏感細(xì)胞比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。BCL2L1在SKOV3/TAX30細(xì)胞的表達(dá)低于敏感細(xì)胞,但SKOV3/TAX300細(xì)胞中BCL2L1的表達(dá)略高于敏感細(xì)胞,結(jié)果提示不同方式誘導(dǎo)的耐藥細(xì)胞,可能存在不同的耐藥機(jī)制。
二、生物學(xué)自然主義意識(shí)理論的主要觀點(diǎn)
生物學(xué)自然主義(biologicalnaturalism)的目標(biāo)是在自然界中為意識(shí)找到位置,塞爾認(rèn)為對(duì)意識(shí)的定位必須符合“科學(xué)的”世界觀,而“物質(zhì)的原子理論”以及“生物進(jìn)化論”這兩大目前證據(jù)確鑿、不容置疑的理論在很大程度上構(gòu)建了現(xiàn)代世界觀,我們對(duì)此承認(rèn)而不會(huì)懷疑。因此,在對(duì)意識(shí)進(jìn)行自然化的理解中,生物自然主義就建立在這兩大理論之上。第一,為了使生物學(xué)自然主義能夠被接受,塞爾提醒我們應(yīng)該忘記心身問題的討論歷史,而關(guān)注基本的物理事實(shí)。在塞爾看來,心靈的首要的和最根本的特征是意識(shí)性,他不僅給這種特征下了一個(gè)定義,而且依據(jù)生物進(jìn)化論對(duì)意識(shí)在自然中是如何產(chǎn)生的作出了解釋:這個(gè)詞(意識(shí)性)意指那些知覺的或清醒的狀態(tài),它們一般在我們?cè)绯繌某了行褋頃r(shí)開始、并在整個(gè)一天繼續(xù)這種狀態(tài),直到我們?cè)俅稳胨P闹乾F(xiàn)象是由腦中的神經(jīng)生理過程而引起的,并且他們本身就是腦的特征……心智現(xiàn)象和過程如消化、有絲分裂、減數(shù)分裂或者酶的分泌一樣,都是我們生物自然歷史中的一部分。。第二,在塞爾看來,意識(shí)雖然有其物質(zhì)性的一面,但同時(shí)也蘊(yùn)含四個(gè)高階的重要特征:定性特征、主觀性、統(tǒng)一性和意向性,這使得意識(shí)不能在本體論上被還原為低階神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)。所謂定性特征(qualitativeness),即意識(shí)都具有“它感覺起來像什么”(what-it-feels-like)的特征,有哲學(xué)家用“qualia”(一般翻譯為“感受質(zhì)”)來表示這種性質(zhì),比如說感覺到疼痛和品嘗冰激凌的狀態(tài)就有著不同的感受。所謂主觀性(subjectiv-ity),即意識(shí)狀態(tài)在必須通過人或者動(dòng)物的主觀感受到時(shí)才存在,在這個(gè)意義上,意識(shí)具有第一人稱本體論的地位。所謂意識(shí)的統(tǒng)一場(chǎng),即意識(shí)能夠把觸覺、視覺等感覺作為單一的、統(tǒng)一的意識(shí)場(chǎng)中的一部分而被經(jīng)驗(yàn)到,即“規(guī)范的、非病因?qū)W(non-pathological)種類的意識(shí)是通過一個(gè)統(tǒng)一的結(jié)構(gòu)而涌向我們的”。所謂意識(shí)的意向性(intentional-ity),即意識(shí)能夠關(guān)于、指稱客體或者事件的能力。
在塞爾看來,很多有意識(shí)的狀態(tài)都是有意向性的,然而并非所有的意識(shí)都有意向性,也不是所有的意向性都是有意識(shí)的。既然意識(shí)具有自身的獨(dú)特特征,但是意識(shí)擁有神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)的事實(shí)也是不可忽視的,那么,意識(shí)的這些獨(dú)特特征是如何在物質(zhì)世界中存在且不與之相矛盾呢?塞爾用生物學(xué)自然主義的四個(gè)核心論題進(jìn)行了描述。在他看來,二元論與唯物主義一元論雖然有錯(cuò)誤,但是同時(shí)也含有合理因素,因此,塞爾所采取的策略就是在吸取各自正確方面的同時(shí)否定其錯(cuò)誤方面,從而建構(gòu)出生物學(xué)自然主義意識(shí)理論。具體來說,這一理論包含意識(shí)的實(shí)在性、因果還原性質(zhì)、系統(tǒng)突現(xiàn)性質(zhì)和因果效力四個(gè)主要論題。意識(shí)的實(shí)在性,即意識(shí)作為實(shí)在世界中的真實(shí)現(xiàn)象,它有著自身的獨(dú)特性質(zhì),我們不可以通過消除性還原、本體論還原而表明其不存在或者是別的什么東西,否則就會(huì)消除意識(shí)。意識(shí)的因果還原性質(zhì),即意識(shí)狀態(tài)完全是由腦中較低層次的神經(jīng)生物學(xué)過程引起的,“意識(shí)狀態(tài)在因果上可以還原為神經(jīng)生物學(xué)進(jìn)程”。意識(shí)的系統(tǒng)突現(xiàn)性質(zhì)(emergentproperty),即意識(shí)是大腦的宏觀特征,意識(shí)狀態(tài)是腦系統(tǒng)在腦中的實(shí)現(xiàn),而在微觀層次的單個(gè)神經(jīng)元?jiǎng)t不具有意識(shí),通過微觀的神經(jīng)元組織才使得腦系統(tǒng)的各部分有意識(shí)。意識(shí)的因果效力,即意識(shí)的實(shí)在性使得它可以像物理事物一樣作為原因而起作用,例如,我相信天會(huì)下雨而使我出門的時(shí)候帶上雨傘。對(duì)于意識(shí)狀態(tài)的這種特征,塞爾也稱之為“心理因果性”(MentalCausation)或“意向因果性”(IntentionalCausation)。通過對(duì)以上四個(gè)論題的闡述,塞爾揭示了意識(shí)的實(shí)存依據(jù),為意識(shí)找到了在自然界中的位置。在塞爾看來,意識(shí)具有實(shí)在性,表現(xiàn)為在本體論上不能夠被還原為第三人稱現(xiàn)象,它有神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ),通過突現(xiàn)的方式產(chǎn)生,而且能夠以因果的方式發(fā)生作用。然而,僅僅指出意識(shí)是自然的一部分,而沒有從細(xì)節(jié)上分析上述意識(shí)的特征和性質(zhì)是如何不與物質(zhì)世界的特征和規(guī)律相沖突的,這與唯物主義一元論的某些主張相比沒有什么不同之處。
三、生物學(xué)自然主義意識(shí)理論解決心身問題的路徑
塞爾把心身問題分為哲學(xué)部分和科學(xué)部分來加以解決。在他看來,較為容易的哲學(xué)部分主要解決意識(shí)與其他心理現(xiàn)象的關(guān)系、意識(shí)與大腦的關(guān)系是什么的問題,通過對(duì)心身問題背后隱含假設(shè)的清理,他把答案歸結(jié)為兩大原則“首先,意識(shí)甚至所有的心理現(xiàn)象都是在大腦中由較低層面的神經(jīng)生物學(xué)過程引起的;第二,意識(shí)與其它心理現(xiàn)象都是大腦較高層次的特征”。而對(duì)于較為困難的科學(xué)部分,塞爾則認(rèn)為主要任務(wù)就是從細(xì)節(jié)上解釋意識(shí)在大腦中是如何運(yùn)行的,如果能夠解決這個(gè)問題,則將是目前時(shí)代最重要的科學(xué)發(fā)現(xiàn)。因此,總體看來,生物學(xué)自然主義解決心身難題的路徑主要有:對(duì)傳統(tǒng)概念的重新分析和定義———拒斥概念二元論、對(duì)兩種不同形式還原概念的區(qū)分;建構(gòu)意識(shí)的因果—層級(jí)模型;構(gòu)建“意識(shí)科學(xué)”,把意識(shí)問題的解決在經(jīng)驗(yàn)上訴諸神經(jīng)生物學(xué)。塞爾認(rèn)為,傳統(tǒng)二元論和唯物論都預(yù)設(shè)了“概念二元論”(conceptualdualism)。這一理論假定“心理”和“物理”有嚴(yán)格的區(qū)別:“物理的”意味著“非心理的”,“心理的”意味著“非物理的”,從而導(dǎo)致唯物論與二元論一樣也是不融貫的,“因此唯物論在某個(gè)意義上是二元論的最美的花朵”。
由于這種觀點(diǎn)使心、物對(duì)立,心身問題難以解決,因此必須拒斥這一理論,把意識(shí)看作大腦系統(tǒng)的高階生物特征。塞爾主張,心靈的定性特征、主觀性和具有意向性,與物理性質(zhì)的:能在空間中定位、在空間中延續(xù)、可以通過微觀物理學(xué)進(jìn)行因果解釋,包括作為一個(gè)因果封閉系統(tǒng)而發(fā)揮作用是相容的,而且意識(shí)的這三個(gè)特征“在特定的時(shí)間段里定位于大腦之中,并可以通過較低層次的進(jìn)程加以因果解釋,還能夠以因果方式發(fā)揮作用”。這必須區(qū)分兩種不同形式的還原。第一,區(qū)分因果還原(causalreduction)和本體論還原(ontologicalreduction)。因果還原指的是當(dāng)某事物A的行為在因果上能夠通過事物B的行為來說明,而且除了B具有這種因果能力之外,A并不具有這種能力,那么,就可以說某種A現(xiàn)象就在因果方面被還原成了B種類的現(xiàn)象;本體論還原指的是當(dāng)某事物A表明只不過就是事物B時(shí),那么某種現(xiàn)象A在本體論上就被還原成了B種類的現(xiàn)象。塞爾認(rèn)為,對(duì)于意識(shí)現(xiàn)象而言,我們不可以對(duì)之進(jìn)行本體論還原,因?yàn)椤皳碛幸庾R(shí)這個(gè)概念的關(guān)鍵就在于抓住該現(xiàn)象的第一人稱的主觀性特征,而如果我們通過第三人稱的客觀化話語方式來重新界定意識(shí)的話,那么我們就會(huì)失去該要點(diǎn)”。因此,我們只能從因果的角度將意識(shí)還原為大腦的神經(jīng)生理活動(dòng)。第二,區(qū)分消除性還原(eliminativereduction)和非消除性還原。消除性還原區(qū)分了表象與實(shí)在,意在表明被還原的現(xiàn)象根本不存在。而對(duì)于非消除式還原來說,其適用的對(duì)象不能是已經(jīng)實(shí)存的東西,例如固體性本來就是物體分子行為產(chǎn)生的,人們不可能把這種實(shí)存特征消除。在塞爾看來,意識(shí)不能作消除性還原,因?yàn)閷?duì)于意識(shí)而言,意識(shí)在產(chǎn)生它的本體論意義上是實(shí)存的,而且在認(rèn)識(shí)論上也是不容懷疑的,不能作“現(xiàn)象—實(shí)在”的區(qū)分,意識(shí)作為一種表象就是實(shí)在。心身問題的重要方面就是心身因果作用的問題,塞爾在解決這個(gè)問題的過程中同時(shí)建立了意識(shí)的因果—層級(jí)模型。在他看來,世界是由原子等物理粒子構(gòu)成的事實(shí),使得許多大系統(tǒng)的特征可以依據(jù)小系統(tǒng)的行為從因果關(guān)系上得到解釋,這種因果解釋有兩種:一是“從左到右”,即從宏觀到宏觀或者從微觀到微觀解釋,也就是用宏觀現(xiàn)象來解釋宏觀現(xiàn)象,或者用微觀現(xiàn)象來解釋微觀現(xiàn)象;二是“從下到上”,即從微觀到宏觀的解釋,也就是用微觀現(xiàn)象來解釋宏觀現(xiàn)象。意識(shí)與腦的神經(jīng)過程之間的關(guān)系就符合以上的因果解釋,即在因果上,具有第一人稱本體論的意識(shí)可以還原為第三人稱基質(zhì)(神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)),而不會(huì)導(dǎo)致對(duì)意識(shí)的消除。因?yàn)橄鄬?duì)于腦神經(jīng)過程來說,意識(shí)是較高層次的特征,屬于宏觀現(xiàn)象,但是由于其物理實(shí)現(xiàn)在腦系統(tǒng)之中,使得腦神經(jīng)過程是較低層次的特征,屬于微觀現(xiàn)象。例如,當(dāng)某人說“舉起我的胳膊”的時(shí)候,通過這一有意識(shí)的決定(行動(dòng)中的意向)導(dǎo)致他的胳膊被舉起(宏觀現(xiàn)象)。
而在微觀方面,他身體中的神經(jīng)元激發(fā)導(dǎo)致了身體的生理學(xué)變化,從而也使得胳膊被舉起。對(duì)此,塞爾指出,這是一種同時(shí)性的因果關(guān)系,從“較低層次的微觀現(xiàn)象導(dǎo)致了較高層次上的宏觀特征意義上講,這一因果關(guān)系可以說是自下而上的”。為了展示這種意識(shí)的發(fā)揮因果作用的層級(jí)模式,塞爾把這種關(guān)系表示為如圖。從哲學(xué)上解決了意識(shí)與大腦的關(guān)系之后,塞爾還注意到必須從細(xì)節(jié)上解釋意識(shí)在腦中是如何運(yùn)行的。為此,他把對(duì)這一問題的解決訴諸于科學(xué),即從神經(jīng)生物學(xué)的角度來探討意識(shí)如何產(chǎn)生、意向性之謎等問題。他把在經(jīng)驗(yàn)上研究意識(shí)的路數(shù)分為兩大陣營(yíng):一個(gè)是“積木路徑”(building-blockapproach),另一個(gè)是“統(tǒng)一場(chǎng)路徑”(unified-fieldapproach),這兩大路徑有著各自不同的主張?!胺e木路徑”把整個(gè)意識(shí)場(chǎng)處理為積木式的、或多或少彼此獨(dú)立的意識(shí)單元;而“統(tǒng)一場(chǎng)路徑”所研究的最初目標(biāo)不是諸如紅色的體驗(yàn)之類的東西,而是研究定性的、具有統(tǒng)一的主觀性特征的整個(gè)意識(shí)場(chǎng);對(duì)于這兩大路徑,塞爾認(rèn)為“統(tǒng)一場(chǎng)路徑”比“積木路徑”更有可能成功解決意識(shí)問題。
四、對(duì)生物學(xué)自然主義意識(shí)理論的反駁和回應(yīng)
塞爾的生物自然主義理論一經(jīng)提出,就面臨了諸多爭(zhēng)議和反駁。第一,這一理論對(duì)意識(shí)和意向性的理解都不同于寬泛意義上的自然主義,也與主流自然主義有所不同。因?yàn)檫@一理論雖然被冠以“自然主義”的旗號(hào),但塞爾本人對(duì)“自然”等范疇進(jìn)行改造,堅(jiān)決否定占主流、主導(dǎo)地位的計(jì)算機(jī)功能主義等具有還原性質(zhì)的自然主義,對(duì)以往哲學(xué)家一概持批評(píng)的態(tài)度。塞爾認(rèn)為,意識(shí)已經(jīng)是自然的一部分,心智事件和過程就像生物的消化、有絲分裂、成熟分裂、酶分泌一樣。因此,有學(xué)者稱這一理論為自然主義的“異類”或者“異端”。第二,針對(duì)生物自然主義意識(shí)理論四個(gè)論題本身,有以下四個(gè)方面的反駁和質(zhì)疑:這四個(gè)論題單獨(dú)看來是成立的,但是如果同時(shí)堅(jiān)持它們的話就會(huì)存在矛盾。例如,生物自然主義一方面強(qiáng)調(diào)意識(shí)具有實(shí)在性,另一方面認(rèn)為意識(shí)在因果上可以還原為腦狀態(tài),從而似乎可以推出意識(shí)狀態(tài)與大腦狀態(tài)具有同一性,這明顯成了塞爾批評(píng)過的心腦同一性理論。塞爾雖然反對(duì)任何形式的二元論和唯物主義一元論,但實(shí)際上生物自然主義還是一種二元論。塞爾強(qiáng)調(diào),意識(shí)是腦的一種生物、空間屬性,并且意識(shí)具有主觀性,這似乎蘊(yùn)含了在腦自身之中存在著公共的客觀屬性(任何神經(jīng)外科醫(yī)生都可以通過開顱手術(shù)而窺探到);而在這個(gè)意義上,又存在只能由持有它們的主體才能觀察到的、非客觀的主觀的屬性。這樣,塞爾又重新作出了經(jīng)典二元論的相同劃分:主觀/客觀、第一人稱和第三人稱,即一種“生物-性質(zhì)二元論”。塞爾在意識(shí)是否能夠還原問題上的態(tài)度也前后矛盾。塞爾一方面強(qiáng)調(diào)意識(shí)具有第一人稱本體論的特征,使得意識(shí)不適合還原,而在另一方面他又表明意識(shí)具有神經(jīng)生理基礎(chǔ),在因果上能夠還原為神經(jīng)生理基質(zhì),因而與自己矛盾了。
1.1注重教學(xué)改革與創(chuàng)新進(jìn)一步明確師范生培養(yǎng)目標(biāo),推進(jìn)課程體系建設(shè)與改革,追蹤專業(yè)前沿,及時(shí)更新教學(xué)內(nèi)容,不斷加強(qiáng)本課程群的教材和實(shí)驗(yàn)室建設(shè);不斷探索實(shí)踐性教學(xué)方法和手段,創(chuàng)新師范生職業(yè)技能實(shí)訓(xùn)模式,有效提高教學(xué)質(zhì)量和教學(xué)效果。
1.2構(gòu)建師范生教學(xué)技能訓(xùn)練體系針對(duì)教師教育技能的具體要求和內(nèi)容,構(gòu)建師范生教師教育綜合技能實(shí)訓(xùn)教學(xué)體系,將課程體系調(diào)整為學(xué)科專業(yè)基礎(chǔ)課和教師教育課程兩大方面。
1.2.1調(diào)整學(xué)科專業(yè)基礎(chǔ)課,完善師范生專業(yè)知識(shí)體系學(xué)科專業(yè)基礎(chǔ)課是師范生專業(yè)知識(shí)體系的基礎(chǔ),所涉及課程科目圍繞中學(xué)生物所涉及到的植物生物學(xué)、動(dòng)物生物學(xué)、人體解剖生理學(xué)、生態(tài)學(xué)等課程以及高中生物學(xué)必修模塊強(qiáng)調(diào)的分子與細(xì)胞、遺傳與進(jìn)化、環(huán)境和穩(wěn)態(tài)等內(nèi)容開設(shè),根據(jù)中學(xué)生物課程的知識(shí)重點(diǎn)和比例,設(shè)置專業(yè)課程結(jié)構(gòu),使師范生在本科學(xué)習(xí)過程中,便能形成比較完整、系統(tǒng)的學(xué)科知識(shí)體系。
1.2.2設(shè)立教師教育課程,加強(qiáng)學(xué)生教學(xué)基本技能的培訓(xùn)教師教育課設(shè)立公共教師教育課群和生物學(xué)科教師技能課群,前者包括心理學(xué)、教育學(xué)、現(xiàn)代教育技術(shù)、教育心理學(xué)、班級(jí)管理學(xué)、漢語口語、教師禮儀學(xué)、學(xué)科教學(xué)論、微格教學(xué)及教學(xué)技能訓(xùn)練、三筆字等常規(guī)課程,加強(qiáng)學(xué)生教學(xué)基本技能訓(xùn)練,如微格教學(xué)訓(xùn)練、教師口語訓(xùn)練和說課訓(xùn)練、三筆字訓(xùn)練、教學(xué)設(shè)計(jì)訓(xùn)練;同時(shí)設(shè)立生物學(xué)科教師技能課群,中學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與探究、生物學(xué)經(jīng)典事件解析、中學(xué)生物學(xué)教學(xué)案例分析、生物科學(xué)與社會(huì)生活等課程,進(jìn)一步提高教師的生物知識(shí)素養(yǎng)。
1.3注重學(xué)生現(xiàn)代教育技術(shù)教學(xué)技能訓(xùn)練包括現(xiàn)代教育技術(shù)、多媒體軟件制作、網(wǎng)絡(luò)課程創(chuàng)建、教學(xué)動(dòng)畫創(chuàng)作和DV創(chuàng)作等實(shí)驗(yàn)。讓學(xué)生運(yùn)用現(xiàn)代教育理論和現(xiàn)代信息技術(shù),通過對(duì)教與學(xué)過程和教與學(xué)資源的設(shè)計(jì)、開發(fā)、利用、評(píng)價(jià)和管理,以實(shí)現(xiàn)教學(xué)優(yōu)化的理論與實(shí)踐。
1.4加強(qiáng)教育教學(xué)技能訓(xùn)練實(shí)踐建立貫穿大學(xué)四年的循序漸進(jìn)的系統(tǒng)性教育技能培訓(xùn)體系,根據(jù)本科生四年的學(xué)習(xí)進(jìn)程分別安排教育調(diào)查、教育見習(xí)、教育服務(wù)、教育實(shí)習(xí)等教育實(shí)踐環(huán)節(jié),強(qiáng)化師范技能和實(shí)踐訓(xùn)練,提高學(xué)生的師范性素養(yǎng)。
1.4.1延展教育實(shí)踐時(shí)間,豐富實(shí)踐教學(xué)內(nèi)容一至三年級(jí)增加教育調(diào)查、教育見習(xí)、教育服務(wù),定期組織學(xué)生參與到中小學(xué)教育中去,進(jìn)行教學(xué)觀摩,加強(qiáng)聽課訓(xùn)練和教學(xué)技能的訓(xùn)練;熟悉教育環(huán)境,觀察教師學(xué)生的活動(dòng);充當(dāng)課堂教師的助手,指導(dǎo)學(xué)生開展課外活動(dòng),輔導(dǎo)個(gè)別學(xué)生或?qū)W生小組,批改學(xué)生作業(yè);同時(shí),要求學(xué)生實(shí)踐期間對(duì)中學(xué)的情況進(jìn)行調(diào)查與研究,撰寫出教學(xué)研究論文,相互交流[7]。通過豐富的教學(xué)實(shí)踐活動(dòng)讓師范生充分了解學(xué)校、教師和學(xué)生、教學(xué)過程,以及師生之間的關(guān)系,使學(xué)生提前進(jìn)入教師角色。
1.4.2加強(qiáng)教育實(shí)習(xí)活動(dòng),全面開展教育實(shí)踐活動(dòng)培養(yǎng)學(xué)生運(yùn)用大學(xué)四年學(xué)習(xí)到的教育理論、基本技能和專業(yè)知識(shí),去獨(dú)立分析和解決實(shí)際問題的能力,把理論和實(shí)踐結(jié)合起來,提高實(shí)踐動(dòng)手能力,為畢業(yè)后走上工作崗位打下一定的基礎(chǔ);讓師范生盡早了解當(dāng)今社會(huì)對(duì)教師教學(xué)技能的具體要求和內(nèi)容,通過在社會(huì)實(shí)踐中接觸與本專業(yè)相關(guān)的實(shí)際工作,增強(qiáng)師范生感性認(rèn)識(shí),培養(yǎng)和鍛煉綜合運(yùn)用所學(xué)的能力。
1.5延展教育教學(xué)技能的訓(xùn)練由于課時(shí)等各類因素的限制,培養(yǎng)師范生教學(xué)技能過程中存在著學(xué)生課堂講授學(xué)時(shí)少、技能訓(xùn)練時(shí)間少的狀況。因此要按照“優(yōu)化課內(nèi)、強(qiáng)化課外”的原則,為學(xué)生提供更多實(shí)訓(xùn)的時(shí)間和空間,加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)和訓(xùn)練環(huán)節(jié)。組織指導(dǎo)師范生進(jìn)行各項(xiàng)教師職業(yè)技能訓(xùn)練和比賽,定期開展教師職業(yè)技能競(jìng)賽,推薦師范生參加更高一級(jí)的高校師范生教師職業(yè)技能競(jìng)賽。各種社會(huì)實(shí)踐、社團(tuán)活動(dòng)和學(xué)校組織的各種大賽活動(dòng)等也是有效的實(shí)踐環(huán)節(jié)。積極組織和支持學(xué)生課余開展各項(xiàng)技能培訓(xùn)及比賽活動(dòng),比如“教學(xué)技能”、“說課”、“模擬上課”、“三筆一話”、“書法”、“多媒體課件制作”等大賽,同時(shí)“班級(jí)網(wǎng)頁設(shè)計(jì)”、“教師形象”、“朗誦”、“演講”、“辯論賽”等一系列的大學(xué)生校園活動(dòng)比賽也是很好的培訓(xùn)方式。這些培訓(xùn)與比賽活動(dòng)有利于培養(yǎng)學(xué)生的基本技能,也提升了學(xué)生的人文素養(yǎng)。
1.6教學(xué)案例資源建設(shè)規(guī)范,建立網(wǎng)絡(luò)資源庫(kù)“教學(xué)案例資源”是指中小學(xué)教學(xué)案例、微格技能實(shí)訓(xùn)等案例的資源包。資源包應(yīng)包括教學(xué)單元內(nèi)容及教學(xué)設(shè)計(jì)方案、教學(xué)單元的課件及學(xué)生作品等、教學(xué)單元的視頻錄像、教學(xué)反思(實(shí)訓(xùn)總結(jié))與專家點(diǎn)評(píng)等四個(gè)部分。特別是名師授課的課堂案例,定時(shí)組織學(xué)生進(jìn)行觀摩。通過豐富的“教學(xué)案例資源”的學(xué)習(xí),了解各種教學(xué)思想、教學(xué)理念和教學(xué)模式,提升師范生的教育教學(xué)技能。
1.7在中學(xué)建立長(zhǎng)期的教育實(shí)踐基地,帶動(dòng)師生服務(wù)基礎(chǔ)教育
1.7.1注重高校教育與基礎(chǔ)教育的對(duì)接加強(qiáng)與實(shí)習(xí)中學(xué)的合作研究,注重教學(xué)與基礎(chǔ)教育新課改的對(duì)接,組織師生走向基礎(chǔ)教育一線,通過聽課、實(shí)習(xí)見習(xí)指導(dǎo)、開設(shè)講座、聯(lián)合開展課題研究等各項(xiàng)活動(dòng),開展教育教學(xué)實(shí)踐活動(dòng)。學(xué)生在實(shí)際的教學(xué)實(shí)踐中不僅可以早日進(jìn)入教師角色,明白教師的責(zé)任,還可以了解現(xiàn)代中學(xué)生的特點(diǎn),并發(fā)現(xiàn)自己在教學(xué)中的優(yōu)點(diǎn)和不足,有助于在今后的學(xué)習(xí)中有目的地提高自身的教學(xué)技能。同時(shí),邀請(qǐng)中學(xué)優(yōu)秀一線教師來學(xué)校作報(bào)告?zhèn)魇诮虒W(xué)技能,以及在實(shí)際教學(xué)中遇到困難和突發(fā)事件時(shí)的解決方法,并親自指導(dǎo)學(xué)生的教學(xué),提高教學(xué)技能。
1.7.2與實(shí)踐基地建立互惠關(guān)系積極為實(shí)踐教學(xué)學(xué)校的教育教學(xué)改革與發(fā)展提供新知識(shí)、新技術(shù)、新信息指導(dǎo),提供師資培訓(xùn)、儀器設(shè)備的使用及圖書的借閱等服務(wù)和幫助。向?qū)嵺`基地師生免費(fèi)開放生物標(biāo)本館,對(duì)基地教師進(jìn)行生物新課程及實(shí)驗(yàn)培訓(xùn),共同承擔(dān)實(shí)踐教學(xué)與基礎(chǔ)教育方面的研究課題并共享研究成果等。經(jīng)常派學(xué)生到基地幫助開展一些有意義的活動(dòng),如課外輔導(dǎo)、義教、指導(dǎo)中學(xué)生開展生物與社會(huì)等方面的研究性學(xué)習(xí)等。
1.8注重高校教師自身的師范性影響從更加廣義的師范生教師職業(yè)技能培養(yǎng)而言,不能將師范生教師職業(yè)技能訓(xùn)練局限于幾門課程上,每一位高校教師在課堂上都是一種最真實(shí)的“示范”。教師教育課程教師、學(xué)科教法教師、專業(yè)課教師等各個(gè)課程教師的教育態(tài)度、教學(xué)能力、教學(xué)風(fēng)格、知識(shí)面與基本功等教師職業(yè)技能無疑都潛移默化地影響著學(xué)生,甚至這種影響更深刻,產(chǎn)生的積極效應(yīng)和潛移默化效果是顯而易見的。
1.9積極進(jìn)行師資隊(duì)伍建設(shè)建立一支穩(wěn)定的、有豐富教育理論和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的教師隊(duì)伍。對(duì)教師進(jìn)行多渠道培訓(xùn),使其具有豐富的教育理論知識(shí),熟悉中學(xué)生物教材,了解課程標(biāo)準(zhǔn),掌握課程改革的趨勢(shì)。注重青年教師培養(yǎng),不斷提升教師隊(duì)伍整體水平;適時(shí)吸納青年教師和具有豐富實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)和學(xué)術(shù)水平高的人才,建立合理的教學(xué)梯隊(duì)結(jié)構(gòu),確保教學(xué)團(tuán)隊(duì)的可持續(xù)發(fā)展。注重青年教師培養(yǎng),組織有經(jīng)驗(yàn)的教師對(duì)其講授內(nèi)容、教學(xué)方法等進(jìn)行評(píng)議、指導(dǎo)、鑒定。通過教學(xué)團(tuán)隊(duì)內(nèi)的傳、幫、帶,提高教師隊(duì)伍整體教學(xué)水平。
1.10加強(qiáng)教研室教學(xué)研究活動(dòng)開展形式多樣的教研室教學(xué)研究活動(dòng),促進(jìn)教師業(yè)務(wù)能力的不斷提高。組織教研室教師進(jìn)行聽課評(píng)課活動(dòng),以期探索課堂教學(xué)最優(yōu)方式,提高課堂教學(xué)效率。日常注重教法、學(xué)法的教科研學(xué)習(xí),把搜集來的先進(jìn)教改信息反饋給教師,用先進(jìn)的教學(xué)理論指導(dǎo)教學(xué);使每位教師都能遵照學(xué)院的教學(xué)實(shí)施計(jì)劃,增強(qiáng)課堂教學(xué)的目的性和計(jì)劃性。
1.11建立全面合理的評(píng)價(jià)體系成立生物專業(yè)教師職業(yè)技能訓(xùn)練團(tuán)隊(duì),從知識(shí)與從教技能等方面考核和評(píng)價(jià)學(xué)生的教師教育技能培訓(xùn)。多方面、多角度探討和建立學(xué)生學(xué)習(xí)成績(jī)的綜合評(píng)價(jià)體系,全面衡量學(xué)生的實(shí)踐技能與創(chuàng)新能力,促進(jìn)學(xué)生全面發(fā)展。
1.2對(duì)教師科研團(tuán)隊(duì)建設(shè)與管理制度的思考科研團(tuán)隊(duì)建設(shè)的優(yōu)劣,直接關(guān)系著每位教師科研積極性與科研質(zhì)量的高低,因此好的科研團(tuán)隊(duì)管理制度,對(duì)科研團(tuán)隊(duì)的建設(shè)至關(guān)重要。然而對(duì)于多數(shù)地方高校來說,由于合并升本時(shí)間短,管理經(jīng)驗(yàn)少,因此管理方面沒有態(tài)度規(guī)章與制度遵循,很多時(shí)候科研團(tuán)隊(duì)形成的項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)決策權(quán)往往由主持人一人決定,其他人很少參與并且不知道經(jīng)費(fèi)的分配等具體情況,這樣造成團(tuán)隊(duì)成員積極性不高,具體事務(wù)也不愿參與,就造成了主持人管理經(jīng)費(fèi)主持人完成課題。結(jié)果常常是效率低下,項(xiàng)目成果質(zhì)量不高,團(tuán)隊(duì)生命力不強(qiáng)。因此,創(chuàng)建高績(jī)效科研團(tuán)隊(duì),必需有一套科學(xué)的內(nèi)部管理制度,用來保障科研工作任務(wù)按計(jì)劃、保質(zhì)量的完成。這首先這需要對(duì)現(xiàn)有管理制度進(jìn)行修改和完善,同時(shí)增加校內(nèi)教師科研團(tuán)隊(duì)的外部支持,如學(xué)??蒲胁块T、教務(wù)部門以及后勤保障部門等,配套相應(yīng)的一部分經(jīng)費(fèi)對(duì)項(xiàng)目組進(jìn)行建設(shè),以筆者所在宜春學(xué)院,科研部門對(duì)部分教師組建的科研團(tuán)隊(duì)每年均投入十多萬元供采購(gòu)小型儀器設(shè)備,并提供部分經(jīng)費(fèi)用于團(tuán)隊(duì)成員對(duì)外交流;教務(wù)部門可用科研成果沖抵教學(xué)工作量;后勤部門提供辦公條件等配套設(shè)施,這樣的條件對(duì)科研團(tuán)隊(duì)的支持力度很明顯。其次在團(tuán)隊(duì)內(nèi)部建立有效的激勵(lì)及約束機(jī)制,增加團(tuán)隊(duì)的生命力,與此同時(shí)建立與之相適應(yīng)的學(xué)習(xí)、培訓(xùn)制度,激勵(lì)制度以及績(jī)效管理制度等,讓團(tuán)隊(duì)成員可以不斷學(xué)習(xí)新知識(shí)與新技能,并增加團(tuán)隊(duì)的溝通,增進(jìn)協(xié)作,有效提高團(tuán)隊(duì)成員的科研積極性,最終實(shí)現(xiàn)提升團(tuán)隊(duì)整體學(xué)術(shù)水平的目標(biāo)。例如筆者所在宜春學(xué)院的部分團(tuán)隊(duì),每學(xué)期會(huì)定期安排會(huì)議交流,探討近期完成課題的進(jìn)展,所遇到的問題等,群策群力探討解決方法;在項(xiàng)目申報(bào)前期成員對(duì)申報(bào)書進(jìn)行交流,相互提出問題與建議,加以改進(jìn);這些舉措有效的增進(jìn)了團(tuán)隊(duì)成員的科研水平,加快了項(xiàng)目完成的進(jìn)度與質(zhì)量,提高了團(tuán)隊(duì)成員申報(bào)項(xiàng)目的成功率,大大提高了團(tuán)隊(duì)成員從事科研工作的積極性與科研質(zhì)量。
2學(xué)生科研團(tuán)隊(duì)
2.1實(shí)行導(dǎo)師制與指導(dǎo)畢業(yè)論文讓學(xué)生參與科研導(dǎo)師制是利用教師的科研項(xiàng)目與科研技能讓學(xué)生參與課題研究的一種方式,目的是在于培養(yǎng)學(xué)生的同時(shí),也增加教師的科研積極性,提高師生科研水平和質(zhì)量;并培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí)、實(shí)踐能力、科研能力的新型方式。筆者所在的宜春學(xué)院生物類專業(yè),一般有科研工作在身的教師,在學(xué)生二年級(jí)接觸專業(yè)課開始,都會(huì)進(jìn)行學(xué)生和教師的相互接觸,接觸中教師會(huì)介紹自己的研究方向和課題以及實(shí)驗(yàn)室的情況,學(xué)生介紹自己的學(xué)業(yè)、生活、愛好等個(gè)人情況,達(dá)到相互了解,其后,可根據(jù)學(xué)生意愿參與到學(xué)生科研團(tuán)隊(duì)學(xué)習(xí),教師可依據(jù)科研內(nèi)容與其本科論文相結(jié)合開展指導(dǎo)工作。此外,畢業(yè)生的畢業(yè)論文在本科院校學(xué)生科研培養(yǎng)過程中占據(jù)著主要地位,是學(xué)生本科四年綜合能力的集中體現(xiàn),也是重要的綜合性科研訓(xùn)練教學(xué)環(huán)節(jié)。按照一般學(xué)校的培養(yǎng)方案安排,畢業(yè)論文完成往往是大學(xué)四年級(jí)第二學(xué)期的工作,但那段時(shí)期,考公務(wù)員、找工作和實(shí)習(xí)占用學(xué)生大量時(shí)間,放任自流的話常常使畢業(yè)論文流于形式。為了更好地指導(dǎo)學(xué)生完成畢業(yè)論文,教師通常會(huì)提前介入,并找一些具體問題和他們自己感興趣的問題,提前一年將題目出好,要求本科生構(gòu)思;同時(shí)對(duì)那些主動(dòng)性強(qiáng)的學(xué)生,吸收他們進(jìn)入團(tuán)隊(duì)一起參與科研活動(dòng)。
2.2對(duì)學(xué)生科研團(tuán)隊(duì)管理與建設(shè)的思考建立學(xué)生科研團(tuán)隊(duì)就是以學(xué)術(shù)研究為中心、借助教師的課題和項(xiàng)目為依托條件,為培養(yǎng)其科研思維與技術(shù)的一批有協(xié)作精神的學(xué)生群體。生物類教師的科研往往實(shí)驗(yàn)性強(qiáng),需要學(xué)生有較強(qiáng)的實(shí)踐動(dòng)手能力,但不少實(shí)驗(yàn)試劑有一定毒性,需要安全操作和嚴(yán)格管理,因此,在團(tuán)隊(duì)設(shè)立之初,除教師指導(dǎo)外,需要學(xué)生團(tuán)隊(duì)負(fù)責(zé)人,發(fā)揮負(fù)責(zé)人的角色作用;此外,教師可組織參加部分學(xué)術(shù)活動(dòng),如安排組內(nèi)成員匯報(bào),共同學(xué)習(xí)一些儀器的使用等;而在完成某些階段性的工作后,可適度安排一些團(tuán)體的娛樂活動(dòng),讓團(tuán)隊(duì)成員增進(jìn)了解,提升人際關(guān)系凝聚力;在團(tuán)隊(duì)建設(shè)中,可引入組內(nèi)淘汰機(jī)制,即通過觀察團(tuán)隊(duì)各成員在計(jì)劃項(xiàng)目實(shí)施過程中的表現(xiàn),可將消極應(yīng)對(duì)項(xiàng)目的成員淘汰出團(tuán)隊(duì),再引進(jìn)擁有較高興趣和較好研究態(tài)度的新成員,采用能進(jìn)能出的機(jī)制來提高研究狀態(tài)。為了鼓勵(lì)學(xué)生積極參與本科生科研訓(xùn)練,很多地方高校都出臺(tái)了一些鼓勵(lì)措施,比如大學(xué)生創(chuàng)新競(jìng)賽、大學(xué)生實(shí)踐項(xiàng)目等活動(dòng),但由于學(xué)生缺乏相關(guān)科研素質(zhì)的培養(yǎng),主動(dòng)性不高,往往是極少數(shù)學(xué)生有積極性,不少是教師協(xié)助學(xué)生完成項(xiàng)目申報(bào),這些一方面反映出多數(shù)學(xué)生缺少科研訓(xùn)練及獨(dú)立的科研思考意識(shí),同時(shí)也暴露出科研獎(jiǎng)勵(lì)政策對(duì)學(xué)生的吸引程度不高,還應(yīng)有更多的輔助保障措施進(jìn)行實(shí)施,如可采取科研項(xiàng)目結(jié)題答辯或,并結(jié)合指導(dǎo)老師意見的對(duì)應(yīng)學(xué)分轉(zhuǎn)化機(jī)制等。
1引言
在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究論文中,常會(huì)碰到一些看似簡(jiǎn)單,實(shí)則使人頭痛的物理量、計(jì)量單位和符號(hào)問題。例如,作者常常需要對(duì)研究的目標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行描述,其中一個(gè)重要的指標(biāo)就是其分子大小。在我們的編輯實(shí)踐當(dāng)中發(fā)現(xiàn),來稿中很多研究論文在描述關(guān)于物質(zhì)分子大小時(shí)存在著這樣的現(xiàn)象:多數(shù)研究論文仍然使用“分子量”這一物理量,以“道爾頓”或“千道爾頓”為單位(××D或××kD)來描述;有的使用了“相對(duì)分子質(zhì)量”這一物理量但是書寫卻不正確;只有極少部分論文正確地使用和書寫了這一物理量。究竟應(yīng)如何正確使用?
2描述物質(zhì)分子大小的物理量
對(duì)所研究的原子和分子的質(zhì)量進(jìn)行描述,以往多使用“道爾頓(D)”這一單位。英國(guó)化學(xué)家JohnDalton(1766-1844)是近代化學(xué)之父,在化學(xué)方面提出了定量的概念,總結(jié)出了質(zhì)量守恒定律、定比定律和化合量(當(dāng)量)定律。在此基礎(chǔ)上,1803年又發(fā)現(xiàn)了化合物的倍比定律,提出了元素的原子量概念,并制成最早的原子量表。人們?yōu)榱思o(jì)念道爾頓,以他的名字作為原子質(zhì)量單位,定義為12C原子質(zhì)量的1/12,1D=1/Ng,N為阿伏加德羅常數(shù)。
以往我們常用的描述物質(zhì)分子大小的物理量是分子量,它是“單質(zhì)或化合物以分子形式存在時(shí)的相對(duì)質(zhì)量”[1]。我們知道,以一個(gè)12C重量的1/12為標(biāo)準(zhǔn),其他的原子質(zhì)量同這標(biāo)準(zhǔn)相對(duì)照得出相對(duì)質(zhì)量,稱為這個(gè)原子的原子量[2]。分子量是物質(zhì)分子或特定單元的平均質(zhì)量與核素12C原子質(zhì)量的1/12之比,等于分子中原子的原子量之和[3]。
對(duì)于分子來說,一個(gè)分子的質(zhì)量,用道爾頓表示時(shí),應(yīng)該是“蛋白質(zhì)A的質(zhì)量為××道爾頓”。因?yàn)榉肿恿繛樵撐镔|(zhì)的分子的質(zhì)量與12C原子的質(zhì)量的1/12之比,所以如果說“蛋白質(zhì)A的分子量為××道爾頓”,乃是不正確的表示方法。
3國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的物理量
道爾頓是核物理與反應(yīng)堆技術(shù)中慣用的質(zhì)量舊單位,自1960年起,用原子質(zhì)量單位(u)代替它,規(guī)定1dalton=1u≈1.6605402×10-27kg[4]。
作為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)一致,現(xiàn)行有效的1993年修訂的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《量和單位》選擇了“相對(duì)原子質(zhì)量”和“相對(duì)分子質(zhì)量”這兩個(gè)物理量名稱,并在GB3102.8—93的引言中說明:“本標(biāo)準(zhǔn)中的相對(duì)原子質(zhì)量Ar和相對(duì)分子質(zhì)量Mr,以前分別稱為原子量和分子量,在使用中,應(yīng)有計(jì)劃地逐步采用本標(biāo)準(zhǔn)的名稱。”
所謂相對(duì)原子質(zhì)量Ar是指“元素的平均原子質(zhì)量與核素12C原子質(zhì)量的1/12之比”,即Ar=m/mu(m為元素的平均原子質(zhì)量);物質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量是指“物質(zhì)的分子或特定單元的平均質(zhì)量與核素12C原子質(zhì)量的1/12之比”,即Mr=m/mu(m為物質(zhì)的平均分子質(zhì)量)。它們是量綱一的量,其單位為1[5]161。
4正確運(yùn)用“相對(duì)分子質(zhì)量”等物理量和單位
由于歷史的原因,在道爾頓當(dāng)初提出原子量的概念時(shí)指出,“同一種元素的原子有相同的重量(weight),不同元素的原子有不同的重量。”因此“atomicweight”在中文里翻譯成了“原子量”。但是當(dāng)時(shí)重量和質(zhì)量(mass)是相同的概念,實(shí)際中獲得的都是原子的相對(duì)質(zhì)量,但仍然稱作原子量,這也許是原子量和分子量的單位一直用“道爾頓”的原因。
但國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了應(yīng)當(dāng)使用“相對(duì)分子質(zhì)量”來描述分子的相對(duì)大小,那么,關(guān)于道爾頓(D),在現(xiàn)實(shí)中用作“原子質(zhì)量”或“分子質(zhì)量”單位時(shí),原來的1D=1u;用作“相對(duì)原子質(zhì)量”或“相對(duì)分子質(zhì)量”單位時(shí),原來的1D=1,即其單位為1。
雖然“道爾頓”屬非SI單位即非法定計(jì)量單位,但由于歷史的原因,鑒于目前科學(xué)界尚有大量使用“D”或“kD”的文獻(xiàn)存在,在某些類型的論文寫作中,作者往往會(huì)堅(jiān)持在某些數(shù)據(jù)中使用“D”或“kD”。例如在綜述類論文中,被引用文獻(xiàn)數(shù)據(jù)中“D”常常不可避免。在這種情況下,有人[6]認(rèn)為應(yīng)尊重作者的選擇,雖然期刊中會(huì)出現(xiàn)“非法的”D,但不應(yīng)視為“違法”。超級(jí)秘書網(wǎng)
5正確運(yùn)用“相對(duì)分子質(zhì)量”的量符號(hào)
既然明確了描述物質(zhì)分子大小的物理量,在使用“相對(duì)分子質(zhì)量”這一量符號(hào)時(shí),很多期刊沒有能準(zhǔn)確把握,造成了很多錯(cuò)誤。在國(guó)內(nèi)免疫學(xué)相關(guān)的7本雜志以及其他生物學(xué)、醫(yī)學(xué)類的雜志,發(fā)現(xiàn)在稿約、正文以及SDS-PAGE、Westernblotting等結(jié)果圖中,“相對(duì)分子質(zhì)量”這一量符號(hào)出現(xiàn)了很多種寫法,如:Mr、Mr、Mr、Mr以及仍然沿用kD為單位等多種情況。那么,究竟應(yīng)該如何書寫這一量符號(hào)呢?根據(jù)科技書刊外文字符使用規(guī)范[5]197-201:量符號(hào)、代表量和變動(dòng)性數(shù)字及坐標(biāo)軸的下標(biāo)符號(hào)應(yīng)用斜體;量符號(hào)中除表示量和變動(dòng)性數(shù)字及坐標(biāo)軸的下標(biāo)字母用正體。根據(jù)這一原則,相對(duì)分子質(zhì)量中M是量符號(hào),應(yīng)用斜體;下標(biāo)r是relative(相對(duì)的)的首字母,不是量符號(hào),也不是代表變動(dòng)性數(shù)字,更不是坐標(biāo)軸符號(hào),應(yīng)使用正體。因此,正確的寫法是Mr。類似地,相對(duì)原子質(zhì)量的正確寫法是Ar。
6結(jié)語
生物學(xué)和醫(yī)學(xué)類科技期刊是廣大科研工作者展示其學(xué)術(shù)成果的舞臺(tái),要科學(xué)地將一系列學(xué)術(shù)成果展現(xiàn)出來,要實(shí)現(xiàn)科技期刊的標(biāo)準(zhǔn)化與規(guī)范化,就要改變?nèi)藗冮L(zhǎng)期以來的習(xí)慣,需要廣大科(下轉(zhuǎn)257頁)(上接256頁)技期刊編輯擔(dān)負(fù)起科技期刊的社會(huì)責(zé)任,加強(qiáng)宣傳和普及,需要作者和編輯同仁長(zhǎng)期不斷的共同努力,才能最終得以實(shí)現(xiàn)。
參考文獻(xiàn)
[1]辭海編輯委員會(huì).辭海:縮印本[M].1979版,上海:上海辭書出版社,1979:274.
[2]原子量[OL].(2008-12-07)[2009-02-12]./view/101827.htm.
[3]分子量[OL].(2008-10-10)[2009-02-12]./view/346251.htm.